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报告基因分类及优缺点

报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件:(1)全序列已测定(2)表达产物在手提细胞中不存在,即无背景,在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物(3)其表达产物能够进行定量测定报告基因的种类很多,根据对其表达产物的分析检测方法的不同,可将其分为体外报告基因和体内报告基因。前者的分析需要在含有报告分子的细胞裂解液或细胞、组织培养液(分泌型报告基因)中进行报告分子的定量。较典型的有氯霉素乙酰基转移酶基因(CAT)、人生长激素基因(hGH)及分泌型碱性磷酸酶基因(SEAP)等。后者的分析可以在活的细胞或组织中,或在已经组化固定的组织或细胞中进行。较典型的如绿色荧光蛋白基因(GFP)。而β-半乳糖苷酶基因(β-Gal)和萤火虫荧光素酶基因既可以在......阅读全文

双荧光素酶报告基因测试

在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因

基因检测能成为必需品吗?

  目前越来越多的媒体已经开始重新炒作基因检测,很多人感觉到消费和资本市场对于基因检测的关注度越来越高。果真是基因检测市场的春天到来了吗?这一波热潮过后,基因检测能成为必需品吗?在这个系列里面,我会从“基因检测的瓶颈”、“基因检测的模式创新”、“你看的懂基因检测报告吗?”、“哪个行业会被基因检测颠覆

知识分享:教你辨析标记基因和报告基因

  一、标记基因和报告基因的概念   标记基因(marker gene),是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称,是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性,或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件

辨析标记基因和报告基因教程

一、标记基因和报告基因的概念 标记基因(marker gene),是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称,是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性,或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件下,非转化的细

分子影像学与干细胞移植活体示踪的研究进展

  作者:冯铭 王任直 作者单位:中国医学科学院-中国协和医科大学北京协和医院神经外科, 北京 100730   【摘要】 近年来,干细胞在神经系统疾病、血液病和心脏疾病治疗中获得广泛应用。干细胞移植后,活体示踪干细胞的存活和迁徙具有重要意义。分子影像学技术的发展使干细胞活体示踪成为可能,光学成

分子影像学与干细胞移植活体示踪的研究进展

【摘要】  近年来,干细胞在神经系统疾病、血液病和心脏疾病治疗中获得广泛应用。干细胞移植后,活体示踪干细胞的存活和迁徙具有重要意义。分子影像学技术的发展使干细胞活体示踪成为可能,光学成像、磁共振成像、单光子发射计算机断层显像、正电子发射计算机断层显像是临床和实验中常用的分子影像学方法,

报告基因检测概述

报告基因检测是功能基因组学研究的一个重要手段,在真核基因表达调控研究和相关药物或蛋白筛选工作中,有广泛的应用。报告基因检测系统,是把顺式调控元件(即DNA非编码序列)与某一种非常容易被鉴定的蛋白(即报告基因产物)的编码序列连接起来,通过测定该报告基因在细胞内的表达产物的量或活性,来判断顺式调控元件的

基因的转移与重组体的筛选和鉴定-4

(3)插入表达筛选法与插入失活相反,插入表达法是外源目的基因插入特定载体后,能激活用于筛选操作的标记基因的表达,由此进行转化子的筛选。设计载体时,在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列,插入外源DNA将使该负调控序列失活,其下游的筛选标记基因才能表达。例如质粒pTR262有一个负调控的c

全面剖析:基因检测进入消费级市场的关键点

  目前越来越多的媒体开始重新炒作基因检测,很多人感觉消费和资本市场对基因检测的关注度越来越高。果真是基因检测市场的春天到来了吗?这一波热潮过后,基因检测能成为必需品吗?下面我从基因检测的瓶颈、模式创新和数据解读等方面和大家探讨一下基因检测成为必需品的关键转折点。  基因检测自身的三大瓶颈影响消费市

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

生物发光技术在生命科学中的应用

  随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。   1 生物发光的特点   根据产生光子的

酵母双杂交检测的原理及应用

检测原理:酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid assay)是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,常用的如GAL4为基础的系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录激活后的蛋白相互作用。某些转录因子(如GAL4)由两个可以分开,功能上相互独立的结构域组成,N端有一个147个氨

基因捕获技术: 创建人类单倍体细胞库

  日前,使用名为“基因捕获”(gene trap)的技术,奥地利的研究人员建立了一个人类单倍体细胞库,这个细胞库汇集了3000 多种细胞系,每个细胞系都具有一种不同的突变基因。相关的研究论文发表在8月25日的Nature Methods杂志上。渥太华大学教授William Stanford

荧光素酶的种类以及应用

在细胞和基因的微观世界中研究探索,遗传报告基因是非常有用的"可视化和量化"工具,具有广泛的应用。荧光素酶(萤光素酶)以出色的灵敏度、使用方便、可以定量检测而成为理想的报告基因。荧光素酶不是特定的分子,是一类中能催化产生生物发光的酶的统称,不同来源的荧光素酶各有特点,可催化底物发出

