血红蛋白电泳(hemoglobinelectrophoresis)

实验原理血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,经过一定时间的电泳,不同的血红蛋白所带电荷不同,分子量不同,其泳动方向和速度不同,可分离出各自的区带,同时对电泳出的各区带进行比色或电泳扫描,可进行各种血红蛋白的定量分析。一般最常用的是pH8.6醋酸纤维薄膜电泳。胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodic acid)氧化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff )试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过碘酸-雪夫(PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。实验方......阅读全文

血红蛋白电泳(hemoglobin-electrophoresis)

实验原理血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,

血红蛋白电泳(hemoglobin-electrophoresis)

实验原理血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,

血红蛋白电泳(hemoglobin-electrophoresis)

实验原理血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,

血红蛋白电泳(hemoglobin-electrophoresis)(HbA2定量)

实验原理血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,

血红蛋白电泳正常参考值及临床意义

中文名称:血红蛋白电泳 英文名称:Hemoglobin Electrophoresis 正常参考值:未见异常血红蛋白带 临床意义: 异常血红蛋白病。

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查

[实验目的]1. 学习血红蛋白电泳分离方法;2. 能辨认正常人和异常血红蛋白的电泳图谱;[实验原理]血红蛋白是一种结合蛋白质,由血红素和珠蛋白组成。正常人所含珠蛋白的多肽链有a、b、d 、e、g和z六种。这六种肽链的基因在人体发育的不同阶段表达状况不一。正常成人红细胞中有三种血红蛋白即HbA、  H

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查

实验概要血红蛋白是一种结合蛋白质,由血红素和珠蛋白组成。正常人所含珠蛋白的多肽链有a、b、d  、e、g和z六种。这六种肽链的基因在人体发育的不同阶段表达状况不一。正常成人红细胞中有三种血红蛋白即HbA、  HbA2 和  HbF。HbA(a2b2)是正常成人红细胞中的最主要的血红蛋白,占红细胞内血

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查

1. 学习血红蛋白电泳分离方法;2. 能辨认正常人和异常血红蛋白的电泳图谱; [实验原理] 血红蛋白是一种结合蛋白质,由血红素和珠蛋白组成。正常人所含珠蛋白的多肽链有a、b、d 、e、g和z六种。这六种肽链的基因在人体发育的不同阶段表达状况不一。正常成人红细胞中有三种血红蛋白即HbA、

血红蛋白(Hemoglobin;Hb)凝胶柱层析

一、实验目的1.了解凝胶柱层析的原理及应用;2.掌握凝胶柱层析的基本操作技术,为进一步掌握离子交换柱层析、亲和层析及吸附层析等其它分离方法打下良好的基础。二、实验原理凝胶层析:原理与应用凝胶层析又称凝凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓

医学“侦查兵”的秘密(53)

近年来,检验医学发展迅速。为了方便体外诊断产业界的同仁们了解和掌握日常检验的中英文名称、正常值参考范围和简要临床意义,我会将每天编辑推送3条相关讯息,以飨读者。 1、血红蛋白电泳 中文名称:血红蛋白电泳 英文名称:Hemoglobin Electrophoresis 正常参考值

Native-gel-electrophoresis(非变性电泳)

Native gel electrophoresis Under native PAGE conditions, polypeptides retain their higher-order structure and often retain enzymatic activity and inte

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的实验目的

[实验目的]1. 学习血红蛋白电泳分离方法;2. 能辨认正常人和异常血红蛋白的电泳图谱;   

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的实验原理

血红蛋白是一种结合蛋白质,由血红素和珠蛋白组成。正常人所含珠蛋白的多肽链有a、b、d 、e、g和z六种。这六种肽链的基因在人体发育的不同阶段表达状况不一。正常成人红细胞中有三种血红蛋白即HbA、  HbA2 和 HbF。HbA(a2b2)是正常成人红细胞中的最主要的血红蛋白,占红细胞内血红蛋白总量的

DNA的凝胶电泳(gel-electrophoresis)

一、原理琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸;琼脂糖凝胶孔径较大,被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中,DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(EB)染色,在紫外光下至少可

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的注意事项

1. 醋酸纤维素膜一定要浸透(无白色斑点),加样前从浸膜液中取出,既要吸去多余的液体还不能使膜太干,否则都会影响电泳结果。2. 加样时注意要加在醋酸纤维素的膜面,电泳时也要膜面向下放到电泳槽中的缓冲液纱布上。

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查所需器材与试剂

1.  器材、电泳仪、电泳槽、醋酸纤维素薄膜2.  试剂(1) 浸泡醋酸纤维膜TBE缓冲夜(pH8.5);(2) 电泳槽硼酸缓冲液(pH8.6;(3)丽春红染色液;(4)漂洗液。

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的步骤与方法

1. 浸膜:将醋酸纤维素薄膜膜面向下放入浸膜液中,浸透后用眼科镊子压入液面底部。2. 采血:碘伏消毒耳垂部,用一次性采血针采血,并将血液吸在两次对折的滤纸尖部。3. 加样:将浸泡好的醋酸纤维素薄膜膜面向上放在滤纸上,用滤纸吸去多余的液体,在距一侧1.5cm处用沾血的滤纸涂圆点状(直径约0.2cm)或

沉淀反应实验:火箭电泳(rocket-electrophoresis)实验

火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为:在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。1、材料(1)诊断血清(抗体):抗人IgG或IgA免疫血清(2)待检血清(抗原):

DNA凝胶电泳(DNA-agarose-gel-electrophoresis)

实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分

血红蛋白电泳

等电点差异法             实验方法原理 据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极

血红蛋白电泳

 [项目名称]血红蛋白电泳    珠蛋白生成障碍性贫血是世界上最常见和发病率最高的一种单基因遗传病,常见有两类,即α和β海洋性贫血(以往称地中海贫血),是由于基因突变引起存在于红细胞内的几种血红蛋白(Hb)合成异常。此项化验可用于检验异常Hb,进一步诊断一些相关疾病。    [参考值]    HbA

血红蛋白电泳检查(电泳法)

1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面

血红蛋白电泳检查(电泳法)

1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面

凝胶电泳(gel-electrophoresis)的注意事项

影响电泳分离的主要因素:待分离生物大分子的性质:待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说,子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。2. 缓冲液的性质:缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离

凝胶电泳(gel-electrophoresis)操作注意事项

1.缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。2.琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移

DNA酶切及凝胶电泳(gel-electrophoresis)

材料、设备及试剂  一、 材料  λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组T-vector质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agarose): 进口或国产的电泳用琼脂糖均可。  二、 设备  水平式电泳装置,电泳仪,台式高

沉淀反应实验:免疫电泳(immune-electrophoresis)实验

免疫电泳实验免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离,然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散,在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物,故可用抗原成分分析;且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。1、材料(1)待检标本(抗原):正常人

凝胶电泳(gel-electrophoresis)常见问题分析

琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解: DNA带模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓

异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的方法和注意事项

1. 浸膜:将醋酸纤维素薄膜膜面向下放入浸膜液中,浸透后用眼科镊子压入液面底部。2. 采血:碘伏消毒耳垂部,用一次性采血针采血,并将血液吸在两次对折的滤纸尖部。3. 加样:将浸泡好的醋酸纤维素薄膜膜面向上放在滤纸上,用滤纸吸去多余的液体,在距一侧1.5cm处用沾血的滤纸涂圆点状(直径约0.2cm)或

Hemoglobins-Chaperone

The function of hemoglobin in oxygen transport by red blood cells requires precise assembly of a tetramer of two beta-subunits and two alpha-units. If