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移植NEP基因转染的神经干细胞对AD大鼠行为学的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer disease ,AD)病理过程的关键问题是患者脑中p一淀粉样多肽的异常增加和沉积。中性内肤酶( NEP)是脑内最重要的A p降解酶,是影响脑内Ap分解代谢速率的限制因素。神经干细胞(neural stem cell , NSC)是具有向多种细胞系分化又具有自我更新能力的细胞。NSC、治疗AD是运用其特性修复和替代受损的神经细胞,另外,NSCs是非常理想的基因载体,拥有许多其他载体所没有的优点。本实验将NEP基因转染的神经干细胞移植到AD大鼠侧脑室,观察行为学的变化,为阿尔茨海默病的治疗提供新的依据。1材料和方法1. 1实验动物清洁SD大鼠由佳木斯大学动物实验中心提供。1.2主要试剂胎牛血清、Ap1一40、神经干细胞基础培养基、神经干细胞完全培养基、神经小球分散试剂盒等均购于美国Sigma公司。1.3方法1.3.1动物模型的建立选左侧海马CAI区为注射区:根据Pellegrino和Cus......阅读全文

移植NEP基因转染的神经干细胞对AD大鼠行为学的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer disease ,AD)病理过程的关键问题是患者脑中p一淀粉样多肽的异常增加和沉积。中性内肤酶( NEP)是脑内最重要的A p降解酶,是影响脑内Ap分解代谢速率的限制因素。神经干细胞(neural stem cell , NSC)是具有向多种细胞系分化又具有

基因转染技术的转染方法介绍

  1、转染  转染指通过生化或者物理方法将目的基因导入真核细胞中 。  2、感染  感染指通过病毒介导,用基因组中携带有克隆目的片断的病毒来感染靶细胞。

基因转染技术的病毒方法转染介绍

  病毒作为基因转染是基因递送良好的工具,病毒载体的优点有:  (1)在转化的细胞中传播重组的DNA分子作为稳定的遗传成分;  (2)可能将有缺陷的或突变的基因置于病毒调节信号的控制下以进行研究;  (3)能将克隆的基因作为病毒微染色体的一部分 ,并能进行分离;  (4)转移效率较高。其主要缺点是病

基因转染技术的转染与分析介绍

  具体的基因转染条件应参考所使用的试剂和方法进行优化。靶基因被导入细胞后,一般在转染后48小时,靶基因即在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。如若建立稳定的细胞系,则可对靶细胞进行筛选,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物,最常用的真核表达基因载体

基因转染技术介绍

用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法,基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内,并在细胞内表达。转染方法有多种,根据不同的细胞,贴壁或悬浮细所可选用不同的方法,其目的是要达到设置转染效率,影响转染产率的因素有多种,包括转染方法、操作技术、质粒DNA的纯度

基因枪活体植物基因转染

本实验所用基因传递系统(基因枪)原理:低压基因递送系统(GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1),根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计,是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示,当左侧出现输入气体压力时(如:氦气),两个腔室之间将形成巨

简述基因转染技术的应用

  1 、用于建造疾病的动物模型和药物筛选模型  2 、用于基因治疗  3 、用于异种器官移植  4 、用于改良动植物品种和生产性能  5 、用于生产药用蛋白和保健蛋白  6 、用于生产人抗体

关于基因转染技术的简介

  基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中,这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究,也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展,并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。

基因转染和实验设计原则

磷酸钙-DNA共沉淀法核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项

癌基因转化细胞:基因组DNA转染法

实验概要 癌基因转化细胞实验步骤1.提取基因DNA(含癌基因)。2.DNA准备:取供体DNA50~100微克,加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀。3.再加2倍体积无水乙醇,3000转/分离心10分钟,去上清。4.加入转染缓冲液,待DNA充分融解后,再加入2.5M CaCl2,令最终浓度