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免疫印迹与免疫检测实验——第二抗体欧联物进行免疫检测

实验材料蛋白质试剂、试剂盒封闭缓冲液TTBS缓冲液第一抗体TBS缓冲液仪器、耗材手套摇床实验步骤1. 将膜放入可热密封的塑料袋,加5 ml 封闭液,密封塑料袋,在旋转摇床或摆动平台中摇动30~60 min。 2. 用封闭液稀释第一抗体(取决于抗体和检测系统,以1:10~1:100 000稀释)。3. 打开袋子,倾去封阻液,以稀释的第一抗体工倾代替之。在室温下持续摇动30~60 min。4. 带着手套从塑料袋子中取出膜,放在塑料盒子中摇动着用200 ml TTBS(硝酸纤维素膜或PVDF膜)或TBS(尼龙膜)洗4次,每次10~15 min。5. 用封闭液稀释HRPO或AP抗Ig抗体偶联物。 6. 将膜放进一新的可密封塑料袋子,加入稀释的HRPO抗Ig抗体偶联物。在室温持续揺动30~60 min。7. 从塑料袋中取出膜,并按步骤4......阅读全文

免疫印迹与免疫检测实验——第二抗体欧联物进行免疫检测

实验材料蛋白质试剂、试剂盒封闭缓冲液TTBS缓冲液第一抗体TBS缓冲液仪器、耗材手套摇床实验步骤1.  将膜放入可热密封的塑料袋,加5 ml 封闭液,密封塑料袋,在旋转摇床或摆动平台中摇动30~60 min。 2.  用封闭液稀释第一抗体(取决于抗体和检测系统,以1:10~1:100 000稀释)。

免疫印迹与免疫检测

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 转移缓冲液仪器、耗材 摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤 1.  制备抗原样品,并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白,在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2.  电泳完成后,拆卸凝胶夹层,去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 m

免疫印迹与免疫检测实验——发光底物显迹

实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris缓冲液发光底物显迹液PBS磷酸盐仪器、耗材保鲜膜摇床实验步骤1.  用50 ml 底物缓冲液洗膜两次以平衡膜,每次15 min。 2.  对于使用硝酸纤维素膜或PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应:膜置于Nitro-Block溶液中5 min,然后以50 ml 底物缓冲液

免疫印迹与免疫检测实验——发色底物显迹

实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒 Tris缓冲液发色底物显迹液PBS磷酸盐 仪器、耗材 摇床 实验步骤 1.  在室温以PBS洗膜15 min 以去除过量的磷酸盐和Tween 20。 2.  将膜放入发色底物显迹液,条带应在10~30 min 内出现

免疫印迹与免疫检测实验——亲和素-生物素偶联

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TTBS缓冲液TBS缓冲液过氧化物酶碱性磷酸酶仪器、耗材摇床硝酸纤维素膜尼龙膜实验步骤1.  在旋转摇床或摆动平台中持续摇动使膜与合适的封闭液平衡。对于硝酸纤维素膜或PVDF膜,需在室温封闭30~60 min。尼龙膜则需在37℃封闭2 h。2.  用TTBS溶液(用于硝酸纤

免疫印迹与免疫检测实验——转移槽转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤1.  制备抗原样品,并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白,在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2.  电泳完成后,拆卸凝胶夹层,去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 min。3

酶联免疫检测仪

  为保证测量数据的准确可靠,开机后应预热15分钟以上。   1.波长设定   在开机或复位状态下,按屏幕提示操作即可。波长一经设定好,则全部功能均为在该波长下的操作。显示波长应与仪器上安装的滤光片波长相一致。   2.手动测量   该功能只测样品的吸光度值,按一次测量键显示一个OD值,不打

酶联免疫检测仪定义

  酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量. ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250u l以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求.

酶联免疫检测仪—酶标仪

  实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构  和光电比色计基本相同.  光源灯发出的光波经过滤光片或单色器  变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透  过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信

酶联免疫检测仪结构

  规格有40孔板,55孔板,97孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相