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上海生科院揭示Lis1调控胚肝造血干细胞扩增的分子机制

国际学术期刊Cell Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所刘小龙研究组的研究论文Lis1 is required for the expansion of hematopoietic stem cells in the fetal liver。该成果揭示了Lis1调控胚肝造血干细胞扩增的分子机制。 胚肝造血干细胞通过快速扩增来建立用于维持机体整个生命周期造血功能的干细胞库。而调控该扩增过程的分子机制一直以来都是发育生物学以及干细胞生物学研究的热点。尽管科学家们已经揭示了一些营养因子在促进胚肝造血干细胞增殖中的作用,但是调控胚肝造血干细胞快速扩增的关键分子尚不明确。 刘小龙研究组博士研究生陈旭峰和张佳利的研究发现,Lis1在胚胎造血系统中的敲除会导致胚肝造血干细胞数量的减少及功能的缺失,进而造成全血细胞减少及胚胎致死。进一步的机制研究表明Lis1缺失的胚肝造血干细胞在进行有丝分裂......阅读全文

Th17细胞:肿瘤过继细胞治疗的又一利器!

  近期,《JCI Insight》期刊发表一篇文章揭示,一类辅助T细胞——Th17细胞可以作为肿瘤过继细胞治疗的新选择,因为它们保留有类似于干细胞的特性,且体外长期培养扩增过程不会损耗它们的抗肿瘤活性。  这一研究由南卡罗莱纳医科大学(MUSC)的科研团队完成。通常,肿瘤过继细胞治疗选用的细胞毒性

癌基因的关键——染色体外环状DNA(eccDNA)

实验方法:环状DNA-seq, RNA-seq(云序生物提供以上服务)1. ecDNA是环状结构为了了解ecDNA的结构,作者通过环状DNA-seq(云序生物提供以上服务)方法研究了三种人类癌细胞系和来自于TCGA的临床肿瘤样品。通过这种方法检测到了GBM39细胞中的圆形扩增子游

有望提高CAR-T细胞扩增效率10倍!

  去年是CAR-T疗法的元年——这种突破性疗法让一名又一名癌症患者绝处逢生,将一个个“死亡判决”,转变为了一个个生命奇迹。两款CAR-T疗法的问世,也揭开了癌症治疗的新纪元。  但获批上市并非这类疗法的研发尽头。研究人员们清楚地知道,此类疗法尚有不小的瓶颈。从流程上看,研究人员需要先从患者体内分离

单克隆抗体的制备(三)

3.2 免 疫 B 细胞的制备血清效价有意义(>1 : 1000)的免疫后动物可以提供抗原反应性B 细胞用于融合。这些细胞可以从脾脏或淋巴结中获得。动物用吸人CO2 处死,在无菌操作下取组织,放 在 4°C无血清培养基中,最多可放lh 。用慑子或针头轻轻打开组织脾脏或淋巴结的外包膜获得

通过技术创新 驱动CAR-T制造优化

  随着CAR-T疗法获批上市,优化CAR-T细胞生产工艺成为迫切需求,市场急需更高效、成本更低的细胞生产工艺。2017年全封闭自动化CAR-TXpress™系统正式进入CAR-T市场,为全球带来新一代CAR-T生产工艺,可实现CAR-T细胞高效率、低成本生产,备受瞩目。近日,《CELL &

在New Brunswick S41i CO2恒温摇床内采用透气袋实现人类T细...1

在New Brunswick S41i CO2恒温摇床内采用透气袋实现人类T细胞快速扩增摘要近年来细胞治疗领域取得的进步大大提升了对T细胞扩增技术的需求。 T细胞必须能够迅速扩增, 才能在维持高存活率和T细胞属性的同时达到高细胞密度。 搅拌罐生 物反应器是实现大规模扩增的最佳细胞培养工具之一。

一种新兴的癌症细胞疗法—过继性免疫治疗

  过继性免疫治疗(Adoptive Cell Transfer Therapy, ACT),是指从肿瘤患者体内分离免疫活性细胞,在体外进行扩增和功能鉴定,然后向患者回输,从而达到直接杀伤肿瘤或激发机体的免疫应答杀伤肿瘤细胞的目的。过继性免疫细胞治疗主要包括TIL、LAK、CIK、DC、NK、TCR

