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天津工生所D氨基酸脱氢酶改造大位阻D氨基酸合成进展

非天然的d-氨基酸除了具有天然氨基酸的大部分功能外,还具有天然氨基酸所不具备的优良性能,在药物合成(医药和农药)、食品、化妆品等方面具有广泛的用途。利用d-氨基酸脱氢酶可以以酮酸和铵盐为原料通过还原氨化一步生成d-氨基酸。然而,d-氨基酸脱氢酶很少存在于自然界中,研究最多的是一类meso-二氨基庚二酸脱氢酶(DAPDH)。DAPDH及其突变体可以不对称还原胺化2-酮酸生成对应的d-氨基酸,如d-缬氨酸、d-亮氨酸、d-苯丙氨酸等。但是,DAPDH很难作用于一些大位阻的2-酮酸,如3,3-二甲基-2-氧代丁酸、苯乙醛酸和吲哚-3-丙酮酸。 中国科学院天津工业生物技术研究所研究员朱敦明、吴洽庆带领的生物催化与绿色化工团队,在前期研究工作基础上(Applied and Environmental Microbiology 2012,Applied and Environmental Microbiology&nbs......阅读全文

D-2-羟戊二酸脱氢酶对底物特异性识别和催化的分子机制

  近期,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心研究员丁建平课题组在Cell Discovery上,在线发表了题为Structure, substrate specificity, and catalytic mechanism of human D-2-HGDH and insights into p

酶的分类和酶的命名

   一、酶的分类  国际酶学委员会(I.E.C)规定,按酶促反应的性质,可把酶分成六大类:  1.氧化还原酶类(oxidoreductases)指催化底物进行氧化还原反应的酶类。例如,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等。  2.转移酶类(transferas

妊娠期的内分泌特点

妊娠期激素可以来自母体,也可来自胎儿内分泌腺。此外,胎盘可以视为一个重要的不完全的内分泌器官,它可以利用母体及胎儿的代谢前身物质-如来自母体胆固醇,来自母体及胎儿肾上腺的脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS),以及由胎儿合成的16α-羟DHEAS及母体的大量氨基酸合成类固醇和蛋白类激素。因此母体血循环中的激

妊娠期的内分泌特点

妊娠期激素可以来自母体,也可来自胎儿内分泌腺。此外,胎盘可以视为一个重要的不完全的内分泌器官,它可以利用母体及胎儿的代谢前身物质-如来自母体胆固醇,来自母体及胎儿肾上腺的脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS),以及由胎儿合成的16α-羟DHEAS及母体的大量氨基酸合成类固醇和蛋白类激素。因此母体血循环中的激

生物氧化概述(一)

  体内大部分物质都可进行氧化反应,在生物体内进行的氧化反应与体外氧化反应有许多共同之处:它们都遵循氧化反应的一般规律,常见的氧化方式有脱电子、脱氢和加氧等类型;最终氧化分解产物是CO2和H2O,同时释放能量。但是生物氧化反应又有其特点:①体外氧化反应主要以热能形式释放能量;而生物氧化主要

上海生科院杨晟研究员到天津工生所进行学术交流

  1月24日,应中国科学院系统微生物工程重点实验室的邀请,中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心主任、上海工业生物技术研发中心主任杨晟研究员来到中国科学院天津工业生物研究所进行学术交流,并做了“应用驱动的酶工程与代谢工程”的学术报告。天津工生所副所长孙际宾到会参加学术交流并主持报告会。

盘点:幸运儿才有的8项基因突变,你有吗?

  人类进化到现在就是由无数的有益突变促成的。突变是随机的,正常情况下突变频率很低,但在如放射性辐射、致癌化学制品等不利条件刺激下,突变频率会大大提升。  有研究发现:对Y染色体的DNA序列分析透露,人类基因从上一代传递到下一代,每次会累积100到200个新的突变。这一数字是人类基因突变率的首次直接

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统

一、AP底物放大系统(sutrate ampiification system)AP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催化下脱氢,同时四唑盐(tetrazoliim)被还原成有色的甲蜡(fo

着床前小鼠胚胎线粒体功能障碍胚胎与胎盘发育的影响

实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型,直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1. 胚胎培养基用含4mg/ml BSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2,注:G1.2为对照组培养液;G2.2为试验组

亲和层析(affinity chromatography)的应用

亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。1.抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离

临床酶学遗传性变异和非遗传性变异

  在临床实验室酶学检查中,常常会遇到一些异常的检查结果,这些结果与临床症状不符或与其他检查指标相矛盾,这常常是由于酶的变异所引起,它可干扰临床医生的正确判断,引起诊断失误,耽误病情的治疗。对从事检验工作的人员来说,了解临床酶的变异理论,将有助于提高实验诊断工作的准确性,为临床医生提供更有

合成细胞培养基相关知识

合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。它有一定的配方,是一种理想的培养基。目前合成培养基多达10多余种,有的培养基仍在不断进行改良。早期组织培养是利用天然培养基,目前合成培养基已经成为一种标准化的商品,从最初的基本培养基发展到无血清培养基、无蛋白培养基,并且还

前列腺癌研究进展一览!

