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等电聚焦

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用的影响,随着时间和所走的距离加长,区带越走越宽,而电聚焦能抵消扩散作用,使区带越走越窄;由于这种电聚焦作用,不管样品加在什么部位,都可聚焦到其电点,很稀的样品也可进行分离;可直接测出蛋白质的等电点,其精确度可达0.01pH单位。电聚焦技术的缺点是:一是电聚焦要求用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀,二 是样品中的成分必需停留于其等电点,不适用在等电点不溶或发生变性的蛋白质。 电聚焦技术要求有稳定的pH梯度,要求极防止对流和防止已分离区带再混合的措施,其办法有三:密度梯度,聚丙烯酰胺凝胶和区带对流聚焦,以第一种方法为......阅读全文

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点

一、目的:学习聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的原理及方法。二、原理:等电点聚焦(isoelectric focusing, IEF)或简称电聚焦(electrofocusing),也曾称等电点分离聚焦电泳等。它是60年代中期出现的技术,克服了一般电泳易扩散的缺点。近年来,等电点聚

膜蛋白的纯化实验(二)

三、膜蛋白的纯化一 旦 使 用 了 合 适 的 去 污 剂 将 膜 蛋 白 从 细 胞 膜 中 増 溶 出 来 ,就 可 以 分 离 目 标 蛋 白 质 了 。传 统 色 谱 层 析 技 术 ,如 凝 胶 过 滤 、亲 和 、离 子 交 换 和 层 析 聚 焦 (chromatofocusi

膜蛋白的纯化实验

实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能

膜蛋白的纯化实验

实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

蛋白质浓缩和溶质的去除实验             实验步骤 一、层

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法,包括冻干、反向萃取、溶质析出,precipitation、透析(溶剂交换) 、超滤和层析技术。值得注意的是,在众多微和设备发展的支持下,小型化和高通量的蛋白质分析取得了极大

神经内分泌肽能系统干扰中的蛋白质组学分析实验

环境污染物可以影响许多胞内酶活性。酶抑制因子对蛋白质组的影响可以利用双向电泳来确定。在神经内分泌细胞中,前体蛋白转化酶 1 和 2 (proprotein convertase 1 和2, P C l 和 PC2 ) 介导许多蛋白质前体水解为肽激素和神经肽。这些钙离子依赖的蛋白酶的活性可以被环境中的

分泌肽能系统干扰中的蛋白质组学分析实验

实验步骤 一、材料 1 细胞培养和裂解 (1)小鼠脑垂体 AtT20 和 AtT20 (proSAAS) 细胞系。 AtT20 .(proSAAS) 细胞系通过用包含一个新霉素抗性基因的 proSAAS 表达载体转染 A

以AtT20脑垂体细胞作为模型进行神经内 分泌肽能...(二)

4 免疫印迹(1) 硝酸纤维素膜(Bio-Rad)。(2)Towbin 缓冲液: 25 mmol/L Tris, 192 mmol/L 甘氨酸, 0.1% SDS, 2 0 % (V/V) 甲醇。(3)IX T ris 缓 冲 盐 溶 液(1XTBS): 10 mmol/L Tris-. HCl,

拉曼光谱技术综述

   【摘要】本文从拉曼散射原理出发,介绍了拉曼技术的特征,以及拉曼技术的优势和不足,从激光技术和纳米技术出发介绍了当前拉曼技术的广泛发展和应用。综述了近年来了曼技术的主要的分析技术。涉及拉曼光谱技术的发展简史,发展现状和最新研究进展等方面。  1、拉曼光谱的发展简史  印度物理学家拉曼于1928年

激光拉曼光谱仪简介 (2008/5/13)

激光拉曼光谱法是以拉曼散射疚为理论基础的一种光谱分析方法。    激光拉曼光谱法的原理是拉曼散射效应。拉曼散射:当激发光的光子与作为散射中心的分子相互作用时,大部分光子只是发生改变方向的散射,而光的频率并没有改变,大约有占总散射光的10-10-10-6的散射,不公改变了传播方向,也改变了频

食品中沙门氏菌检测方法的研究进展

0引言自19世纪后期,沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来,检测方法学都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间,用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。但由于沙门氏菌在污染食品中含量较低以及食品对检测的干扰给沙门氏菌的检测带来了一定的困难

电子浆料的粘度计选型及测试方法

电子浆料是制造厚膜元件的基础材料,是一种由固体粉末和有机溶剂经过三辊轧制混合均匀的膏状物(可联想成牙膏、油漆等样子)。电子浆料可分为导电浆料、电阻浆料、厚膜浆料、介质浆料及焊接浆料等,是片式电阻、电容、电位器、电感;电阻网络,多种瓷介电容,钽电容、碳膜电位器,玻璃釉电位器,高聚焦电位器,厚膜电路,混

十项目入选国家重大科技基础设施建设十三五规划

  分析测试百科网讯 近日,国家发展改革委等多部委办联合发布“关于印发国家重大科技基础设施建设‘十三五’规划的通知”(以下简称“通知”),提出重点任务:面向世界科技前沿、面向经济主战场、面向国家重大需求,以能源、生命、地球系统与环境、材料、粒子物理和核物理、空间和天文、工程技术等7个科学领域为重点,

环保类上市公司晒出“期中考试成绩单”

