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HPLC组成

HPLC由溶剂输送系统(脱气机、高压泵等)、进样系统(定量泵、六通阀、定量环、进样针等)、分离系统(色谱柱等)、检测系统(检测器等)、记录及数据处理系统。高压输液泵:将流动相在高压下连续不断地送入液路系统,具有有足够的压力,输出流量恒定、可调,输出压力平稳,泵室体积小,泵体抗腐蚀、耐酸等特点。压力平稳、流速恒定是HPLC系统稳定、重现性良好的前提条件,多数的HPLC故障、色谱数据异常均会表现出压力异常,如偏高、偏低、波动大等,在日常使用中需要特别关注压力变化。在线脱气机:四元低压系统属于泵前混合,由于在常压下混合,极易产生气泡,必须配有在线脱气机,并要求流动相使用前进行脱气,流动相脱气得目的如下:使色谱泵输液均匀准确,减小脉动。提高保留时间和色谱峰面积的重现性。防止气泡引起尖峰。使基线稳定,提高信噪比。降低溶剂的紫外吸收本底。减少死体积。 防止填料氧化。进样系统:分为手动进样系统和自动进样系统, 主要由定量环、六通阀、......阅读全文

分配色谱

分配色谱(partition chromatography)原理: 主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同(分配作用)而实现分离的液相色谱分离模式。键合固定相: 分配色谱原本是基于样品分子在包覆于惰性载体(基质)上的固定相液体和流动相液体之间的分配平衡的色谱方法,因此也称液-液分

用于分析脂溶性维生素的高效方法

测定脂溶性维生素可能是耗时的,但它不一定是。通过智能样品制备策略和正确的技术,脂溶性维生素可以通过多种方法有效检测和测量。这里的关键是固相萃取(SPE)。 我们依靠吸收某些有机化合物,因为我们的有机体需要它们生存,但无法自我形成。除了少数例外,维生素是我们必需的物质之一。为了满足建议的日常需求,

一种新型固相萃取技术——固相微萃取

摘  要  固相微萃取技术是90年代初新发展起来的集采样、萃取、浓集、进样于一体的分析技术,具有操作简单易行,不必使用大量有机溶剂,且易实现自动化等优点。本文对该技术的实验方法、原理及其在药物分析、环境保护等领城中的应用进行了综述。关键词  固相微萃取 

高性能液体色谱系统介绍(一)

什么是HPLC?    我们所有关于配件的讨论.看起来似乎只适用于HPLC系统一使用我们所讨论的配件进行的主要液体传输应用。    HPLC是高性能液体色谱系统(High Performance LiquidChromatography)的

微柱液相色谱法的优点和缺点

 色谱柱由常规柱转为微柱后,随着柱内径的减少,液相色谱法分析呈现出以下一些优点:  1 可分析极少量的样品,特别适用于分析贵重样品和从活体采集具有生物活性的样品。  2 色谱柱中填充固定相的用量大大缩减,仅为常规的液相色谱仪的1%~10%,简化了填充

如何选择高效液相色谱用溶剂

  高效液相色谱用溶剂分为流动相用溶剂和空白溶剂。选择的溶剂一般应具有低粘度、高纯度、化学稳定性好对样品有合适的极性和良好的选择性、与检测器兼容性强、低毒等特征。  流动相溶剂的选择没有一定的模式,更多的来源于经验的积累,但溶剂的极性和理化性质可以作为重要的选择依据。流动相所用溶剂一般为二元或多元溶

你是否正走在购买HPLC系统的路上?

