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甲基化和异戊烯化作用的检测实验_羧基甲基化的证实

实验材料细胞试剂、试剂盒甲基甲硫氨酸仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸标记细胞(约 1X107)。2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。3. 荧光光谱法观察,切下蛋白带,放在一个 0.5 ml 的微型离心管中。4. 加 100 μl 的蒸馏水,当凝胶片膨胀时,去掉纸支持物。5. 加 200 μl 的 1 mol/L NaOH 到含有凝胶片的试管中。6. 立即将试管放到闪烁瓶中,用部分闪烁液填充(在 20 ml 小瓶中加 2.5 ml 即可),拧紧螺帽。7. 37℃ 保温 24 小时。8. 从小瓶中取出试管,再加 7.5 ml 闪烁液,计数样本的放射性。展开......阅读全文

甲基化和异戊烯化作用的检测实验_羧基甲基化的证实

实验材料 细胞 试剂、试剂盒 甲基甲硫氨酸 仪器、耗材 SDS-PAGE 实验步骤 1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸标记细胞(约 1X107)。 2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。 3. 荧光光谱法观

甲基化和异戊烯化作用的检测实验

多聚类异戊二烯取代物的确证羧基甲基化的证实实验材料蛋白                                                          试剂、试剂盒牛血清白蛋白                                                    

甲基化和异戊烯化作用的检测实验

多聚类异戊二烯取代物的确证 羧基甲基化的证实             实验材料 蛋白 试

甲基化和异戊烯化作用检测—多聚类异戊二烯取代物确证

实验材料蛋白试剂、试剂盒牛血清白蛋白氢氧化氨仪器、耗材试管实验步骤1. SDS-PAGE 和电洗脱分离目的蛋白。2. 洗脱的蛋白中加牛血清白蛋白载体使最终浓度为 0.1 mg/ml,并用 5 倍体积的含 1.5% 氢氧化氨的冰冷丙酮处理 30 分钟以沉淀蛋白。3. 离心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空

DNA甲基化的定义和作用

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性

甲基化的甲基化的功能

甲基化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰,调节基因的表达和关闭,与癌症、衰老、老年痴呆等许多疾病密切相关,是表观遗传学的重要研究内容之一。 最常见的甲基化修饰有DNA甲基化和组蛋白甲基化。DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、D

甲基化的检测方法

(1) 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP)用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到

DNA甲基化的作用原理

DNA甲基化是最早被发现、也是研究最深入的表观遗传调控机制之一。广义上的DNA甲基化是指DNA序列上特定的碱基在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)的催化作用下,以S—腺苷甲硫氨酸(S—adenosyl methionine,SAM)作为甲基供体,通过共价键结合的

DNA甲基化的作用特点

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性

概述甲基化的功能作用

  甲基化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰,调节基因的表达和关闭,与癌症、衰老、老年痴呆等许多疾病密切相关,是表观遗传学的重要研究内容之一。 最常见的甲基化修饰有DNA甲基化和组蛋白甲基化。  DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA