免疫组化操作规程

(一)、仪器设备 1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉; 2)水浴锅 (二)、试剂 1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。 3)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。 4)1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml。 5)酶消化液: a、0.1%胰蛋白酶液:用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0......阅读全文

免疫组化操作规程

(一)、仪器设备    1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;     2)水浴锅 (二)、试剂      1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。     2

免疫组化操作规程

  (一)、仪器设备    1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅   (二)、试剂    1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。

免疫组化操作规程

  (一)、仪器设备    1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅   (二)、试剂    1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。

免疫组化操作规程

免疫组化操作规程(一)、仪器设备   1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅(二)、试剂     1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。   

免疫组化的操作规程

实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬

免疫组化的操作规程

实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬

免疫组化的经验总结(2)-操作规程

(一)、仪器设备    1)450px不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;     2)水浴锅(二)、试剂     1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。    2)0.0

免疫组化

免疫组织化学又称免疫细胞化学,可以用于:(1)显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应;(2)是对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。实验方法原理带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的

免疫组化

一,免疫组织化学简介免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚

免疫组化

一,免疫组织化学简介免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚

免疫组化准备

最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗,注意抗体的特异性、效价和交叉反应,最好用单抗。其他常用试剂有:1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS),稀释抗体和洗片子用;2、清洁液、纯水,洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片,防止脱片4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;5、15%~30%蔗糖

免疫组化操作

 (一)、仪器设备1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.2. 水浴锅(二)、试 剂1. PBS缓冲液(pH7.2―7.4)2.0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,pH6.0,1000ml)3. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制4. 风裱剂:a. 甘油和0.5mm

免疫组化步骤

1。4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后; 2。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5m

免疫组化流程

实验步骤 第一天:1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min,脱蜡3、水化:100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注:以下步骤切勿让组织处于干燥状态!4、将切片置于修复盒,

免疫组化实验

实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水

免疫组化的意义

意义:标记物--作用--阳性部位--临床意义。免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunoh

免疫组化步骤设计

你的一抗的生产商应该提供有实验方法,按照他们优化过的步骤来做最为明智。也可以网上搜索到标准的免疫组化步骤,但是所用抗体及封闭等试剂的浓度,孵育时间长度等还是要靠自己摸索,麻烦多多。如果样品是胰脏一般很容易得到阳性结果。

免疫组化实验原理

    首先来谈一下免疫组织化学(IHC, Immunohistochemistry)、免疫细胞化学(ICC, Immunocytochemistry)和免疫荧光(IF, immunofluorescence technic )的共通之处和区别。    平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织

免疫组化技术要点

1. 固定最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。(1)BouinS固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较

免疫组化的原理

  抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示

免疫组化主要步骤

免疫组化主要步骤1.        洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上

免疫组化染色步骤

石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理:    抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等几种试剂,对已清洗的载玻

免疫组化的分类

  免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。  这些常用免疫组织化学方法的原理如下:  1. 免疫荧光细胞化学技术  将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的

常用免疫组化方法

目前几种常用免疫组化方法简单介绍1)免疫荧光方法是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可

液体比重天平操作规程操作规程

 1、液体比重天平主要用途及作用原理液体比重天平是计量仪器之一,可供化工部门、科学研究部门的实验室等作测定液体比重之用。本天平是有一标准测锤体积(125px3)浸没于液体中获得浮力而使横梁失去平衡,然后在横梁的V形槽里放置各种定量骑码(砝码),使横梁恢复平衡,就能迅速正确测得该液体的比重。2、液体比

什么是免疫组化染色

是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态

什么是免疫组化染色

是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

免疫组化的操作步骤

一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加