CAR-T和CAR-T疗法基础

免疫疗法是当下肿瘤治疗领域最具前景的发展方向之一。随着PD-(L)1等免疫检查点抑制剂应用范围逐渐扩大,CAR-T疗法研究不断出现新的进展,CAR-T疗法作为有别于传统药物的“活药”,不仅对复发、难治性肿瘤患者表现出了突破性疗效,其生产体系和使用场景也有别于普通药物。鉴于当下生物技术的更新速度,预计

原位PCR技术

除了经典的原位杂交外。原位杂交可与其他组织化学技术相结合,或与其他分子生物学技术相结合,使其应用范围扩大,成为更有应用价值的技术。PCR技术是根据生物体内DNA复制的特点而建立的在体外经酶促反应将特定DNA序列进行高效和快速扩增的技术,它可将单一拷贝或低拷贝的待测核酸以指数形式扩增而达到用常规方法可

腺病毒体外在293细胞中大量扩增的方法

在293 细胞中大量扩增腺病毒一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法最终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×101

离心机用于腺病毒体外在293细胞中大量扩增

一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法zui终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗粒。如果要把病毒

讨论潮式生物反应器对贴壁细胞培养的线性放大性

背景介绍十年前一次性生物反应器首次引入商业生产后,生物制备工艺业已将其归纳为cGMP标准。现有的搅拌式反应器只能支持悬浮细胞培养,而VaccixCell的TideMotion®潮汐式生物反应器CelCradleTM(500ml)和TideCell®(2升-500升),是目前市面上仅有的少数可用于大规

在New Brunswick S41i CO2恒温摇床内采用透气袋实现人类T细...2

创建低温保存T细胞库和冷冻培养基配方创建细胞库对本研究而言非常重要, 因为在进行广泛研究时, 购买多瓶原代人类 T细胞会使得成本过高。 一旦发现T细胞扩增的最佳条件, 便选择一包密度最高、 生存能力最强的Evolve袋复冻回细胞库中。 低温保存的培养基配方如表2所示。 首先,向已用培养基的细

微载体培养技术(microcarrier culture technique)原理操作-2

5. 微载体培养操作要点 ●培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。 ●

微载体细胞培养技术及应用原理

  微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下:   一、微载体培养技术的应用   微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。

微载体细胞培养技术及应用原理(二)

5.微载体培养操作要点• 培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。• 贴壁阶

原位PCR技术基本原理、类型、步骤和应用-2

标本的制备原位PCR技术可应用于细胞悬液、细胞涂片、冰冻切片以及石蜡切片。相比较而言,以悬浮的完整细胞做原位PCR效果最好,石蜡切片效果最差。随着技术方面的一些问题被解决,近年也有从石蜡切片中得到满意的PCR效率的报道。效果不好的原因是多方面的,如:玻片上做PCR,热传导较差,热对流不均匀,TaqD

李汉杰博士等开发新型测序技术及揭示肿瘤T细胞的转录

  肿瘤组织中免疫细胞的组成在免疫治疗中起关键作用,然而人类肿瘤组织中免疫细胞的异质性和分化途径还有待研究。李汉杰博士等通过对25名黑色素瘤患者肿瘤中免疫细胞的单细胞转录组测序和单细胞TCR测序分析,发现大量的CD8 T细胞的转录组呈连续性梯度分布,跨越了从“过渡态”到“功能失调状态”的分化途径。相

CART:治愈癌症的终极疗法

  近几年来,CART 疗法被科学家称为癌症治疗的「第五支柱」。在接下来几年中,这一系列疗法还将取得前所未有的进展,刷新人们对过继细胞疗法的认知。  美国年轻妇女碧儿瑟患有恶性淋巴瘤。  因为传统放化疗等疗法对她无效,医生向她建议了一种可能适合她、2017年以后才在美国获准使用的新疗法——CART疗

What?肠道微生物菌群能够促进器官发育?