  在黑臭水体治理、河道修复、海绵城市等这一类体量巨大、纷繁复杂的系统工程面前,传统的环保企业并不占据特别明显的优势,都一样需要在实践中探索商业模式创新、质量风险管控和技术方案集成。而融资和政府协调能力强大就成了决胜要素,这是大多数环保企业必须正视的现实。  大部分环保上市公司在近期陆续发布中报。尽

化工废水处理技术 你要了解的都在这里

  化工废水是指化工厂生产产品过程中所生产的废水,如生产乙烯、聚乙烯、橡胶、聚酯、甲醇、乙二醇、油品罐区、空分空压站等装置的含油废水,经过生化处理后,一般可达到国家二级排放标准,现由于水资源的短缺,需将达到排放标准的水再经过进一步深度处理后,达到工业补水的要求并回用。图片来源于网络  化工厂作为用水

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

奖励办有关负责人解读2018年度国家科学技术奖五大特点

  2018年度国家科学技术奖今天上午在京揭晓。国家科学技术奖励工作办公室有关负责人在此前接受记者采访时表示,2018年科学技术奖获奖项目成果涉及基础科学与产业技术的个各方面,覆盖国民经济赫社会发展的主要领域,获奖项目呈现出五大特点。图片来源于网络  一、基础研究成果不断涌现,国际影响力进一步提升 

食品的褐变作用

  1 褐变  褐变指食品在加工、贮藏过程中颜色发生变化而趋向加深的现象。根据褐变的原因,可分为非酶褐变和酶促褐变。  2 非酶褐变:  ① Maillard 反应  Maillard 反应又称为羰氨反应,指食品体系中含有氨基的化合物与含有羰基的化合物之间发生反映而使食品颜色加深的反应。羰氨反应的过

APD,PMT和CCD的介绍

在原来C系列多功能成像系统的基础上,我们推出了Azure Sapphire双模式多光谱激光成像系统。采用每个通道用专属的检测器,PMT用于蓝光和磷屏扫描成像,3个独立的APD检测器分别用于绿光、红光和近红外荧光扫描检测,同时具有CCD检测器用于超高灵敏化学发光的检测。为什么sapphire每个通

APD,PMT和CCD的介绍

  Azure Biosystems 公司是一家创新型服务于生命科学领域的的公司,成像产品体现了创新、高技术和颠覆性的精神。在原来C系列多功能成像系统的基础上,我们推出了Azure Sapphire双模式多光谱激光成像系统。采用每个通道用专属的检测器,PMT用于蓝光和磷屏扫描成像,3个独立的APD检

2017太赫兹科技发展回顾与展望

随着2018年的即将到来,2017已离我们越来越远。回顾发展历程,总结经验启示,瞻望美好未来,谋划创新思路,是对来年的提前布局、未雨绸缪,也是对来年太赫兹科技带给我们更多惊喜和突破、迎来更为广阔发展前景的期待。回首2017,太赫兹科学研究取得了哪些重要进展?太赫兹产业应用取得了哪些重要突破?展望20

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

常见发光免疫分析技术的比较

免疫学技术的迅速发展对精度的要求越来越高,一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要。现今发展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害),而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定,最终趋向于能够检测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定

2012年度高校科研优秀成果奖公布

  根据《高等学校科学研究优秀成果奖(科学技术)奖励办法》的规定,教育部组织开展了2012年度高等学校科学研究优秀成果奖(科学技术)评审工作。   经评审,决定授予“软界面电分析化学的若干问题研究”等36项成果高等学校自然科学奖一等奖,授予“稀土生物效应的细胞无机化学研究”等6

环保攻坚集体采访全纪录:多例环保真相首次揭露

   10月23日19:00,十九大新闻中心举办第八场集体采访,邀请福建省环保厅党组书记,厅长朱华、河北省环保厅党组书记、厅长高建民,辽宁省环境科学研究院院长张丽华,江苏省环境监测中心副主任胡冠九,湖南省张家界市环保局环境监测中心站分析室主任黄斌接受采访。   5位环保领域的十九大代表,围绕“打好生

低碳减排的“胜利模式”

  最新数据显示,中国石化胜利油田已投产运行清洁能源项目26个,累计实现新增和替代供暖(制冷面积)123万平方米,年代油7400吨、代气2400万方、节电410万千瓦时,累计创效7500余万元。  这印证着,近年来,中国石化胜利油田贯彻中央有关要求和中国石化相关部署,坚持绿色低碳发展战略,

点击化学:释义与目标

图1.  胺进攻的环氧化物开环反应: 一个典型的点击反应。 2001年,Scripps研究所的化学家、诺贝尔化学奖获得者K.Barry Sharpless提出点击化学(Click chemistry)概念,其主旨是开辟以碳-杂原子键(C-X-C)合成为基础的组合化学新方

新闻分析:“换头术”离现实还有多远

   近日,有科学家宣布世界首例人类头部移植手术已经在人类遗体上“成功”实施。消息一出即遭质疑:是科学突破还是博公众眼球的“噱头”?专家表示,在遗体上进行的这一手术,并不能证明活体“换头术”的可行性。  突破?  合作研究者、意大利都灵先进神经调节组织的神经学家塞尔焦·卡纳韦罗接受英国媒体采访时介绍

激光扫描共焦显微镜技术及应用(二)

五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度( pH值)的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用:细胞膜电位的测量      荧光漂白恢复(FRA