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半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测

实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片纤光照明的解剖显微镜显微照相仪实验步骤1)在冰冷的PBS里解剖胚胎或组织。置β-半乳糖苷酶固定剂，室温至合适的时间。以下是固定小鼠胚胎和组织的指导：外植体和E 6.5到E 7.5胚胎5〜10 min； E 8到E 9.5胚胎或尾巴切面 15〜30 min； E 10 到 E 12.5 胚胎 30 min〜1.5 h; E 13 到 E 14.5 胚胎 2 h; E 15.5 或更大的组织则需要解剖出来或切一半，然后固定2 h。新生幼鼠或更大的小鼠的灌注需要在解剖特定组织染色之前进行。2) 用β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液室温洗涤3次，每次15 min (针对小......阅读全文