   肠道是一个复杂的生态系统,也是多种寄生微生物与动物宿主微生物之间相互共生的地点。动物的宿主微生物菌群能够促进动物胃肠道发育的作用已经不容置疑。 然而,动物体内的寄生微生物菌群对消化器官发育所产生的影响仍然难以捉摸。 在本文中,研究人员Hill 等人提出肠道微生物菌群在斑马鱼早期幼鱼发育过程中,

攻克肿瘤的圣斗士之一:CAR-T 技术详解

  “叮叮当叮叮当铃儿响叮当,我们滑雪多快乐我们坐在雪橇上……”伴着欢快的歌声,又一个圣诞节就要到啦,今天的平安夜,你有没有准备好长长的圣诞袜,来盛装心仪的礼物呢?不要心急,圣诞老人已经乘驾装满礼物的雪橇车出发啦,相信有九只驯鹿的保驾护航,一定可以攻克各路妖魔鬼怪,在圣诞节给你一个大大的surpri

单克隆抗体的制备(二)

3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的,很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原,都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中,产生的抗体量会增加,总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主,特异性抗体

如何重编程记忆T细胞用于细胞治疗

  最近,德克萨斯大学MD Anderson癌症研究所的研究人员使用表观遗传学药物和细胞因子的组合方法,将从患者体内收获的T细胞在实验室中扩增,从而将它们重新编程为更强的T细胞类型,这种类型的细胞用于治疗患者,有助于患者的生存时间延长。相关结果发表在最近的《Cancer Immunology Res

深度完整版:CAR-T的现状和未来

  CAR-T(T细胞嵌合抗原受体)作为一种免疫细胞治疗方案,在全球范围内吸引了包括学者、医生、患者、投资人的大量关注。然而CAR-T具体是什么,它的背后有什么样的故事、目前的研究状况如何,未来又将走向何方呢?  CAR-T带来的新曙光  自古以来,人们不断地与癌症进行斗争。科学家们考古发现的木乃伊

小分子“魔法药水”体外实现人类原代肝细胞逆转化和扩增

  上海交通大学医学院附属仁济医院鄢和新教授和第二军医大学东方肝脏外科医院王红阳院士研究团队发表了最新原创性成果“Expansion and differentiation of human hepatocyte-derived liver progenitor-like cells and the

抗原呈递细胞的选择和制备(二)

备 选 方 案 2 Con A 刺激的腹腔巨噬细胞的制备此方案中不使用致病菌,但巨噬细胞获得率较低。将 Con A 溶 解 于 PBS (200ul/ml) ,用 0.22/xm 的滤器过滤,然后保存于 一 20°C 。 每只小鼠腹腔注射 500ul (IOOug)C o n A (附录 2

CAR-T疗法之改善的道路

  近几年CAR-T因其在白血病等液体瘤上的巨大潜力,被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一,然而依然存在如免疫抑制微环境、T细胞效力不强及细胞毒性等难题制约着CAR-T功效的发挥。前两期我们已经学习了CAR-T的基本知识,本期,我们就为大家介绍,CAR-T疗法中影响T细胞功能(增殖能力和免疫功能)的一

DNA重组(DNA recombination)技术:外源基因的蛋白表达-4

(3)CHO细胞稳定表达系统:动物细胞瞬时表达系统中外源基因没有稳定地整合到宿主细胞染色体中,一染色体外DNA的形式存在。因而只能瞬时表达。要使外源基因在宿主细胞中高效、稳定地表达,必须建立一个稳定表达系统,包括适宜的表达载体、有效的基因转染、标记基因和目标基因的选择与共扩增、受体适当的受体细胞和培

肿瘤免疫治疗的CAR-T疗法

肿瘤免疫治疗的CAR-T疗法,CAR- T,全称Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy,即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法;原理在于经嵌合抗原受体修饰的T细胞,可以特异性地识别肿瘤相关抗原,使效应T细胞的靶向 性、杀伤活性和持久性均较常规应用的免疫细胞

翊博普惠公司首个人类DC细胞资源库在京建成

  北京翊博普惠生物科技发展有限公司是一家从事免疫细胞基础研究和临床应用的企业,专注免疫细胞抗癌、抗病毒研发。在研项目包含DC治疗性疫苗、DC诱导的免疫效应细胞在癌症治疗方面的应用等。公司依托自有CelArtics®-DC技术平台,于近期建成首个极具科研和临床应用价值的人类DC细胞资源库。  人类D