体外转录的概念和过程
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。......阅读全文
体外转录的概念和过程
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。
转录的概念和过程
转录是指由DNA合成RNA的过程。在转录期间，RNA聚合酶根据需要将一个基因的DNA拷贝成mRNA，这个过程在真核生物和原核生物中是相似的。与原核生物明显不同的是，真核RNA聚合酶在转录过程中与mRNA加工酶结合，因此，真核生物的mRNA加工可以在转录开始后快速进行。短寿命的未加工或部分加工的转录产
体外转录
· In Vitro RNA Transcription (Promega)For in vitro preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
转录的定义和过程
转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特
关于体外转录的转录条件介绍
转录模板必须满足： 1. 在基因组全长克隆过程中，在正向引物5‘末端添加T7启动子序列； 2. 以T7启动子作为体外转录启动子，在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高； 3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。
体外转录合成单链RNA探针:体外转录法
体外转录法l 体外转录合成单链RNA探针1. 用适当的限制酶消化超螺旋质粒DNA制备5 pmol的线性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）进行琼脂糖凝胶电泳分析。如有必要，再补加限制性酶进行温育，直至不再残存痕量的未消化DNA。2. 如必须用产生3’突出端
转录水平调控的概念和方式
转录水平调控是真核基因表达调控的重要环节。根据真核基因表达是否受环境影响可分为：发育调控和瞬时调控。其中发育调控是指真核生物为确保自身生长、发育、分化等对基因表达按“预定”和“有序”的程序进行的调控，是不可逆的过程；瞬时调控是指真核生物在内、外环境的刺激下所做出的适应性转录调控，是可逆过程。
体外培养的概念
中文名称体外培养英文名称in vitro culture定 义将活体结构成分（如活体组织、活体细胞、活体器官等）甚至活的个体从体内或其寄生体内取出，置于类似于体内生存环境的体外环境中生长和发育的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
逆转录的特点和过程
以RNA链为模板，经逆转录酶（即依赖于RNA的DNA聚合酶）催化合成DNA链，叫做逆转录。这种机制在RNA肿瘤病毒中首先发现。RNA聚合酶是以DNA为模板的RNA聚合酶，也称转录酶。原核生物的RNA聚合酶分子量很大，通常由5个亚基组成；两个α亚基，β，β′和σ，可写作α2ββ′σ。含有5个亚基的酶叫
克隆化基因的体外转录和翻译实验
DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，因此DNA克隆又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。实验材料DNA试剂、试剂盒TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶缓冲液异丁醇NaOHTCA仪
克隆化基因的体外转录和翻译实验
基本方案 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
克隆化基因的体外转录和翻译实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶缓冲液异丁醇NaOHTCA仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1. 亚克隆编码蛋白质的目的DNA片段于质粒载体的SP6或T7启动子的下游。 2. 通过CsCl/溴化乙锭离心或PEG沉淀制备质粒DNA。 3. 用位点在终止密码子的立即下游
转录物的概念
中文名称转录物英文名称transcript定 义在DNA模板上由RNA聚合酶催化转录生成的mRNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
关于体外转录的基本介绍
转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该技术被称为体外转录。
体外转录siRNAs的技术特点
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的
配子发生的概念和过程
配子形成的过程称为配子发生。配子分为雄配子（male gamete）和雌配子（female gamete）,动物和植物的雌配子通常称为卵（ova,或egg）,而将雄配子称为精子（sperm）。精子相当小，但能够运动，而卵细胞体积相当大，并且是不可游动的，如海胆的卵细胞是精细胞的10,000倍。尽管雌
初生代谢的概念和过程
