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WB检测中二抗的选择方法

WB检测之二抗 二抗选择 二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。 二抗选择要考虑的问题有: ①对单抗类一抗,二抗需与一抗的类别或亚类相匹配(多抗类一抗主要是IgG类免疫球蛋白故相应二抗就是抗IgG抗体,不作考虑)。 一抗类别或亚类 二抗 IgM 抗IgM IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3 抗IgG、抗IgG1、抗IgG2a、抗IgG2b、抗IgG3 未知 抗IgG ②某些组织或细胞含有较多的Fc受体,如脾脏、淋巴细胞等,此时二抗需要选择抗IgG F(ab’)2二抗,避免各种Ig保守结构域导致的交叉反应......阅读全文

WB检测中二抗的选择方法

WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问

WB检测中二抗的选择方法

  WB检测之二抗   二抗选择    二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二

如何正确选择WB检测的抗体?

WB免疫印迹法,也称免疫转移技术IBT(Immunoblotting),是Towbin将1975年Southern发明的Soutnern blotting技术应用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫学检测方法。其操作简便,主要用于未知蛋白检测及抗原组分、抗原决定簇鉴定,同时也用于未知抗体的检测和单

如何正确选择WB检测的抗体?

WB免疫印迹法,也称免疫转移技术IBT(Immunoblotting),是Towbin将1975年Southern发明的Soutnern blotting技术应用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫学检测方法。其操作简便,主要用于未知蛋白检测及抗原组分、抗原决定簇鉴定,同时也用于未知抗体的

wb二抗怎么融化

wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。

elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响

  二抗孵育  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。  吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如

elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响

  二抗孵育  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。  吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如

WB一抗用什么稀释

建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释,不是再做1:100-1:1000稀释,注意了。其实没有必要分装,一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装,建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下,可以溶解

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或