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亚硝基胍的诱变作用与营养缺陷型菌株的筛选实验

实验方法原理亚硝基胍(NG、NTG)是一种广泛使用的强诱变剂。它主要在DNA链的复制区引起GC→AT的转换,即使在致死率很低的条件下也能对微生物产生高频率的突变。本实验利用亚硝基胍对谷氨酸棒杆菌进行诱变后,通过点种法检测出营养缺陷型,再经生长谱法进行鉴定,获取营养缺陷型菌株,并确定其营养缺陷的具体物质。实验材料菌株 : 谷氨酸棒杆菌 ( Corynebacterium glutam icum) T-13∶bio -试剂、试剂盒CB培养液CB固体培养基CB斜面MM培养基MM斜面柠檬酸缓冲液(pH5.5)磷酸缓冲液(pH7.0)生理盐水亚硝基胍混合氨基酸混合维生素(用10种等量的维生素混合而成)碱基混合物(用6种等量的碱基混合而成)。仪器、耗材恒温培养箱振荡器三角瓶试管吸管影印板牙签实验步骤(一)诱变处理1.菌悬液的制备挑取少许斜面菌种接入5mlCB培养液中,置30℃振荡(200r/min)培养8h,取0.5ml培养物转入另一5ml......阅读全文

亚硝基胍的诱变作用与营养缺陷型菌株的筛选实验

实验方法原理 亚硝基胍(NG、NTG)是一种广泛使用的强诱变剂。它主要在DNA链的复制区引起GC→AT的转换,即使在致死率很低的条件下也能对微生物产生高频率的突变。本实验利用亚硝基胍对谷氨酸棒杆菌进行诱变后,通过点种法检测出营养缺陷型,再经生长谱法进行鉴定,获取营养缺陷型菌株,并确定其营

亚硝基胍的诱变作用与营养缺陷型菌株的筛选实验

实验方法原理 亚硝基胍(NG、NTG)是一种广泛使用的强诱变剂。它主要在DNA链的复制区引起GC→AT的转换,即使在致死率很低的条件下也能对微生物产生高频率的突变。本实验利用亚硝基胍对谷氨酸棒杆菌进行诱变后,通过点种法检测出营养缺陷型,再经生长谱法进行鉴定,获取营养缺陷型菌株,并确定其营养缺陷

大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选

【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须

微生物的诱发突变实验_亚硝基胍法

实验方法原理亚硝基胍(NTG,N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍)是一种有效的化学诱变剂,在低致死率的情况下也有很强的诱变作用,故有超诱变剂之称。它的主要作用是引起 DNA 链中 GC→AT 的转换,亚硝基胍也是一种致癌因子,在操作中要特别小心,切勿与皮肤直接接触。凡有亚硝基胍的器皿,都要用

耐高温酵母菌株的诱变选育

实验概要 通过实验,观察紫外线对酵母菌的诱变效应,并学习物理因素诱变育种的方法。 实验原理 紫外线对微生物有诱变作用,主要引起是DNA的分子结构发生改变(同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体),从而引起菌体遗传性变异。 测定紫外光的剂量有直接法(以尔格/平方毫米表示绝对剂量)

污染物致突变性检测项目介绍

a.脂多糖屏障丢失(rfa)。用接种环或一端翘起的接种针以无菌操作取各菌株的增菌培养液,在营养琼脂平板上分别划平行线,然后用灭菌尖头镊夹取灭菌滤纸条,浸湿结晶紫溶液,贴放在平板上与各接种平行线垂直相交盖好皿盖后倒置于37℃恒温箱,培养24h后若纸片周围出现抑菌带,则说明测试菌株含有rfa突变。b.R

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(二)

6.10  菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1  组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制:高压灭菌琼脂和水后,将灭菌20%葡萄糖,

辐射对植物染色体的诱变作用实验

实验方法原理:物理射 线的电离辐射,具有非常短的波长以及相应的较大频率,其穿透力很大,在空气中γ-射线,射程可达几百米,速度为30万公里/秒。因此,对植物给予一定剂量的照射,很容易引起基因突变和染色体畸变,常见的有染色体粘着,着丝点区域断裂,破坏纺锤丝形成,染色体或染色单体的断裂等细胞学现象。

辐射对植物染色体的诱变作用实验

实验方法原理 物理射 线的电离辐射,具有非常短的波长以及相应的较大频率,其穿透力很大,在空气中γ-射线,射程可达几百米,速度为30万公里/秒。因此,对植物给予一定剂量的照射,很容易引起基因突变和染色体畸变,常见的有染色体粘着,着丝点区域断裂,破坏纺锤丝形成,染色体或染色单体的断裂等细胞学现

辐射对植物染色体的诱变作用实验

实验方法原理 物理射 线的电离辐射,具有非常短的波长以及相应的较大频率,其穿透力很大,在空气中γ-射线,射程可达几百米,速度为30万公里/秒。因此,对植物给予一定剂量的照射,很容易引起基因突变和染色体畸变,常见的有染色体粘着,着丝点区域断裂,破坏纺锤丝形成,染色体或染色单体的断裂等细胞学现