Antpedia LOGO WIKI资讯

生物素亲和素法化学染色有哪些技术呢

生物素即维生素H,是一种碱性蛋白。亲和素具有4个与生物素亲和力极高的结合位点。能够彼此牢固结合而不影响彼此的生物学活性。常用的技术类型有: (一)亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC) 原理:亲和素与酶标生物素结合,形成可溶性亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)。其与生物素化抗体(直接法)或生物素化第二抗体(间接法)相遇时,ABC中未饱和的亲和素结合部位即可与抗体上的生物素结合。 优点:敏感性高、亲和力强、特异性高、抗体工作浓度低、操作时间短、可以多重标记等。 (二)桥联亲和素-生物素技术(BRAB技术) 以游离的亲和素作为桥联剂,将检测反应体系中抗原、生物素化抗体复合物与标记生物素(如酶标生物素)联结起来,达到检测反应分子的目的。 (三)标记亲和素-生物素技术(LAB技术) 以标记亲和素直接与免疫复合物中的生物素化抗体连接进行检测。该法具有相当高的灵敏度。 间接LAB法采用的是生物素化的第二抗......阅读全文

生物素-亲和素法化学染色有哪些技术呢

  生物素即维生素H,是一种碱性蛋白。亲和素具有4个与生物素亲和力极高的结合位点。能够彼此牢固结合而不影响彼此的生物学活性。常用的技术类型有:  (一)亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC)  原理:亲和素与酶标生物素结合,形成可溶性亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)。其与生物素化抗

生物素-亲和素系统介绍

生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素(biotin,B)

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验

检测未知抗原 检测未知抗体             实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验——检测未知抗原

实验方法原理亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原(

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验——检测未知抗体

实验方法原理包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释,于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗涤缓冲液洗3次,每次3 min。 加样:加适当稀释的待检样品(未知抗体)于反应孔中,同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1

生物素-亲和素系统的基本类型及原理

基本类型有两种,一类以游离亲和素为中间物,分别连接包含生物素大分子的待检反应体系和标记生物素,称为BAB法;后来又在此基础上发展了亲和素-生物素化酶复合物技术(ABC)。另一类是直接用标记亲和素连接生物素化大分子反应体系进行检测的BA法,或称标记亲和素-生物素法(LAB)。此外,依据待检反应体系中所

生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BAS-ELISA)

生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放

免疫印迹与免疫检测实验——亲和素-生物素偶联

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TTBS缓冲液TBS缓冲液过氧化物酶碱性磷酸酶仪器、耗材摇床硝酸纤维素膜尼龙膜实验步骤1.  在旋转摇床或摆动平台中持续摇动使膜与合适的封闭液平衡。对于硝酸纤维素膜或PVDF膜,需在室温封闭30~60 min。尼龙膜则需在37℃封闭2 h。2.  用TT