DNA的凝胶电泳（gelelectrophoresis）
一、原理琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸；琼脂糖凝胶孔径较大，被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶（EB）染色，在紫外光下至少可以检测出1~10ng的DNA条带，从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。二、实验试剂硼酸 Tris碱EDTAEB琼脂糖溴芬兰等三、实验步骤(1)稀释缓冲液的制备用5XTBE配置成0.5×TBE稀释缓冲液,待用。(2 ) 胶液的制备称取0.4g琼脂糖，置于200ml锥形瓶中，加入50ml 0.5×TBE(3) 稀释缓冲液，放入微波炉（或电炉）上加热至琼脂糖全部熔化，取出摇匀，此为0.8%琼脂糖凝胶液。(4) 胶板的制备将有机玻璃胶槽两端分别用橡皮膏紧密封住。将封好的胶槽置于水平支持物上，插上样品梳子。向冷却至50～60℃的琼脂糖胶液中加......阅读全文
DNA的凝胶电泳（gel－electrophoresis）
一、原理琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸；琼脂糖凝胶孔径较大，被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶（EB）染色，在紫外光下至少可
DNA凝胶电泳（DNA－agarose－gel－electrophoresis）
实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分
Gel－Electrophoresis－of－DNA
What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab
DNA酶切及凝胶电泳（gel－electrophoresis）
材料、设备及试剂 一、 材料 λDNA: 购买或自行提取纯化; 重组T-vector质料或pUC19质粒; EcoRI酶及其酶切缓冲液: 购买成品; HindⅢ酶及其酶切缓冲液: 购买成品;琼脂糖(Agarose): 进口或国产的电泳用琼脂糖均可。 二、 设备 水平式电泳装置,电泳仪,台式高
Agarose－Gel－Electrophoresis－of－DNA
1) Dissolve 1 g of agarose in 100 ml of 1X TAE or TBE buffer (gives a 1% gel). See note for making LMP agarose gel. 2) Cast the gel with the comb in p
DNA酶切及凝胶电泳（gel－electrophoresis）2
三、试剂 1、5×TBE电泳缓冲液：配方见第一章。 2、6×电泳载样缓冲液：0.25% 溴粉蓝，40%(w/v) 蔗糖水溶液，贮存于 4℃。 3、溴化乙锭(EB)溶液母液:将EB配制成10mg/ml，用铝箔或黑纸包裹容器，储于 室温即可。 第三节 操作步骤 一、
DNA酶切及凝胶电泳（gel－electrophoresis）1
第一节 概 述 一. DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上，并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位
DNA琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）分析
一、原理琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中，DNA分子由于带负电荷，所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同，在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后，紫外检测仪下观察，即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在一定条件下，DNA的迁移
琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）检测DNA
原理： 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，可作为电泳支持物，适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离，与标准DNA片段进行对照，就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中，由于各种因素的影响，使质粒DNA呈现超螺旋的共
DNA片段的琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）
【原 理】琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术，可用于分离，鉴定和纯化DNA片段。不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在相同的电泳条件下（如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等），有不同的迁移率，所以可通过电泳使其分离。凝胶中的DNA可与荧光染料溴化乙锭（EB）结合，在紫外灯下可看到荧光条带，籍
质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
凝胶电泳（gel－electrophoresis）的注意事项
影响电泳分离的主要因素：待分离生物大分子的性质：待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说，子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快。2. 缓冲液的性质：缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度，从而对其带电性质产生影响，溶液pH值距离
QUALITATIVE－ANALYSIS－OF－DNA－FRAGMENTATION－BY－AGAROSE－GEL－ELECTROPHORESIS
1. IntroductionNuclear morphology changes characteristic of apoptosis appear within the cell together with a distinctive biochemical event: the endonu
凝胶电泳(gel－electrophoresis)操作注意事项
1.缓冲系统：在没有离子存在时，电导率最小，DNA不迁移，或迁移极慢，在高离子强度的缓冲液中，电导很高并产热，可能导致DNA变性，因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时，常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。2.琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移
凝胶电泳（gel－electrophoresis）常见问题分析
琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解： DNA带模糊：1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
Agarose－gel－electrophoresis
General ProcedureCast a gelPlace it in gel box in running bufferLoad samplesRun the gelImage the gelCasting Gels0.7% agarose gel with 1kbp ladder in U
Agarose－Gel－Electrophoresis
实验概要Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis.实验原理 Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for sep
RNA－gel－electrophoresis
实验概要RNA gel electrophoresis主要试剂DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）介绍
主要试剂：核酸电泳缓冲液有三种，即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高，DNA分离效果好，但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高，容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低，但价格较便宜，因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
QUALITATIVE－ANALYSIS－OF－DNA－FRAGMENTATION－BY－AGAROSE－GEL－ELECTROPHORESIS2
3. Commentary 3.1. Background information Apoptosis is an innate mechanism of eukariotic cell suicide which plays a major role in many physiol
双向琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）实验
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术，并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题。【实验原理】DNA 分子有线状的，还有一些非线状的，如复制叉和重组DNA 结构。双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的。双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类：中性/中性
Polyacrylamide－Gel－Electrophoresis－of－Oligonucleotides
1. Pour and polymerize a 20% polyacrylamide gel, no Urea. 2. Remove clamps. Rinse with water. Remove comb. Rinse top of gel well. 3. Insert comb te
Blue－Native－Gel－Electrophoresis
Blue Native Gel ElectrophoresisStock solutions49.5%T, 3%C Acrylamide 24 g acrylamide, 0.75 g bisacrylamide / 50 ml H2O Store at RT3 x Gel buffer 150 m
Alkaline－agarose－gel－electrophoresis
Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al., 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second st
InGel－Digestion－of－Proteins－Separated－byPolyacrylamide－Gel－Electrophoresis
1. Excision of protein bands (spots) from polyacrylamide gelsRinse the gloves you use with water to avoid traces of dust in your sample.Rinse the gel
SDS－Gel－Electrophoresis－of－Tubulin\MAPs
MaterialsStock Acrylamide: (30%T:0.8%C)30% by weight of acrylamide0.8% by weight of N,N'-bis-methylene acrylamideSeparation Gel (Final Concentrati
High－Resolution－Agarose－Gel－Electrophoresis
实验概要Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for separating nucleic acid fragments due to its ease of use, non-toxicity, a
Denaturing－Gradient－Gel－Electrophoresis－(DGGE)
Purpose:Denaturing gradient gels are used to detect non-RFLP polymorphisms. The small (200-700 bp) genomic restriction fragments are run on a low to h
Denaturing－Agarose－Gel－Electrophoresis－of－RNA
The overall quality of an RNA preparation may be assessed by electrophoresis on a denaturing agarose gel; this will also give some information about R