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膜片钳记录和分析技术(一)

细胞是动物和人体的基本组成单元,细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的,离子和离子通道是细胞兴奋的基础,亦即产生生物电信号的基础,生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学(electrophysiology),即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小和规律的科学。早期的研究多使用双电极电压钳技术作细胞内电活动的记录。现代膜片钳技术是在电压钳技术的基础上发展起来的。1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术(patch clamp recording technique)。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的(或多个的离子通道分子活动的技术)。以后由于吉欧姆阻抗封接(gigaohm seal, 109Ω)方法的确立和几种方法的创建。这种技术点燃了细胞和分子水平的生理学研究的革命之火,它和基因克隆技术(gene cloni......阅读全文

膜片钳记录和分析技术(一)

细胞是动物和人体的基本组成单元,细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的,离子和离子通道是细胞兴奋的基础,亦即产生生物电信号的基础,生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学(electrophysiology),即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小

膜片钳记录技术

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

膜片钳技术的应用进展(一)

【摘要】  膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”,应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在,并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】  膜片钳技术 离子通道 进展    1976年由德国马普生物物理化学研究所的Neher和Sakamann首次报道了应用膜片钳技术在蛙胸

培养细胞膜片钳记录实验

实验方法原理培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细胞原代培养过程与急性分离细胞的过程基本一致,但前者需在无菌条件下进行实验材料细胞试剂、试剂盒细胞培养液一般用F-12medium细胞分离过程用液一般用Pu

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料 神经细胞试剂、试剂盒 孵育

培养细胞膜片钳记录实验

基本方案             实验方法原理 培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料神经细胞试剂、试剂盒孵育细胞外

培养细胞膜片钳记录实验

实验方法原理 培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细胞原代培养过程与急性分离细胞的过程基本一致,但前者需在无菌条件下进行实验材料 细胞试剂、试剂盒 细胞培养液一般用F-12medium细胞分离过程用液一般

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内