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哺乳动物DNA的快速分离

实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。实验材料 无 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳动物组织或全血试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液乙醇异丙醇醋酸钾溶液红细胞裂解缓冲液TE仪器、耗材 连有真空管的抽吸装置微量离心研棒水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液及溶液细胞裂解缓冲液(10 mmol/L Tris-Cl (pH 8.0),1 mmol/L EDTA ( pH 8.0),0.1%(m/V) SDS)乙醇异丙醇醋酸钾溶液(60 ml 的 5 mol/L 醋酸钾,11.5 ml 冰醋酸,28.5 ml 水)红细胞裂解缓冲液(20 mmol/L Tris-Cl (pH 7.6)TE ( pH 7.6)2. 酶及缓冲液无 DNase 的 RNase ( 4 mg/ml)蛋白......阅读全文

哺乳动物 DNA 的快速分离

            实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。

哺乳动物 DNA 的快速分离

根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 k

哺乳动物 DNA 的快速分离

实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。实验材料 无 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳动物组织或全血试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液乙

哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA

在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、

新研究揭示哺乳动物DNA复制机制

  在细胞中,DNA及其相关物质每隔一定时间就会复制,这是所有有机体必不可少的一个过程。这导致了从身体对疾病作出的反应到头发颜色在内的一切。DNA复制是在20世纪50年代后期确定的,但是从那以后,全球各地的研究人员都试图了解这一过程是如何精确地受到调节的。如今,科学家们知道了。  在一项新的研究中,

纯化DNA实验_从哺乳动物细胞或组织分离DNA

基因纯化,可以用于(1)对大量提取的质粒DNA进行纯化;(2)常用的方法有柱层析法和氯化铯梯度离心法。实验材料细胞试剂、试剂盒TBS抽提缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤

哺乳动物中制备基因组DNA实验

制备DNA             实验材料 动物组织

哺乳动物中制备基因组DNA实验

实验材料 动物组织 试剂、试剂盒 PBS乙酸铵乙醇酚氯仿异戊醇TE 仪器、耗材 离心机摇床研钵 实验步骤 1.  切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。   2.  将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每100 mg 组织用1. 2 ml

从哺乳动物细胞或组织分离DNA

1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次,用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中,将细胞悬液转移到冰浴的离心管中,用 1 mlTBS 冲洗培养皿,并入离心管中的细胞悬液。于 4℃ 以

用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA

            实验方法原理 本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