酶活性以酶活单位(酶活单位为lmin氧化1 g还原性抗坏血酸的酶量)表示，即酶活单位/g鲜重。常用的测定方法是碘量法，这是一种经典的方法，所用仪器简单，准确性高；二是分光光度法，这种方法灵敏度和准确性高，重演性好，用途广，选择性好；三是氧电极分析法，该法灵敏度高，准确性好，但是氧电极对温度变化非常敏感，测定时需要维持温度恒定；四是脉冲极谱法，此种方法操作简单，重演性好，与碘量法结果相一致。
在pH值为5—7范围内抗坏血酸氧化酶表现较高活性，在pH为5时活性最强。
抗坏血酸氧化酶在温度45℃以下时出现两次活性高峰，50℃以上时出现一次高峰，温度在
50℃以下时酶活性持续时间长，达40min，而且随着温度的升高，活性高峰会提前，当温度在55℃以上的时候，酶活性持续的时间很短，在60℃时候只有20min。
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