关于体外转录的基本介绍
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。......阅读全文
关于体外转录的基本介绍
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。
关于体外转录的转录条件介绍
转录模板必须满足： 1. 在基因组全长克隆过程中，在正向引物5‘末端添加T7启动子序列； 2. 以T7启动子作为体外转录启动子，在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高； 3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。
关于体外转录的操作步骤介绍
1. 提取cDNA质粒； 2. 线性化质粒：（利用单一的酶切位点线性化有利于转录） 3. 纯化质粒：（尽量避免RNase污染） ① 加等体积的Tris-苯酚：氯仿（1:1）到100μL限制内切酶消化体系，涡旋振荡20s, 13000g离心5min； ②上清转移，加入2倍体积无水乙醇和1/10
关于转录控制的基本介绍
在分子生物学和遗传学中，转录调节是指细胞调控DNA转化为RNA(转录)的手段，从而使基因活动得到编排。 转录因子是一种与特定DNA序列结合的蛋白质，以调节特定基因的表达。转录因子的力量在于它们能够激活或抑制下游目标基因的广泛的序列。这些转录因子以一种组合方式工作的事实意味着，只有一小部分生物体
关于基因转录的基本介绍
基因转录是在细胞核和细胞质内进行的。它是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，在RNA聚合酶作用下合成RNA的过程。基因转录有正调控和负调控之分。 如细菌基因的负调控机制是当一种阻遏蛋白(repressor protein)结合在受调控的基因上时，基因不表达；而从靶基因上去除阻遏蛋白
关于体外翻译的基本介绍
体外翻译，有两种体外翻译的基本方法：以RNA为模板，或以DNA为模板（即偶联的转录/翻译）。RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。 有两种体外翻译的基本方法：以RNA为模板，或以DNA为模板（即偶联的转录/翻译）。RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。DNA模板
体外转录
· In Vitro RNA Transcription (Promega)For in vitro preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
关于tRNA转录加工的基本介绍
主要加工方式是切断和碱基修饰。真核生物tRNA前体一般无生物学特性，需要进行加工修饰。加工过程包括： （1）剪切和拼接 tRNA前体在tRNA剪切酶作用下，切成一定大小的分子。大肠杆菌RnaseP特异切割tRNA前体5′旁侧序列，3′－核酸内切酶如RnaseF可将tRNA前体3′端一段序列切
关于转录的基本信息介绍
转录（Transcription）是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链（模板链用于转录，编码链不用于转录）为模板，以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步，进行转录时，一个基因会被读取并被复制为mRNA，
关于反转录病毒的基本介绍
逆转录病毒（Retrovirus）,又称反转录病毒,属于RNA病毒中的一类,它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸（DNA）,而是储存在核糖核酸（RNA）上。逆转录病毒基因组为二倍体,两条相同的单股正链RNA,其两端为长末端重复序列（LTR）,内含有较强启动子和增强子,对病毒DNA的转录调控具有重
关于mRNA转录加工的基本介绍
1、加帽 即在mRNA的5'-端加上m7GTP的结构。此过程发生在细胞核内，即对HnRNA进行加帽。加工过程首先是在磷酸酶的作用下，将5'-端的磷酸基水解，然后再加上鸟苷三磷酸，形成GpppN的结构，再对G进行甲基化。 2、加尾 这一过程也是细胞核内完成，首先由核酸外切酶切
关于副反转录病毒的基本介绍
副反转录病毒(retrovirus)的病毒特征为其基因组是双股(+)RNA，病毒含有RNA-DNA聚合酶(RNA-directed DNA polymerase)亦即反转录脢(retrotranscriptase)做为复制之用，反转录病毒具有二十面体对称核心，内含核醣蛋白，外有包膜，一般研究认为
关于转录酶的基本信息介绍
RNA聚合酶（RNA polymerase）是以一条DNA链或RNA为模板，三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶，因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关，所以也称转录酶。
关于反转录的基本信息介绍
