一文了解溶菌酶的制备鉴定

溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动物和高等动物中也发现了溶菌酶的存在。其中鸡蛋清溶菌酶的研究和应用已相当深入和广泛。另外随着基因工程技术的发展,通过人工合成基因,用微生物发酵生产人溶菌酶的研究也正在深入进行之中。 鸡蛋清溶菌酶是由129个氨基酸残基组成的碱性球蛋白,单一肽链,分子量为14388,分子内含有4对二硫键。由于其含的碱性氨基酸残基比酸性氨基酸残基多,所以它的等电点高达11左右,等电点约为10.5~11,zui适温度为50℃,zui适pH为6~7左右。鸡蛋清中的溶菌酶的含量约占蛋白质总量的3.4%~3.5%。 溶菌酶既是药品又是保健品,还是生化药物中理想的药物酶,国外已经开始利用于药物制剂......阅读全文

溶菌酶的制备、纯化和鉴定

实验概要制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动

一文了解溶菌酶的制备鉴定

  溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动物和高等动物中也发现了溶菌酶的存在

溶菌酶的制备

  溶菌酶是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。  该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基构成的单

溶菌酶的制备方法

溶菌酶是采用生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。   该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链。

溶菌酶的制备方法

目前溶菌酶可以以鸡蛋清和蛋壳膜为材料提取制得,常用的方法有亲和层析法、离子交换树脂法、直接结晶法和聚丙烯酸沉淀法等。亲和层析法亲和层析法是利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。常常使

溶菌酶的制备方法

目前溶菌酶可以以鸡蛋清和蛋壳膜为材料提取制得,常用的方法有亲和层析法、离子交换树脂法、直接结晶法和聚丙烯酸沉淀法等。 亲和层析法亲和层析法是利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。常常

溶菌酶的制备及优点

  制备  溶菌酶是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。  该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基

溶菌酶的制备流程相关介绍

  c是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。  该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基构成的单一肽

溶菌酶的制备办法介绍

目前溶菌酶可以以鸡蛋清和蛋壳膜为材料提取制得,常用的方法有亲和层析法、离子交换树脂法、直接结晶法和聚丙烯酸沉淀法等。 亲和层析法亲和层析法是利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。常常

溶菌酶纯度鉴定与分子量测定

一、实验目的和内容目的:1. 通过本次实验的学习与操作,使学生在实验过程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)测定蛋白质纯度与分子量的原理与依据;2. 要求学生掌握电泳原理以及SDS-PAGE垂直板电泳分离蛋白质技术;3. 熟悉垂直板电泳操作原理和方法,凝胶染色与脱色方法,凝胶图谱的绘制与计算

亲和层析法制备溶菌酶的方法介绍

  亲和层析法是利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。常常使用的吸附剂为几丁质及其衍生物,如:几丁质粉、羧甲基几丁质、几丁质包埋纤维素、脱氨几丁质粉、N-酰化壳聚糖、脱氨再生几丁质凝

离子交换树脂法制备溶菌酶的介绍

  离子交换法是利用离子交换剂与溶液中的离子之间所生的交换反应来进行分离的,分离的效果较好,广泛用于微量组分的富集。一般流程为:鲜蛋一预处理一搅拌吸附一上柱洗脱一等电点沉淀一透析一喷雾干燥一成品。 [9]  溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内,分子带正电荷,可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上,洗脱后

创伤弧菌的制备及鉴定

创伤弧菌属革兰氏阴性弧菌。在液体培养基中菌体大小为0.7*2-3μm,稍弯曲。在固体培养基中呈多样性。有极端单鞭毛。培养特性:营养要求一般,最适生长温度为30℃,兼性厌氧。在无NaCl及超过8%NaCl的培养基中不生长,可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生长,在含6%NaCl的蛋白胨水中

创伤弧菌的制备及鉴定

   创伤弧菌属革兰氏阴性弧菌。在液体培养基中菌体大小为0.7*2-3μm,稍弯曲。在固体培养基中呈多样性。有极端单鞭毛。培养特性:营养要求一般,最适生长温度为30℃,兼性厌氧。在无NaCl及超过8%NaCl的培养基中不生长,可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生长,在含6%NaCl的蛋白

