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Orangu™计数法Orangu™ solution（Cell Guidance，货号：OR01-500）是一种无细胞毒性、高灵敏度、比色法，用于测定细胞增殖和细胞毒性的细胞活性试剂。利用WST-8（细胞代谢的一种水溶性的四唑盐）在细胞内线粒体脱氢酶作为电子介质的情况下，它被还原为橙色的甲瓒染料，且产生甲瓒染料的数量与活细胞的数量和培养时间成正比。操作简单快速，结果可重复。......阅读全文
Orangu™计数法 Orangu™ solution（Cell Guidance，货号：OR01-500）是一种无细胞毒性、高灵敏度、比色法，用于测定细胞增殖和细胞毒性的细胞活性试剂。利用WST-8（细胞代谢的一种水溶性的四唑盐）在细胞内线粒体脱氢酶作为电子介质的情况下，它被还原为橙色的甲瓒染
台盼蓝（Trypan Blue）计数法 台盼蓝（BI，货号：03-102-1B）是一种蓝色细胞活性染料，无法通过结构完整的细胞膜进入细胞内部；但细胞死后，丧失细胞膜稳定性，台盼蓝会进入细胞将细胞染成蓝色，因此在细胞实验中，常规地搭配自动细胞计数仪或血球计数板，应用于分辨活细胞和死细胞、及检测细胞
ATP发光法 ATP是细胞的能量直接来源，ATP发光法是通过检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素（Luciferin）与荧光素酶（Luciferase），以细胞内含的ATP为能量来源，发生氧化反应产生生物冷光，因此可通过监测冷光光度，来对应ATP含量并判断细胞
1、如果靶细胞是帖壁细胞，在细胞因子作用适当时间后，用生理盐水洗去死亡细胞，用0.25％胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打，使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。 2、如果靶细胞是悬浮细胞，则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞，活细胞可以排除进入细胞
直接计数细胞 1．如果靶细胞是帖壁细胞，在细胞因子作用适当时间后，用生理盐水洗去死亡细胞，用0.25％胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打，使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。 2．如果靶细胞是悬浮细胞，则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞，活细胞
实验步骤 展开
一、PBMC细胞计数的现状1. 目前，绝大多数的科研工作者仍在使用血球计数板在显微镜下进行手工计数PBMCs；2. 但是显微镜下由于白细胞和红细胞大小非常接近，不能完全区分白细胞和红细胞；3. 通过红细胞的双凹形形态鉴别红细胞，需要经验丰富的操作者，且不停地调焦来鉴别；可想而知要把每个红细胞鉴别出来
五、使用仪器发表文章 Author Date Title Journal Cell Type Cellometer / Applications Mahato, Ram I November 2013 Synthesis and Cha
三、如何精确计数PBMC和活力分析检测通过AOPI染料进行双荧光计数和活力分析，是可以排除红细胞、血小板、细胞碎片等污染的精确计数方法。AO（吖啶橙）和PI（碘化丙啶）是可对DNA染色的细胞核染色试剂。其中AO可以通过完整的细胞膜，嵌入所有细胞（活细胞和死细胞）的细胞核，呈现绿色荧光；PI只能通过不
将细胞放入染色剂中 如果染色剂进入细胞内 则说明细胞死亡 因为活着的细胞的细胞膜有选择透过性 如果细胞死亡 细胞膜将失去其功能特点也就是选择透过性 变成全透性 举个我们曾经做过的题为例子：将2个某植物的种子放到品红溶液中 一段时间后一个种子内仍然不变色 另一个种子被染成红色 说明被染成红色的种子已死