实验材料 血清试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材 水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤 一、材料准备 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏水中测值为 。按下式求出于一定体积的5%细胞悬液中应加入稀释液的毫升数。 Vi为配制的50%细胞悬液体积,Vf为于一定量5%细胞悬液中应加入稀释的ml数:Ds为已知标准化的1×100个细胞/ml 悬液的OD540值─0.385。 2. 致敏绵羊细胞取绵羊红细胞悬液(1×102/ml)加等量的溶血素(2 U/ml)。充分混合。置37℃水浴中作用30分钟,每隔10分钟摇动一次以免细胞下降即成5×108/ml致敏羊红细胞。二、操作步骤1. 补体CH50单位测定 (1) &nbs......阅读全文
一、补体测定1、血清总补体活性测定当兔抗羊红细胞血清与羊红细胞结合后,遇到补体即可使羊红细胞发生溶血,依据这一特点可建立测定血清中总补体活性的方法。当血清的效价和绵羊红细胞浓度保持一定的情况下,在规定的反应温度和时间内,溶血程度与补体量呈正相关。因此,通过测定溶血程度,即可测知补体的含量。目前常用的
可溶性抗原,如蛋白质、多糖、类脂质和病毒等,与相应抗体结合后,抗原抗体复合物可以结合补体,但这一反应肉眼不能察觉,如再加入红细胞和溶血素,即可根据是否出现溶血反应来判定反应系统中是否存在相应的抗原或抗体。这个反应就是补体结合反应。 补体结合反应是一种古老的血清学技术,Bordet和Geng
【原理】 补体能使溶血素(抗绵羊红细胞抗体)致敏的绵羊红细胞(SRBC)发生溶血,当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时,溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此,将新鲜待检血清做不同稀释后,与致敏红细胞反应,测定溶血程度,以50%溶血时的最小血清量判定终点,可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断
随着基础医学深入研究,高新科技检测技术在检验医学的广泛应用,使国内血液各项检查项目水平明显提高,但相比之下,先进的技术及方法在体液学常规检查中应用较少,为了提高我国体液学检测水平,现将近年来国内外进展综述如下。 一、尿液沉渣检查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣检验方法学进展主要是显微镜检查的标准化和沉
补体结合反应是免疫学反应中应用最为广泛的一种血清学反应。这种试验具有高度的敏感性而且不需要有已知的和明确的抗原和抗体,也是一种用于研究任何能产生免疫应答疾病的试验。图片来源于网络 补体结合反应试验的注意事项: 1. 补体是这项试验的关键材料,补体效价的测定是这项试验成败的关键。补体性质极不稳
小鼠补体3(C3)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中补体3(C3)含量。上海古朵生物科技公司高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,售后完善,并提供免费代检测服务。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: &n
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:补体法原理和操作指南一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——补体法,是一种荧光抗体染色法。本法之荧光抗体不受免疫血清的动物种属的限制,因而一种荧光抗体可作更广泛的应用,敏感性亦较间接法高,效价低的免疫血清亦可应用,节省免疫血清,尤其是对检查形态小的如立克氏
一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 
一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30
四、荧光抗体的保存 以0~4℃或-20℃低温保存,防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的叠氮钠防腐,小量分装如0.1~1ml,真空干燥后更易长期保存。[NextPage] 第三节 免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片
一)免疫荧光组织化学原理 将已知抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受到激发光的照射会发出明亮的荧光(黄绿色或橘红色
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本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T20U/ml -500 U/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中总补体(CH50)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠总补体(CH50)水平。用纯化的小鼠总补体(CH50)抗体包
检测范围: &
内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质,从而导致测定结果的假阳性。 1.类风湿因子(rheumatoid fact
一、补体分子的组分和命名 进入60年代后,由于蛋白质化学和免疫化学技术的进步,自血液中分离、纯化补体成分成功,现已证明补体是单一成分的论点是不正确的,它是由三组球蛋白大分子组成。即第一组分是由9种补体成分组成,分别命名为C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9
人血清补体含量相对稳定,只在患某些疾病时,血清补体总量或各成分含量才可能发生变动。目前可以根据补体的溶血活性测定其总含量,亦可用免疫扩散法定某些补体成分的含量。 恶性肿瘤等少数疾病病人血清补体总量可较正常人高2~3倍,对其意义并不清楚。在某些传染病中亦可见到代偿性增高。医
50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清,然后计算出每毫升血清中补体含量。以补体量作为横坐标,溶血百分数作为纵坐标,可得到一个清晰的“S”形曲线。在50%溶血周围,线段近似一条直线。因此当补体用量稍有变动,就可对溶血程度发生很大影响。所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因素也会对结果
血液与尿液的补体测定: 血清总补体(CH50)增高见于各种炎症,也作为急性阶段的反应物质。某些恶性肿瘤补体活性增高。血清CH50降低常见于急慢性肾小球肾炎、溶血性贫血和系统性红斑狼疮。急性肾小球肾炎血C3下降,尤以链球菌感染后急性肾小球肾炎下降更为明显医学教育网`搜集整理。膜增生性肾小球肾炎、狼疮
1、原理补体能使抗体致敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清量为横坐标绘图,可知在50%溶血附近补体的量与溶血程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50(50%complement
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠血清总补体(CH50)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠血清总补体(CH50)水平。用纯化的小鼠血清总补体(CH50)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清总补体(CH50),再与HR
实验概要本文以鼻疽为例介绍了固相补体结合试验(solid phase complementfixation test,SPCFT)的原理和操作流程。实验原理原理与直接补体结合反应的原理相同,即以是否溶血为标志,间接测定补体是否被特异的抗原抗体复合物所消耗的一种血清学反应。如果不溶血称为固相补体结合试
实验概要本文以鼻疽为例介绍了固相补体结合试验(solid phase complementfixation test,SPCFT)的原理和操作流程。实验原理原理与直接补体结合反应的原理相同,即以是否溶血为标志,间接测定补体是否被特异的抗原抗体复合物所消耗的一种血清学反应。如果不溶血称为固相补体结合试
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中大鼠补体蛋白3a(C3a)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠补体蛋白3a(C3a)水平。用纯化的大鼠抗- C3a抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入补体蛋白3a(C3a),再与HR