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GFP和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验1

实验材料 进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸消化缓冲液NN-二甲基甲酰胺磷酸钠磷酸盐缓冲溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 单功能硫代吲哚花菁琥珀酰亚胺酯抗体SDS-聚丙烯酰胺凝胶明胶溶液聚-L-赖氨酸质粒 DNAGFP 融合载体CO2-非依赖性成像培养基仪器、耗材 Centricon 浓缩器色谱柱蛋白 A-琼脂糖凝胶柱可见吸收分光光度计组织培养板玻璃底组织培养皿放大器氩激光宽带绝缘反射镜MCPCCDGFPCy3单面镀银反射镜曲镜座透镜支架标竿后支架倒置显微镜可变光圈透镜水银灯油接物镜光学操作台Power PC水循环冷却装置实验步骤 第一阶段 用荧光染料标记蛋白质材料缓冲液和溶液将储备溶液稀释到适当的浓度。用 NaOH 调节的 N-二羟乙基甘氨酸（0.1mol/L,PH7.5)用 NaOH 调节的 N-二羟乙基甘氨酸（1mol/L,p......阅读全文