Antpedia LOGO WIKI资讯

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol/L Tris-HCl,pH 7.52. 让细胞膨胀 5~10 分钟。用相差显微镜监测膨胀过程。3. 用研杵 B ( 小间隙型)研磨几下使膨胀细胞破碎。4. 立刻加入 8 ml 2.5x MS 缓冲液至终浓度为 1x MS。用封口膜封住匀浆器顶端,倒转数次使溶液混匀(如果要进行标志酶检测,还要留下部分匀浆 )。2.5 x MS 缓冲液:525 mmol/L 甘露醇175 mmol/L 蔗糖12.5 mmol/L Tris-HCl,pH 7.52.5 mmol/L EDTA,pH 7.51 x MS 缓冲液:210 mmol/L 甘露醇......阅读全文

通用型植物线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书

  通用型植物线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   通用型植物线粒体DNA萃取试剂是一种旨在通过物理或化学破膜及离心处理方法,从植物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器,然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体DNA的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

通用型植物线粒体DNA萃取试剂盒使用说明(一)

主要用途 通用型植物线粒体DNA萃取试剂是一种旨在通过物理或化学破膜及离心处理方法,从植物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器,然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体DNA的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜植物组织,包括叶片(leaf)、谷粒(grai

肌肉干细胞研究最新进展

  肌肉干细胞可发育分化为成肌细胞(myoblasts),后者可互相融合成为多核的肌纤维,形成骨骼肌最基本的结构。  人类胚胎和成人体内都存在肌肉干细胞。胚胎和胎儿的肌肉干细胞增殖使得肌肉组织发展;成年人体内的肌肉干细胞亦被称为卫星细胞,处于休眠状态,沿着肌肉纤维而分布。在经过强烈运动或是受到外界伤

膜蛋白的纯化实验

实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

膜蛋白的纯化实验

实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

动物细胞活性内质网分离试剂盒使用说明

主要用途YIJI动物细胞活性内质网分离试剂是一种旨在通过机械或化学处理和差速离心方法,从动物细胞中分离出完整的活性内质网细胞器组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种细胞(人体、动物、昆虫等)的活性内质网的制备。其制备物产量高,活性保证,可以被用于细胞色素P450系

抗原制备

不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位

真菌/酵母细胞活性内质网(ER)分离试剂盒

  真菌/酵母细胞活性内质网(ER)分离试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   真菌/酵母细胞活性内质网(ER)分离试剂是一种旨在通过机械或化学处理和差速离心方法,从真菌/酵母细胞中分离出完整的活性内质网细胞器组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜培

液相芯片技术的原理与应用进展

   液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原 抗体、酶 底物、配体 受体的结合

液相芯片技术的原理与应用

液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体

Cell子刊:小分子助力从干细胞中分离出分化细胞

  多能干细胞能够分化成为机体内所有的细胞类型,例如神经、肌肉或骨骼,然而不可避免地是其中一些干细胞不能够进行分化,最终与它们新分化的子细胞混合在一起。   由于这些剩余的多能干细胞随后可以形成非预期的细胞类型,如血液中的骨细胞,或是形成畸胎瘤,鉴别并将它们从分化的后代细胞中分离出来,对于确保干细

真菌/酵母细胞活性内质网(ER)分离试剂盒使用说明

主要用途真菌/酵母细胞活性内质网(ER)分离试剂是一种旨在通过机械或化学处理和差速离心方法,从真菌/酵母细胞中分离出完整的活性内质网细胞器组分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜培养或冻存的野生型或突变型真菌/酵母菌菌株细胞的活性内质网的制备。其制备物产量高,活

蛋白质组学在植物科学研究中的应用

1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen

基因芯片技术及其研究现状和应用前景

  摘要:基因芯片技术是90年代中期以来快速发展起来的分子生物学高新技术,是各学科交叉综合的崭新科学。其原理是采用光导原位合成或显微印刷等方法,将大量DNA探针片段有序地固化予支持物的表面,然后与已标记的生物样品中DNA分子杂交,再对杂交信号进行检测分析,就可得出该样品的遗传信息。基因芯片技术目前国

生物芯片入门(五):应用

基因芯片技术及其研究现状和应用前景生物芯片技术是随着“人类基因组计划”(human genome project,HGP)的进展而发展起来的,它是90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,它融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值,又具

基因芯片的制备、应用与前景

 摘要:基因芯片技术是90年代中期以来快速发展起来的分子生物学高新技术,是各学科交叉综合的崭新科学。其原理是采用光导原位合成或显微印刷等方法,将大量DNA探针片段有序地固化予支持物的表面,然后与已标记的生物样品中DNA分子杂交,再对杂交信号进行检测分析,就可得出该样品的遗传信息。基因芯片技术目前国内

基因芯片技术及其研究现状和应用前景

  生物芯片技术是随着"人类基因组计划"(human genome project, HGP)的进展而发展起来的,它是90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,它融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值,又具有

生物芯片应用领域

最大用途在于疾病检测基因表达水平的检测 用基因芯片进行的表达水平检测可自动、快速地检测出成千上万个基因的表达情况。谢纳(M.Schena) 等用人外周血淋巴细胞的cDNA文库构建一个代表1046个基因的cDNA微阵列,来检测体外培养的T细胞对热休克反应后不同基因表达的差异,发现有5个基因在处理后存在