  分析测试百科网讯 高效液相色谱(HPLC)是很多科学家必不可少的科研工具。HPLC可用于多种化学和生物化学的分离、鉴定、纯化和定量分析,由泵、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统组成。  那么如何购买到称心如意的HPLC系统?购买HPLC需要注意什么?国外有人在使用HPLC系统人群中做了这样一份

关于色谱峰面积

  在色谱定量分析中,选用峰高法还是选用峰面积法呢?这主要取决于在检测器的线性范围内,峰高和峰面积测量的准确性与重复性。除了归一化法最好用峰面积法外,其他三种定量方法中峰高和峰面积都可用作精确的定量方法。  如何准确测量峰高与峰面积  在检测器的线性范围内,峰高和峰面积测量的准确性受色谱分离度的影响

液相色谱在液相检验中的应用方法

    液相色谱法是一种以液体为流动相的色谱法,液相色谱法是现在应用十分广泛的一种液相色谱法,这种方法是20世纪60年代兴起的,经过不断的完善和发展,现已被应用于各个领域。在医药分析领域,液相检验的应用已经普及,而液相色谱法作为液相检验中的一种重要手段,也得到了大力的推

HPLC泵、柱、检测器三者的关系的认识和目前使用者普遍存...

HPLC泵、柱、检测器三者的关系的认识和目前使用者普遍存在的问题  目前很多研发、使用HPLC的科技工作者,没有搞清楚或没有完全搞清楚HPLC中的泵、柱、检测器三者的关系。国内外很多生产厂商只是生产泵、检测器,色谱柱子都是外购件。我们说HPLC是一个系统,是指泵、柱、检测器三者组成的一个完整的系统。

方案5 利用 Nano-LC 耦联 MS/MS 分析复杂蛋白质混合物实验

实验材料蛋白分部收集物试剂、试剂盒乙腈(HPLC级)乙 腈(5%) 5%甲酸HPLC 溶液甲醇(HPLC级)仪器、耗材酒精灯二元泵或四元泵C18反相层析填料C18固相抽提移液吸头陶瓷划片熔融石英毛细管金线有刻度的玻璃毛细管带压力计的氦气罐高效液相色谱系统激光拉针器Nano-LC 离子源PEEK 微型

液相色谱仪与气相色谱的区别

 液相色谱仪通过组织器模块对各单元部件进行供电、自动分配IP地址,实现整机联网操作,操作方便、运行稳定、结果准确。  自动进样器、溶剂管理器、紫外-可见可变波长检测器、二极管阵列检测器、激光诱导荧光检测器、示差折光检测器,以及蒸发光散射检测器等配置,满足复杂样品体系的液相色谱分析,广泛用于食品、医药

液相色谱仪与气相色谱的区别

  液相色谱仪通过组织器模块对各单元部件进行供电、自动分配IP地址,实现整机联网操作,操作方便、运行稳定、结果准确。  自动进样器、溶剂管理器、紫外-可见可变波长检测器、二极管阵列检测器、激光诱导荧光检测器、示差折光检测器,以及蒸发光散射检测器等配置,满足复杂样品体系的液相色谱分析,广泛用于食品、医

经典的液相色谱的显著特点有哪些

  液相色谱法(HPLC)具有高压、、高速、高灵敏度、高选择性等特点,广泛应用于医药、环保、石化、食品、化工等行业,是现在分离分析的重要方法   1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。   2、:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到佳分离

经典的液相色谱的显著特点有哪些

液相色谱法(HPLC)具有高压、、高速、高灵敏度、高选择性等特点,广泛应用于医药、环保、石化、食品、化工等行业,是现在分离分析的重要方法1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。2、:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到佳分离效果,比工业精馏塔和

HPLC中液相联质谱法与液相色谱法有什么区别?

HPLC中液相联质谱法与液相色谱法有什么区别;HPLC系统由两个功能组成:一个是分离,另一个是检测。所谓的液相色谱质谱仪,MS也用作检测器,当然一般是在紫外检测器(包括DAD)之后串联连接。因为MS比较昂贵,所以它比普通的HPLC机器贵得多,而且它的功能也很好。因此,它也是一种HPLC系统。MSD有

微量固相萃取技术(MEPS)的装置、形式、应用

据统计,在大部分的仪器分析实验室中,将一个原始样品处理成可直接用于仪器分析测定的样品状态,所消耗的时间约占整个分析时间的60-70%。在各种样品前处理方法中,目前各种无(少)溶剂的绿色样品处理技术成为仪器分析主要的前处理方法。当然近年最具吸引力的技术是固相微萃取(SPME),它是从固相萃取(SPE)

