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拟南芥细胞培养原理及操作步骤

实验概要了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。实验原理植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并在振荡条件下培养一段时间后,可形成分散县浮培养物。良好的县浮培养物应具备以下特征:(1)主要有单细胞和小细胞团组成;(2)细胞具有量盛的生长和分裂能力,增殖速度快;(3)大多数细胞在形态上应具有分生细胞的特征,它们多呈等径形,核一质比率大,胞质浓厚,无液胞化程度较低。在液体悬浮培养过程中应注意及时进行细胞继代培养,因为当培养物生长到一定时期将进入分裂的静止期。对于多数悬浮培养物来说,细胞在培养到第18~25d 时达到最大的密度,此时应进行第一次继代培养。在继代培养时,应将较大的细胞团块和接种物残渣除去。若从植物器官或组织......阅读全文

拟南芥转化

实验概要本实验以拟南芥为试材介绍了转化及筛选的过程。主要试剂1. 渗透培养基:(1L)1/2xMurashige-Skoog5%蔗糖0. 5克MES用KOH调至pH5. 7再加:10微升lmg/ml的6-BA母液200微升Silwet L-77Top agar0. 1%琼脂PNS或水溶液2. 筛选培

拟南芥的培养

实验概要本实验方法就拟南芥的培养技术进行了简单介绍。主要试剂1. PNS营养液:每升含2.5m1 1M磷酸缓冲液(pH5.5)5ml 1M KN03,2m1 1M MgSO4.7H20,2m1 1M Ca(N03)a.4H20,2.5m1 20mM  Fe.EDTA,1 ml MS微量兀素。2. 人

拟南芥的转化

实验概要本实验采用花浸泡法利用农杆菌介导将目的基因转入拟南芥。主要试剂YEB液体培养基,LB培养基,0.1 M CaCl2,0.05 M MgSO4,花浸泡缓冲液(0.5XMS,5%蔗糖,0. 03%Silwet L-77 ),Rif,Kan主要设备摇床,离心机,培养钵,温室,托盘,塑料薄膜实验材料

农杆菌介导转化拟南芥

实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法,了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种十字花科植物,二年生草本,高7~40厘米,花期3~5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和

拟南芥培养箱怎么培养拟南芥培呢?这套方法为你解惑

   拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。拟南芥培养箱可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。然而,怎么培养好这种小植物可能不是那么容易。    拟南芥培养箱培养拟南芥步骤:    1、首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用无水酒精进行处理(也可

拟南芥转基因植株的鉴定

实验概要本实验介绍了拟南芥转基因植株的初步鉴定方法,包括:阳性苗的筛选,GUS基因表达分析,组织PCR和RT-PCR分析。主要试剂0.2%的Triton X-100,10%的次氯酸钠,含20 mg/L Hygromycin的MS培养基,X-Gluc,75%乙醇,0.25 N NaOH,0.25

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料 叶组织 试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液 仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器 实验步骤 1. 组织匀浆 (1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。 (2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料 叶组织试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器实验步骤 1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲

拟南芥微管结合蛋白CSI1

  3月16日,植物科学研究权威期刊Plant Cell在线发表了中科院上海生命科学研究院植生生态所植物分子遗传国家重点实验室薛红卫研究组的最新研究成果:拟南芥ARCP蛋白CSI1通过结合微管,维持微管稳定性并调控根和花药的发育。  微管是由α、β微管蛋白异二聚体通过非共价键形成的管

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料叶组织                                                          试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液                                                          仪器、耗材烧杯