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噬菌体展示技术常见问题与解答

1、在噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点? M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开。而其他用于噬菌体展示的噬菌体,如T7, T4和Lambda噬菌体,均为裂解性噬菌体,每轮淘选之间都需要花时间进行纯化,以避免淘选扩增的噬菌体污染有细胞蛋白。 2、pIII蛋白展示和pVIII蛋白展示有什么不同? 丝状噬菌体展示系统一般是在包膜蛋白pIII或pVIII的N端融合外源多肽。每个病毒子含5个拷贝的pIII蛋白,这五个蛋白都可以融合短肽而不影响噬菌体的感染力。而对主要包膜蛋白pVIII来说,每个病毒子含~2700个拷贝之多,其中约10%能有效地融合外源多肽或蛋白。这样,以pIII融合子方式表达的多肽便是低价的(......阅读全文

噬菌体展示技术常见问题与解答

  1、在噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点?    M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开

噬菌体展示技术

1985年,Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面,从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另

噬菌体展示技术与抗体药物研发

  2018年诺贝尔化学奖尘埃落定,授予Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人。其中化学奖一半的奖金授予美国科学家Frances Arnold,奖励她的工作实现了酶的定向进化;另一半的奖金授予英国科学家Gregory Winter以及美国科学家Geo

噬菌体展示技术介绍

噬菌体展示技术(phage display technology)是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下,使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达,融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或

SWATH技术常见问题与解答

SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次

SWATH技术常见问题与解答

   SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次可

免疫荧光技术常见问题与解答

1、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项? 参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是: (1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey ant

噬菌体展示技术的原理及应用

将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示

移液器常见问题与解答大全

移液器是实验室里面最长使用的实验仪器之一,基本上每一个实验室人员都曾经或现在使用过移液器,因而也会遇到移液器使用时的一些问题。笔者总结归纳了移液器使用时常见的问题与解答大全,希望对于大家有所帮助:移液器使用时常见的问题与解答大全:问题可能原因提议移液器渗漏多道移液器吸嘴里不均衡的液体水平·吸嘴与移液

浓缩仪常见问题与解答

1、样品浓缩仪与氮吹仪的区别?答:样品浓缩和氮吹仪都是用氮气来进行吹扫,只是各厂家的命名不一样。2、如何能让实验速度更快、效率更高?答:样品浓缩仪的原理是通过提高样品的温度,使样品的溶剂在无氧状态下进行挥发,从而快捷高效的达到浓缩的目的。影响实验速度的原因有两个:1)加热的温度。2)气体的流量及气体