  【1】eLife:前列腺癌标志物PSA会激活血管和淋巴管生成因子,促进癌症转移  DOI: 10.7554/eLife.44478  一项新的研究表明,前列腺特异性抗原(PSA)是一种前列腺癌标志物,是激活血管内皮细胞和淋巴管生成生长因子的催化剂之一,而这些因子有助于癌症的扩散。赫尔辛基大学(U

关于前列腺癌最新研究成果一览

  【1】eLife:前列腺癌标志物PSA会激活血管和淋巴管生成因子,促进癌症转移  DOI: 10.7554/eLife.44478  一项新的研究表明,前列腺特异性抗原(PSA)是一种前列腺癌标志物,是激活血管内皮细胞和淋巴管生成生长因子的催化剂之一,而这些因子有助于癌症的扩散。赫尔辛基大学(U

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒...

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明主要用途YIJI细胞诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过诱导型一氧化氮合成酶、硝酸还原酶和乳酸脱氢酶反应系统,在诱导型一氧化氮合成酶特异性抑制剂存在与否的情况下,由底物L-精氨酸

细胞结构成分的离心分离技术-2

3、等密度离心法等密度离心法(isodensity centrifugation)根据Stokes公式,当颗粒密度(ρp)等于介质密度(ρM)时,离心时颗粒悬浮于介质中不移动。等密度离心法就是根据这一原理进行的。采用包括各种颗粒密度范围的梯度介质,把要分离的样品放在密度梯度液表面或者混悬于梯度液

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(十一)

3.4.5 亲和层析的应用亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白

结核杆菌的耐药机制及分子生物学检测方法进展

滕凤猛 陈昌杰(蚌埠医学院临床检验诊断中心,蚌埠 233030)  【摘要】 耐药结核病是当今全球结核病控制领域中的迫切课题,由于在结核病的治疗中忽视了治疗的管理,加之20世纪80年代以来,又受到HIV/AIDS感染流行的影响,结核菌耐药性与耐药结核病逐渐增多,甚至不少国家与地区

代谢组学 | 肿瘤治疗之靶向葡萄糖代谢

  能量代谢重编程是肿瘤的十大特征之一,其中葡萄糖代谢异常是肿瘤代谢最突出的特征。在氧气充足的情况下,肿瘤细胞依然倾向于进行糖酵解,将葡萄糖代谢为乳酸。肿瘤细胞有氧糖酵解能力是正常细胞的20 ~ 30倍,为肿瘤代谢提供 大量能量和中间产物。因此,靶向糖酵解等异常环节的代谢酶是抗肿瘤治疗的重点。一些研

急性心肌损伤生物化学标志物

1979年WHO提出急性急性心肌梗死诊断标准:①典型的持续的胸痛史,②典型的心电图改变,包括ST段抬高和Q波出现,③心肌酶学的改变。并认为以上三项中的二项以上阳性可诊断为急性心肌梗死。 一个理想的心肌损伤标志物除了高敏感性和高特异性外,还应该具有以下特性:①主要或仅存在于心肌组织,在心肌中

2019中国生命科学领域CNS盘点:曹雪涛 颜宁 施一公上榜

  截至2019年12月23日,中国学者在Cell,Nature及Science在线发表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已经全部更新),iNature团队对于这些文章做了系统的总结:  按杂志来划分:Cell 发表了31篇,Nature 发表了44篇,Scie

分析前变异对临床生化检验质量的影响

  分析前变异指在分析前阶段产生的各种变异。分析前阶段是实验医学最重要组成部份,包括从病人准备到样本收集等分析前过程。分析前阶段产生的变异直接影响采集样本的质量,即使分析仪器非常先进,而且室内和室间质控非常良好,最终仍不能得到可靠的结果。分析前变异可分成:生理性变异;样本收集和处理过程的变

与巴基斯坦科学基金会合作研究项目初审结果发布

   2016年度国家自然科学基金委员会与巴基斯坦科学基金会合作研究项目初审结果的通知  经公开征集,2016年度国家自然科学基金委员会(NSFC)与巴基斯坦科学基金会(PSF)共收到合作研究项目申请191项。根据我委相关规定,经过初步审查,并与巴方核对清单,确定有效申请为168项,现将通过初审的项

转染实验常用的报告基因(植物、动物)

报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其 它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。

人类基因组概述

  一、细胞核基因组  每条染色体含1个DNA分子,1个细胞的全部遗传信息(基因)都编码在线状的DNA分子上。由于每个体细胞中有2套染色体(2n),故所含的DNA是由两个基因组(genome)构成。每个单倍体基因组约含3.2×109bp。人类基因的平均长度为1-1.5kb,所以基因组以足以

我国学者在海洋软体动物蛋白质温度适应性研究取得进展

  在国家自然科学基金项目(项目编号:41776135、41476115)等资助下,厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室董云伟教授、斯坦福大学George N. Somero 教授等研究者合作,开展了海洋软体动物蛋白质温度适应机制的研究,揭示了软体动物细胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)结构稳定性和功能

质谱技术临床实验室应用!

  导读  质谱技术在过去的几十年得到迅猛的发展。与传统的检测方法相比,质谱技术具有高灵敏度、高特异性、高准确度、线性范围宽及高通量等优点,因而有众多临床实验室已经开始或积极准备应用相关质谱技术扩展专业范围和提升检验能力。  一、常用质谱的类型及临床应用  (一)液相色谱-质谱联用技术(liquid

王成彬:质谱技术临床实验室应用

  一、常用质谱的类型及临床应用  (一)液相色谱-质谱联用技术(liquid chromatography-mass spectroscopy,LC-MS)  LC-MS因其具有灵敏度和特异度高、检测时间短、可以实现多重检测、适用范围广的特点,可广泛应用于血液、尿液等样品中的各种代谢产物以及蛋白质