反转录也称为逆转录，两者是混用的，英文都是reverse transcription，搜索这两个词就会知道。因为编写人教版高中生物必修2和必修3的人不同，所以这两本书并没有用同一个词，所以有些人以为这两个词是不同意思。 反转录过程由反转录酶催化，该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP），即
关于转录因子的基本信息介绍
真核生物转录起始过程十分复杂，往往需要多种蛋白因子的协助，转录因子与RNA聚合酶Ⅱ形成转录起始复合体，共同参与转录起始的过程。根据转录因子的作用特点可分为二类；第一类为普遍转录因子,它们与RNA聚合酶Ⅱ共同组成转录起始复合体时，转录才能在正确的位置开始。除TFⅡD以外，还发现TFⅡA，TFⅡB，
关于转录单位的基本信息介绍
转录单位是指RNA的合成是由RNA聚合酶（RNA polymerase)催化的。当RNA聚合酶结合到基因起始处时，即为启动子（promoter)的特殊序列上时，转录开始进行。最先转录成RNA的一个碱基对是转录起点（startpoint)，启动子序列围绕在它周围。 从起点开始，RNA聚合酶不断沿
RNA干扰的体外转录的相关介绍
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相
体外转录合成单链RNA探针:体外转录法
体外转录法l 体外转录合成单链RNA探针1. 用适当的限制酶消化超螺旋质粒DNA制备5 pmol的线性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）进行琼脂糖凝胶电泳分析。如有必要，再补加限制性酶进行温育，直至不再残存痕量的未消化DNA。2. 如必须用产生3’突出端
关于逆转录的基本信息介绍
以RNA链为模板，经逆转录酶（即依赖于RNA的DNA聚合酶）催化合成DNA链，叫做逆转录。这种机制在RNA肿瘤病毒中首先发现。 RNA聚合酶是以DNA为模板的RNA聚合酶，也称转录酶。 原核生物的RNA聚合酶分子量很大，通常由5个亚基组成；两个α亚基，β，β′和σ，可写作α2ββ′σ。含有5
关于转录过程的基本信息介绍
转录( transcription)是指以DNA为模板，以ATP、UTP、GTP和CTP为原料，按照碱基互补原则，在RNA聚合酶的作用下合成RNA的过程，是基因c表达的第一步。原核细胞只有一种RNA聚合酶；而真核细胞则有3种：RNA聚合酶I、RNA聚合酶Ⅱ及RNA聚合酶Ⅲ。DNA双链中作为转录模
siRNA的体外转录合成方法的介绍
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的
关于AMV逆转录酶的基本介绍
amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板，具有以r
关于转录终止子的基本信息介绍
在原核中，发现终止信号存在于RNA真核中的聚合酶已经转录过的序列之中。这种提供终止信号的结构就称为终止子。 终止子可分为两类。一类不依赖于蛋白质辅因子就能实现终止作用。另一类则依赖蛋白辅因子才能实现终止作用。这种蛋白质辅因子称为释放因子，通常又称ρ因子。 两类终止子有共同的序列特征。在转录终
体外转录siRNAs的技术特点
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的
体外转录的概念和过程
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。
关于转录因子的转录抑制区的介绍
也是转录因子调控表达的重要位点，但是对其作用机理研究尚不深入。可能的作用方式有三种：1）与启动子的调控位点结合，阻止其它转录因子的结合；2）作用于其它转录因子，抑制其它因子的作用；3）通过改变DNA的高级结构阻止转录的发生。 转录因子必须在核内作用，才能起到调控表达的目的。因此，转录因子上的核
关于转录的特点介绍
转录时，细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA，通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比，转录有很多相同或相似之处，亦有其自己的特点。 转录中，一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说，以特定的DNA片段作为模板，以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂，
关于反转录转座子的基本信息介绍
反转座作用出现在真核生物，包括能自由地感染宿主细胞的反转录病毒，以及通过以RNA为中介进行转座的DNA序列。除反转录病毒外，反转录转座子可以分成两类：一类是病毒超家族(viral superfamily)，这类反转录转座子编码反转录酶或整合酶(integrases)，能自主地进行转录，其转座的机
关于逆转录酶的基本信息介绍
反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶，该酶以RNA 为模板，以dNTP 为底物，tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物，在tRNA 3'-OH
体外转录合成siRNAs的方法特点
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的