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定量PCR

定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量→绝对定量, 手工操作→自动化检测, 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大,则指数扩增过程越短 当扩增速率趋于稳定后,则无论原来样品中起始模板含量多少,扩增片段的含量通常是一样的。 理想的扩增结果:Y=A×2n Y为扩增产物量 A代表PCR反应体中的原始模板数 n为扩增次数 理论上PCR扩增效率应为100%,PCR产物随着循环的进行成指数形成增长 实际上:DNA的每一次复制都不完全,即每一次扩增中,模板不是呈2倍增长。 Y= A(1+R)n R 代表扩增效率: R = 参与复制的模板/总模板 R在整个PCR扩增过程中不是固定不变的。 A 在 1~105拷贝,循环次数n≤20次:R 相对稳定,原始模板以相对固定的指......阅读全文

影响早稻产量施肥定氮量的因素分析

  氮是保证早稻产量的主要营养元素,因产定氮是早稻配方施肥灼主要技术环节之一,但氮素在早稻生长发育的吸收过程中,受到的干涉因素也最多,因此,早稻的因产定氮所制定氮化肥总量相对的准确程度,对产量往往起着决定性的影响。当指标产量确定以后,氮化肥施用总量的多少实际上取决于定氮系数(即每斤早稻谷的吸氮量),

常见实验用溶液的配制方法

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium

实验常用试剂的几种制备与储藏方法

一.常用贮液与溶液    1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。    1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为1

Western Blot的过程与优化,着重于化学发光检测

实验步骤 一、蛋白质印迹法 蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

常见实验用溶液的配制方法(二)

  Tris缓冲液(Tris-HCl buffer)   将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积(ml)

验证:ZDDN-II定氮仪快速测饲料蛋白质含量的试验

  饲料中的含氮物总称为粗蛋白质,它包括纯蛋白质和氨化物,饲料中的蛋白质进入家禽体内后,以氨基酸形式被吸收利用,用以保证畜禽体内蛋白质代谢的需要。根据畜禽不同的生理状态和生产能力搭配日粮中合理的蛋白质水平,对于保证畜禽健康生长。提高畜禽生产能力是十分必要的。已颁布的饲料工业国标中对于不同畜禽在不同生

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

   一、常用培养基   1、LB培养基   将下列组分溶解在0.9L水中:   蛋白胨10g   酵母提取物5g   氯化钠10g   如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。   2

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

   一、常用培养基   1、LB培养基   将下列组分溶解在0.9L水中:   蛋白胨10g   酵母提取物5g   氯化钠10g   如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。   2

实验常用试剂的制备与储藏(四)

三.常用培养基  LB培养基  将下列组分溶解在0.9L水中:    如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。  SOB培养基&nb

Western Blot的过程与优化,着重于化学发光检测

实验步骤一、蛋白质印迹法蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯 (PVDP) 膜上的蛋白质样本进行非直接的检测。在常规的蛋白质印迹中,蛋白

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验(一)

一、引言蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T M ) 在 细 胞 生 物 调 节 中 发 挥 着 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻译 后 蛋 白 质 的 酶 促 共 价 化 学 修 饰 。蛋 白 质 化 学 修 饰 非 常 重 要 ,因 为 它 们 会 潜 在 地

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

蛋白质翻译后修饰 (PTM) 在细胞生物调节中发挥着基本作用。PTM 是 mRNA 翻译后蛋白质的酶促共价化学修饰。蛋白质化学修饰非常重要,因为它们会潜在地改变蛋白质的物理或化学性质、组成、活性、细胞定位或稳定性。实际上,在氨基酸或蛋白质的 N 端或 C 端加入或移除化学基团会导致大部分蛋白质发生变

Western Blot的过程与优化,着重于化学发光检测(二)

2.3 半定量蛋白质印迹法通 常 认 为 蛋 白 质 印 迹 法 是 定 性 的 ,但 当 加 入 特 定 对 照 时 ,它 也 可 成 为 一 种 定 量 方 法 。当 E L I S A 无 法 用 于 某 种 样 本 ,或 是 当 生 物 样 本 中 的 某 种 组 分 会 干 扰 E

微机继电保护测试仪多方面功能保护

摘要:微机继电保护测试仪试验模拟故障时,电流电压必须同时变化;试验正方向故障时,必须注意约束DZ动作的全阻抗继电器在故障时应能处在动作状态。1、微机继电保护测试仪纵联变化量方向保护(RCS-901)将收发信机整定在“负载”位置,或将微机继电保护测试仪装置的发信输出接至收信输入构成自发自收。仅投主保护

原子荧光测试项目配置浓度梯度

原子荧光测试项目配置浓度梯度 汞 Hg (标贮液1mg/ml标准液0.01ug/ml)还原剂配制0.5% 氢氧化钾(稳定剂)+2%硼氢化钾(先称取KOH放入水中,待溶解后加入称好的KBH4)。注:先后顺序不能颠倒)    载流液配制  &n

常见实验用溶液的配制方法(一)

  一.常用贮液与溶液   1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。   1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。

实验常用试剂的制备与储藏(一)

一.常用贮液与溶液  1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。  1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammo

紫外分光光度法测定复方硫磺乳膏的含量

复方硫磺乳膏为医院皮肤科常用制剂,主要用于治疗痤疮、疥疮、酒渣鼻等症。处方为:升华硫lOOg,樟脑l0g,薄荷脑l0g,基质加至1000g(常州市医院制剂规程1986:160)。该制剂质量控制以往仅作鉴别试验,为提高检测标准,现拟测其含量。而文献方法测定软膏制剂中硫的含量,操作较繁琐、费时。本实验采

紫外分光光度法测定复方硫磺乳膏的含量

复方硫磺乳膏为医院皮肤科常用制剂,主要用于治疗痤疮、疥疮、酒渣鼻等症。处方为:升华硫lOOg,樟脑l0g,薄荷脑l0g,基质加至1000g(常州市医院制剂规程1986:160)。该制剂质量控制以往仅作鉴别试验,为提高检测标准,现拟测其含量。而文献方法测定软膏制剂中硫的含量,操作较繁琐、费时。本实验采

常用贮液与溶液(一)

1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1

凯氏定氮仪的原理适用范围及应用

凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法,故被称为凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。中文名:凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪;英文名:Kjeldahl Nitrogen Analyze

生物化学实验常用试剂的配制方法

  1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。   2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离

原子吸收光谱仪实验室200问答

  八十一、我使用的仪器是美析的AA-1800配置标准溶0.5ug/ml,1.0,1.5,2.0,ph值在1-1.7之间,用的硝酸,一次蒸馏水,可是吸收度总是上不去,相邻的吸收度才0.015左右,数据间隔太小了,使用的普线是2138,狭缝为0.4,请问怎样调整才能提高吸

实验室溶液配制方法与技巧

  液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术,也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作,还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质,掌握了溶液配制的技巧,可以大大缩短配置时间,提高实验效率。   我们都知道,溶

浅析调节参数对调节过程的影响

  笔者在多年的工作中发现,一些工作人员对一些异常情况下的调节系统,不易投入自动。究其原因,是对调节参数在调节过程中的影响,不大明白。笔者也翻阅了大量有关书籍,发现大多数不太实用。看了之后看似懂了,遇到实际问题分析起来还是困难。根据以往的经验,笔者总结了一些规律,现总结出来,供各位专家指正。   

分子克隆-蛋白表达实验指南(十六)

Amp(50mg/ml)        溶解1g Amp于足量的水中,最后定容至20ml。分装成小份于-20℃贮存。常以20~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基,1:1000比例稀释   &nbs