生物发光技术在生命科学中的应用(一)

随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。1 生物发光的特点根据产生光子的能量来源不同,发光可

生物领域新兴职业: 遗传基因咨询师

  当本人第一次听说这个名字的时候,着实迷糊了一会,这是什么职业?作为生物界的一员,貌似没有听说过这个新兴的职业,不过它确实是近几年来兴起的一项新职业,也是生科学生未来可以考虑有所发展的岗位。   基因检测催生遗传信息咨询产业化   人为什么要对自己的基因组测序?通过了解房子的结构,我们能预测它

Cell子刊:关键因子表达机制受挑战

  在胚胎干细胞的自我更新中,转录因子Nanog具有关键性的作用,这一因子也一直是近年来研究的热点。现在,Whitehead研究所的科学家们发现,绝大多数胚胎干细胞同时表达Nanog的两个等位基因,其表达动态与其它多能性因子类似,这一发现挑战了之前盛行的理论。文章发表在本周的Cell Stem

荧光素酶的作用原理及应用

荧光素酶(luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达,是检测转录因子与目的基因

酵母双杂交系统的实验步骤

酵母双杂交系统的实验步骤 1. 将报告基因p8op-LacZ转化酵母EGY48菌株,用培养基SD/-Ura筛选。2. 同时构建DNA文库,并纯化足够的质粒以转化酵母细胞。3. 构建DNA-BD/靶蛋白质粒pLexA-X,作为钓饵(bait)。4. 将

临床基因检验诊断报告模式专家共识

  临床基因检验已覆盖了肿瘤、遗传病、血液病、感染性疾病、神经精神性疾病、器官移植、出生缺陷、个体化药物治疗等多个领域[1,2,3,4,5,6,7,8],临床基因检验诊断报告对机体易感性评估、疾病诊断、预后、治疗监测、遗传咨询、健康管理以及家庭生育计划制定等均具有重要的参考价值。因此,临床基因检验诊

瞬时转染分析法

摘要: 介绍5种瞬时转染分析法:瞬时转染分析法、稳定转染分析法、体外转录分析法、转基因分析法和同源重组分析法. 1.瞬时转染分析法 目前有很多功能性分析方法用于研究转录调控,最常用的方法是瞬时转染分析法.该方法是通过一定的转染程序将含目的调控区

荧光素酶的作用原理及应用

荧光素酶(luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达,是检测转录因子与目的基因

Nature:合成生物学,细胞内的精准时钟

  活细胞通过分子组件来跟踪时间,尽管这些分子组件极易受到不可避免的随机波动影响,但活细胞对时间的追踪非常精确。例如,单细胞蓝细菌中,自然昼夜钟可以追踪一天24小时。这些生物时钟的准确性经过了进化的考验,可以被认为是生物学家Richard Dawkin形容的“盲眼钟表匠”的杰作——Dawkins用这

LexA酵母双杂交系统的设计原理

 LexA酵母双杂交系统的设计原理 报告质粒p8op-LacZ的GAL4 UAS编码序列被完全去除,因此在缺乏LexA融合激活剂的情况下,报告基因LacZ的转录活性为零,该基因的筛选标志为URA3,可以作为有自主复制能力的质粒存在于酵母EGY48菌株中,也可以被整合到EGY48基

中国农大特聘教授发表CRISPR文章

  2015年12月10日,中国农业大学特聘教授韩建永带领的研究小组,以Letter的形式在《Protein & Cell》杂志上发表题为“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRI

中国农大特聘教授发表CRISPR文章

  2015年12月10日,中国农业大学特聘教授韩建永带领的研究小组,以Letter的形式在《Protein & Cell》杂志上发表题为“Highly efficient generation of biallelic reporter gene knock-in mice via CRI

报告基因的应用

实验概要报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物-荧光素酶敏感性高,测定方法快速且宜于掌握,线性好,并且荧光素

报告基因(report gene)的应用

报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物-荧光素酶敏感性高,测定方法快速且宜于掌握,线性好,并且荧光素酶产生的

分子影像学在中国的发展历程

在过去的近百年里, 医学影像学发展的主要动力来自物理学和计算机科学, 而 21 世纪以来,影像医学影像发展的主要的因素将是基因组学和生物化学。随着人类基因组测序工作的完成以及基因和蛋白质组学等研究的不断深入, 以细胞病理学为基础的现代医学正逐步向分子医学方向发展。而作为连接分子生物学与临床医

说说转基因植物“那点事儿”

设想,你要把一台机器,从生产厂里运输到需要这台机器的工厂里,并让它顺利工作,要通过几个步骤呢?首先呢,我们要先把这台机器生产出来,然后打包,装到汽车上并运输到目的工厂内,安装机器,最后经过一系列调试,才能让工厂使用这台新机器进行新产品的生产。和这一过程相似,生产转基因植物,也需要上面一系列步骤。在一