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免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项

免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项 Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。 虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、抗体问题啦(一抗有问题还是二抗有问题啦)……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗体和抗原的反应不象1+1那么明确,而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物,确实是有一定的不确定性的。所以,严谨的 Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系,对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时,借助参照体系很容易就可以查出问题所在,而不必抓耳挠腮怨天尤人。 良好的参照体系通常包括分子量marker(用来确定蛋白条带对应的分子量大小)、......阅读全文

免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项

Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、

免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项

  免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项   Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。   虽然,顺利的时候Western blot做

Western 免疫印迹

实验概要Western免疫印迹(Western   Blotting)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   B

Western免疫印迹

 Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理    与Southern或Northern杂交方法类

Western免疫印迹(Western Blot)实验原理和主要试剂

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。实验原理与Southern或 Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电

Western 免疫印迹实验原理和操作步骤

[实验原理]Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶

免疫印迹Western bloting实验原理

  免疫印迹Western bloting    这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。

蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )——Western印迹法

实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操

免疫印迹Western bloting实验原理

这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。材料(MATERIALS):o  试剂(R