关于溶菌酶的食盐直接结晶法制备法介绍

  在蛋清中加入一定量的碘化物或碳酸盐等盐类,并调pH值至9.5—10.0,溶菌酶会以结晶形式慢慢析出,而大多数蛋白质仍然在溶液。在超滤浓缩脱盐后,为获得较纯产品,采用结晶纯化酶液经超滤处理后,用NaOH调整pH 9.5,离心去除。上清液在缓缓搅拌下,加NaCl至5%,静置一周,得粗结晶。结晶溶于p

溶菌酶(lysozyme)的制备及其性质实验原理和操作(2)

2.鸡蛋清粗分离 按过滤好的蛋清量边缓慢搅拌边加入等体积的去离子水,均匀后在不断搅拌下用1mol/L HCl调pH值至7左右,用脱脂棉过滤收滤液。 3.D152大孔弱酸性阳离子交换树脂层析 ⑴ D152树脂处理:将D152树脂先用蒸馏水洗去杂物,滤出,用1mol/L NaOH搅拌浸泡并搅拌4~8小时

聚丙烯酸沉淀法制备溶菌酶的介绍

  聚丙烯酸沉淀法为将提取过滤后含酶洗脱液,首先经过吸附步骤,即将过滤后的澄清溶液用20%的NaOH溶液调pH至6.0,在调pH值的过程中不停的搅拌。有少量的乳白色沉淀析出,然后加入15%聚丙烯酸,立即有白色沉淀析出,加至pH值为3.0为止,静置17个小时进行静析,得到粘附于底部的乳白色胶状物。第二

溶菌酶(lysozyme)的制备及其性质实验原理和操作(1)

【实验内容】 1.溶菌酶Y活性检测 ⑴ 酶活力测定方法 ⑵ 酶活力单位定义 ⑶ 比活力定义 ⑷ 蛋白含量测定方法 2. 蛋清溶菌酶的提取 ⑴ 每组4~5个新鲜鸡蛋 ⑵ 利用等电点沉淀及树脂层析等方法进行溶菌酶提取 3. 溶菌酶的分离、纯化 ⑴ 利用

SPA的提取、纯化与鉴定(煮沸提取法和溶菌酶消化法)

(一) SPA的提取SPA提取的方法很多,包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下:1.煮沸提取法⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上,37℃培养20h~24h。⑵ 以 0.15mol/L pH5.9PB液将菌苔洗下,配成10%(V/V)的悬液。⑶

溶菌酶的制备及其性质测定的原理和操作方法

实验概要本实验介绍了溶菌酶(lysozyme)的制备及其性质测定的原理和操作方法。实验原理溶菌酶(lysozyme)是由弗莱明在1922年发现的,它是一种有效的抗菌剂,全称为   1,4-β-N-溶菌酶,又称作粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶或胞壁质酶。活性中心为天冬氨酸52和谷氨酸35,是一种糖苷水解酶

溶菌酶厂家讲解溶菌酶的作用机制

  溶菌酶厂家讲解溶菌酶的作用机制   溶菌酶是一种广泛存在于生物体内,专一性地作用于微生物细胞壁的盐基水解蛋白酶,已被广泛应用于医药和生物工程领域,由于其无毒、无害、安全性高等特点,逐渐受到动物食品的上游-畜牧业的重视。   溶菌酶(Lysozyme)又称细胞壁质酶(Muramidase)或N

溶菌酶厂家讲解溶菌酶的作用机制

  溶菌酶厂家讲解溶菌酶的作用机制   溶菌酶是一种广泛存在于生物体内,专一性地作用于微生物细胞壁的盐基水解蛋白酶,已被广泛应用于医药和生物工程领域,由于其无毒、无害、安全性高等特点,逐渐受到动物食品的上游-畜牧业的重视。   溶菌酶(Lysozyme)又称细胞壁质酶(Muramidase)或N

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性

溶菌酶作用

1、在医学应用上可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加快组织恢复功能等作用。2、在食品保藏应用可作为防腐剂,主要功用是水解细菌细胞壁,在细胞内,则对吞噬后的病原菌起破坏作用.该酶对革兰氏阳性菌中的枯草杆菌、耐辐射微球菌有分解作用。3、在生物工程领域上,因溶菌酶专性