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白话胶体金系列——第一话<烧金>(二)

3.电镜:直观,能看到颗粒形状是否规则,大小是否均一,有无聚集等情况,设备成本高,我没做过,没啥好说的。4.粒径分析仪:可以看出粒径大小和CV,可以通过PDI判断金子是否聚集,比分光光度计有用,比电镜实惠,但是价格也不便宜。第一话——烧金(一)基本概念:1.金子大小:常用20、40、60nm的胶体金颗粒(粒径大小),另外,在说金子大小的时候,有些人还用λ525、530表示,这个是指胶体金最大吸收峰位置,理论上这个值比说40nm要准确,因为40nm是估的,这个是实实在在测的,但是他与颗粒大小仅仅有“一定的“关系,而且这个”一定的“很不一定。其他要说明的是,颗粒越小,颜色越粉嫩(偏粉红),最终显色越弱,特异性相对越好;相反颗粒越大,颜色越老土(偏紫,但70nm以上就真的土了,有点泥巴色了),显色越强,特异性相对越差。2.金子浓度:万分之一、万分之二、万分之四等等,指烧金时溶液中氯金酸的浓度。由于反应非常迅速,浓度越高,金子质量越不容......阅读全文

白话胶体金系列——第一话<烧金> (二)

3.电镜:直观,能看到颗粒形状是否规则,大小是否均一,有无聚集等情况,设备成本高,我没做过,没啥好说的。4.粒径分析仪:可以看出粒径大小和CV,可以通过PDI判断金子是否聚集,比分光光度计有用,比电镜实惠,但是价格也不便宜。第一话——烧金(一)基本概念:1.金子大小:常用20、40、60nm的胶体金

白话胶体金系列——第一话<烧金> (一)

01基本概念1.金子大小:常用20、40、60nm的胶体金颗粒(粒径大小),另外,在说金子大小的时候,有些人还用λ525、530表示,这个是指胶体金最大吸收峰位置,理论上这个值比说40nm要准确,因为40nm是估的,这个是实实在在测的,但是他与颗粒大小仅仅有“一定的“关系,而且这个”一定的“很不一定

白话胶体金系列——第二话<标记>中篇

(二)操作上面大篇幅都围绕Ph展开,因此不难想象Ph是标记优化的一个关键点,总结起来就4个字——高效、稳定。很多流程里,摸索最佳Ph都是优化标记的第一步,但是如果大家对第一话《烧金》的内容还有印象的话,那么标记的第一步首先应该是找到合适的容器,因为胶体金有洁癖。1.容器:推荐用清洗过的西林瓶(玻璃瓶

白话胶体金系列——第二话<标记>上篇

(一)基本概念为了方便新人与老司机交流,需要掌握一些基本名词和概念,以便准确的表述问题。这些知识不考试,写作时间也有限,关键还没有稿费,所以随便写写,没有咬文嚼字,如果意思表达错了请指正,形式上就不用对着教科书抠字眼了,谢谢。1.抗原、抗体,和二抗:抗原(半抗原):能够诱导产生抗体(免疫原性)并且和

白话胶体金系列——第二话<标记>下篇

5)离心纯化:目的有几方面:去除游离蛋白;置换储存液;浓缩。高速离心,本身是一个加速破坏的过程,所以离心需要平衡两点,“上清干净”和“无不溶颗粒”,这两个矛盾的问题在小量离心时不明显,但是大量离心就讲究了,以下引自涛哥答疑录:“关于金标记物的离心方法,五花八门,各种各样的都有,比如:有人先低速离心,

胶体金

  制备好免疫胶体金后,还需要将其稀释到一定浓度,并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说,特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的,胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布,通常配方为1%Tween20+适量PVA。  介质处理完成后,免疫胶体

胶体金概念

胶体金概念:氯金酸在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态

胶体金(金标)检验法

胶体金是一种常用的标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。免疫胶体金技术的基本原理是:氯金酸 (HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒

什么是胶体金法?为什么叫胶体金法?

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是

什么是胶体金法?为什么叫胶体金法?

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是