荧光定量PCR的检测是一系列从采样、保存运输、样品处理、核酸提取、扩增等一系列流程的组合,任何一个环节出现问题都会导致最终结果的错误。虽然在前面一系列的文章中讲述了提取试剂、扩增试剂的评价但是这些仍远远不够,因此我在后续的文章中会尽可能覆盖到所有的检测环节。 荧光定量PCR的检测离不开荧光定量PCR试剂和荧光定量PCR仪器。试剂的评价前面已经讲了(诊断试剂评价系列2-核酸检测方法(更正))。但是每次提到荧光定量PCR仪的评价,大家总是望而却步。一方面原因是荧光定量PCR仪涉及很多温度、光电信号需要专业的设备来评估,另一方面也确实不知道从哪里入手。今天我们梳理下在核酸检测实验室中如何通过试验来评价荧光定量PCR仪。 一、荧光定量PCR仪的物理性能试验相关指标 通过物理方法测定PCR性能的试验。主要包括测定温度和荧光来进行评价,由于需要专业的设备,建议联系计量部门或仪器厂家进行相关指标的测定。 最大升温速率: 50℃-......阅读全文
生殖健康与优生优育系列*人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 核酸测定试剂盒 (PCR-荧光探针法) 48反应/盒*人乳头瘤病毒 (6,11型) 核酸检测试剂盒 (PCR-荧光法) 20人份/盒*单纯疱疹病毒
4月15日讯 达安基因发布2020年Q1业绩预告,预计一季度净利为1.86亿元-2亿元,同比增长558%-608%。报告期内,受新型冠状病毒肺炎疫情影响,市场对新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒及核酸检测仪器、相关耗材的需求量大幅度增长,对公司业绩产生了积极影响。 中山大学达安基
定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量→绝对定量, 手工操作→自动化检测, 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大,则指
数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。该技术结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值(Ct),不受扩增效率的影响,具有很好的准确度
实时荧光定量PCR在人感染猪流感诊断中的作用彭年才12 张镇西1 兰邹然3 黄兵3 李红东2 李明2 苗保刚2 1西安交通大学生物医学分析技术与仪器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山东省动物疾病预防与控制中心200
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在许多
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸扩增的有效工具,由于其灵敏、特异、快速等优点,在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展,特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面,不仅需要检测其存在是否
实时荧光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,荧光定量)分类以及实验步骤介绍实时荧光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,荧光定量)技术(Real-time quantitative PCR),是指在(QPCR,荧光定量)反应体系中加入荧光基因,
数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽
分析测试百科网讯,根据《新型冠状病毒肺炎防控方案(第五版)》,作为新型冠状病毒肺炎诊断的“金标准”,除湖北地区在核酸检测基础上增加CT检测外,全国其它地区以及全球各地区,目前都以核酸检测阳性为确诊依据。核酸检测除了100多家试剂盒企业推出产品,主要比拼产能、灵敏度、获得医疗器械注册证的速度外,所
荧光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,更要详细研究各种极富诱惑力的宣传
光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资
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一.原理应用定量PCR技术,用一种标准作对照能够估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量。参照物:在定量 PCR 中必须加入参照物,用来作为扩增系统的阳性对照,并作为未知样本定量的标准,且通过竞争性作用校正扩增系统内管间的扩增效率,使其具有可比性。参照物按其性质不同可分为内参照和外参照。内参照
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PCR概念PCR,中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域:1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生
实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光集团,利用荧光信号来实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板浓度进行定量分析。 病原学检测是动物疾病确诊的关键点,而聚合酶链式反应(PCR)是目前病原检测的最常用的分子生物学技术,具有高敏感性的特征。PCR技术发展已日趋完
实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR,如果用于RNA检测,这被称为逆转录实时PCR即Real-time RT-PCR)是实时PCR法,它是指对DNA或经过反转入(RT-PCR
摘要:检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。 1.食品安全离不开检测技术 检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。
刘向国 谢国明 (重庆医科大 重庆市 400016)摘 要 荧光定量PCR仪技术是一种新的核酸定量技术,该技木在PCR仪反应系统中引人了荧光标记探针,具有可实时监测,高灵敏性,高特异性和高精确性的特点,极大地克服了原有PCR仪技术的不足,扩大了PCR仪的应用范围。关键词 定量pcr;荧光;基因Flu
2019新型冠状病毒,即“2019-nCoV”,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,其中SARS-CoV、MERS-CoV和2019-nCoV均属于β属冠状病毒。 截止最新的确诊病例信息显示,新型冠状病毒的传播能力比SARS更强,导致疫情传播速度较快,给疾病防控
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸扩增的有效工具,由于其灵敏、特异、快速等优点,在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展,特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面,不仅需要检测其存在
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具[1]。随着分子生物学技术研究的不断进展,定量PCR技术取得了突飞猛进的发展,不仅建立了一系
PCR技术的诞生 1985年,美国科学家Kary Mullis发明了具有划时代意义的PCR技术他因此在1993年获得诺贝尔奖 PCR是什么? PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强
1992年,Sano等人将免疫测定技术与PCR结合,创建了一种全新的极其敏感的抗原分子检测技术,即免疫-PCR(Immuno-PCR),随着这种技术的不断发展,2000年,Sim等使用荧光定量PCR代替普通PCR,发展了免疫定量PCR技术(real-timeimmuno-PCR)。该技术把抗原抗体反