合成糖类，氨基酸类,普通的脂肪酸类，核酸类以及由它们形成的聚合物(多糖类、蛋白质类、RNA、DNA等等)。这些对生物生存和健康必需的化合物就叫初生代谢产物(Primary metabolites)。初生代谢过程是指微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动的物质和能量的过
细胞移动的概念和过程
主要是指高等脊椎动物细胞从一个地方向另一个地方转移。一般是用培养的动物细胞观察细胞的移动。细胞移动可以分为三个过程∶首先是细胞前缘的扩展(extension)，这一步是由肌动蛋白的聚合作用引起的；第二是扩展的前缘通过粘着斑的形成附着到基底(substratum)；第三是通过胞质溶胶向前流动和细胞尾部
ATP循环的概念和过程
ATP作为细胞内放能与吸能反应的主要中间媒介物，在各种生命活动及代谢过程中直接或间接起供能作用。ATP为腺苷三磷酸，3个磷酸之间有2个磷酸酯键。当ATP水解成ADP时释放的能量比一般磷酸酯键水解时释放出的能量多得多，因而可以使需要加入自由能的吸能反应得以进行。而ADP与无机磷酸盐又可利用生物氧化时释
初生代谢的概念和过程
合成糖类，氨基酸类,普通的脂肪酸类，核酸类以及由它们形成的聚合物(多糖类、蛋白质类、RNA、DNA等等)。这些对生物生存和健康必需的化合物就叫初生代谢产物(Primary metabolites)。初生代谢过程是指微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动的物质和能量的过
同源重组的概念和过程
同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(non-sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
转录的过程介绍
在转录过程中，DNA模板被转录方向是从3′端向5′端；RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的合成一般分两步，第一步合成原始转录产物（过程包括转录的启动、延伸和终止）；第二步转录产物的后加工，使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工
体外转录合成siRNAs的方法特点
以DNA Oligo为模版，通过体外转录合成siRNAs，成本相对化学合成法而言比较低，而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制，虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs，但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比，还是需要占用研究人员相当的
关于体外转录的操作步骤介绍
1. 提取cDNA质粒； 2. 线性化质粒：（利用单一的酶切位点线性化有利于转录） 3. 纯化质粒：（尽量避免RNase污染） ① 加等体积的Tris-苯酚：氯仿（1:1）到100μL限制内切酶消化体系，涡旋振荡20s, 13000g离心5min； ②上清转移，加入2倍体积无水乙醇和1/10
甲基化的概念和过程
甲基化，是指从活性甲基化合物上将甲基催化转移到其他化合物的过程，可形成各种甲基化合物，或是对某些蛋白质或核酸等进行化学修饰形成甲基化产物。在生物系统内，甲基化是经酶催化的，这种甲基化涉及重金属修饰、基因表达的调控、蛋白质功能的调节以及核糖核酸加工。
精子发生的过程和概念
精子在睾丸的曲细精管（ seminiferous tubules ）中产生。睾丸的各个组成部分以及整体的功能都受到下丘脑 - 脑垂体内分泌腺体的影响。另外，睾丸局部的自分泌、旁分泌调节机制在睾丸的生精功能调控中也起到重要的作用。
细胞衰老的概念和过程介绍
细胞衰老（cell aging）是指细胞在执行生命活动过程中，随着时间的推移，细胞增殖与分化能力和生理功能逐渐发生衰退的变化过程。细胞的生命历程都要经过未分化、分化、生长、成熟、衰老和死亡几个阶段。衰老死亡的细胞被机体的免疫系统清除，同时新生的细胞也不断从相应的组织器官生成，以弥补衰老死亡的细胞。细
速率分离过程的概念和原理
在某种推动力（浓度差、压力差、温度差、电位差等）的作用下，利用被分离组分在均相中的传递速率差异而实现组分的分离称为速率分离过程。这类过程所处理的原料和产品通常属于同一相态。仅有组成上的差别，例如利用溶液中分子、离子等粒子的迁移速率和扩散速率等的不同来进行分离。如图1所示为典型的速率分离过程，如：渗透
胚胎发生的概念和过程
胚胎发生（embryoyeny） 为生物界胚胎形成过程的综合术语，多用于动物，但在植物，一般对苔类以上（有胚植物）的植物，表示从子房胚囊内的单细胞受精卵发育为一个多细胞胚胎的过程，其受精卵的生长和分化过程与孢子有显著差异者也使用这个术语。有时，也扩大使用于整个植物合子以后的生长、分化（C．W．War
细胞周期的概念和过程
细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程。细胞周期通常分为两个主要阶段：间期和分裂期（M 期）。间期包括 G1 期（Gap 1，DNA 合成前期）、S 期（Synthesis，DNA 合成期）和 G2 期（Gap 2，DNA 合成后期）。G1 期：细胞体积增大，进行各种物质和