Antpedia LOGO WIKI资讯

悬浮细胞如何贴壁

贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动.悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动。所谓的贴壁培养是指大多数动物细胞在离体培养条件下都需要附着在带有适量正电荷的固体或半固体的表面上才能正常生长,并最终在附着表面扩展成单层。其基本操作过程是:先将采集到的活体动物组织在无菌条件下采用物理(机械分散法)或化学(酶消化法)的方法分散成细胞悬液,经过滤、离心、纯化、漂洗后接种到加有适宜培养液的培养皿(瓶、板)中,再放入二氧化碳培养箱进行培养。用此法培养的细胞生长良好且易于观察,适于实验室研究。但贴壁生长的细胞有接触抑制的特性,一旦细胞形成单层,生长就会受到抑制,细胞产量有限。如要继续培养,还需将已形成单层的细胞再分散,稀释后重新接种,然后进行传代培养。而悬浮培养是指少数悬浮生长型动物细胞在离体培养时不需要附着物,悬浮于培养......阅读全文

悬浮细胞传代

            实验方法原理 从悬浮细胞培养物中吸取样品,细胞计数,接种适量的悬浮细胞至新培养瓶的新鲜培养基中,使细胞浓度与开始培养时一致。 实验材料 起始培养物

悬浮细胞传代

实验方法原理从悬浮细胞培养物中吸取样品,细胞计数,接种适量的悬浮细胞至新培养瓶的新鲜培养基中,使细胞浓度与开始培养时一致。实验材料起始培养物仪器、耗材生长培养基吸管离心管培养瓶搅拌瓶移液器吸耳球吸水纸巾吸管桶抗乙醇记号笔血细胞计数板实验步骤1. 准备好超净台,将试剂及材料放于超净台上准备开始实验。2

怎样固定悬浮细胞

如何判断悬浮细胞培培养时,细胞是死的还是活的将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色 法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合,建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI- SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红

植物细胞悬浮培养

一、目的要求了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。二、基本原理利用固体琼脂培养基对植物的离体组织进行培养的方法在植物遗传实验中已经得到广泛的应用。但这种方法在某些方面还存在一些缺点,比如在培养过程中,植物的愈伤组织在生长过程中的营

植物细胞悬浮培养

一、目的要求 了解植物  细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。 二、基本原理 利用固体琼脂  培养基对植物的离体组织进行培养的方法在植物遗传实验中已经得到广泛的应用。但这种方法在某些方面还存在一些缺点,比如在培养过程中,植物的愈伤组织

提取悬浮细胞RNA

提取RNA器械:离心管2支,吸管4个,酒精灯,打火机,记号笔,200ul,1000UL枪,DEPC泡过的枪头EP管,紫外照过的手套。滤纸,DEPC纯水(750ml无水乙醇+150mlDEPC水,剧烈振荡,使劲的摇晃,直至混匀),氯仿,75%酒精,异丙醇,Trizol,预冷的离心机(两种),EP管架(

悬浮细胞如何贴壁

贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动.悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动。所谓的贴壁培养是指大多数动物细胞在离体培养条件下都需要附着在带有适量正电荷的固体或半固体的表面上才

悬浮细胞换液

  1细胞换液是否需要用PBS清洗  我们知道,在“贴壁细胞传代”中,培养基中的血清会抑制胰酶的活性,影响消化的效果,所以必须要PBS 的清洗。但对于细胞换液,尚未查到有资料明确说明是否需要PBS清洗。我觉得这里应该根据细胞的具体情况考虑:  1.若细胞比较“娇气”或生长状态不是特别好时,建议还是不

悬浮细胞如何去除死细胞

将培养瓶竖立放一段时间(50min左右),然后用吸管轻轻吸取上面1ml的细胞悬液,移入另一个新的已加培基的培养瓶中。或者ficoll分离,就像分离PBMC一样,先把细胞混匀,然后小心缓慢地把细胞加入到ficol中,1000g离心20分钟,收集位于ficoll和培养基之间的透明层,即为你的活细胞,这是

悬浮细胞克隆的分离

经验交流(0) 实验方法原理 用加样枪或 Pasteur 吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。 仪器、耗材 生长培养基                                                                  多孔板