分析高效液相色谱技术在食品检测中的运用

  [摘 要]我国社会和经济的发展进步带动科学技术水平的不断提高,人们的生活质量也有着大幅的提升。这种现状促使人们对于物质的需求量在不断上涨,对食品安全也有了非常深入的认识,进而对食品安全性提出了更高的要求。在进行食品检测的过程中,运用高效液相色谱技术能够提高检测的准确性,并且其对于食品检测有着非常

固相微萃取-液相色谱联用技术研究进展(三)

联用技术的应用情况作一简单的介绍。SPME-HPLC 联用技术在环境样品分析中的应用环境样品分析是SPME-HPLC 联用技术最早也是应用最多的领域。目前SPME-HPLC 联用技术测定的物质主要包括多环芳烃[2 ,6 ,14 ,23 ,24 ] 、酚类化合物[25 —27 ] 、芳胺化合物

重组人胰岛素的制备—下游纯化工艺的研究(一)

摘要 建立了一套通过大肠杆菌表达(H is) 62A rg2A rg2人胰岛素原[ (H is) 62A rg2A rg2human p ro insulin,RRhP I]制备重组人胰岛素的工艺。将大肠杆菌中以包涵体形式表达的RRhP I 依次经过DEA E2琼脂糖快流速阴离子交换层析, Se

高效液相HPLC溶剂的选择及使用(二)

2、溶剂的处理和更换 液相色谱溶剂应尽量使用HPLC级溶剂。HPLC级试剂是用特殊方法生产的含有最少的微粒和最低的紫外吸收物质。水也应达到HPLC级。液相色谱实验室应配有纯水发生器。非色谱纯溶剂可通过蒸馏方法进行提纯,除掉大部分有紫外吸收的杂质。另外,用氧化铝或硅胶柱可除去极性强的化合物。

HPLC四大常见故障及解决方法(一)

  高效液相色谱作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确方式操作的话,就容易导致一些棘手的小问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。作为菜鸟的你,面对故障的色谱仪,还hold住吗?   【高效液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器

药物浓度测定常用技术

(一)光谱法 多数药物或代谢物本身在紫外光区即存在吸收峰,一些药物或代谢物受激发后,本身即可发射荧光;而另外一些药物还可通过特异的显色反应用分光法检测。但无论可见光分光光度法、紫外光度法还是荧光光度法,用于体液中药物检测时,都存在灵敏度低、特异性差的缺点,特别是易受代谢物干扰。虽然采用提取、双

药物浓度测定常用技术

药物浓度测定常用技术是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的生化检验知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助!(一)光谱法多数药物或代谢物本身在紫外光区即存在吸收峰,一些药物或代谢物受激发后,本身即可发射荧光;而另外一些药物还可通过特异的显色反应用分光法检测。但无

4个HPLC谱图异常的常见问题及解决方案

  液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。  问题一:基线漂移  原因主要有:  1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检

番茄中类胡萝卜素研究 SERS比HPLC更可靠

  德国的一项研究表明,表面增强拉曼光谱(SERS)在食物中类胡萝卜素和其他微量营养素研究方面是一个比HPLC更加可靠的工具。  抗氧化剂对人体健康的确切益处目前正在讨论中,特别是膳食补充剂,它目前仍然是我们吃的水果和蔬菜中似乎对生理指标有积极的影响彩色色素。在番茄中发现的红色的

基线漂移原因分析及解决办法

原因: ①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) ③流通池被污染或有气体; ④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生

HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析

  高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法,这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题,如何解决这些问题呢?  1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,

液相色谱基线漂移

  为何会基线漂移  1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器)  2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移)  3、流通池被污染或有气体。  4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破

液相常见问题15小问!

关于漂移问题①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定②流动相发生変化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题①流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定②泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。③流动相不合适,解