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Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因： 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性或生理条件下纯化 优化的操作过程，可以直接从培养基中纯化蛋白 与Strep- tag®配合最有效的是6xHistidine-tag，总之推荐一个Tag在蛋白的N-端，另外一个Tag在蛋白的C-端。 纯化全长蛋白： 重组的蛋白在表达时会有部分降解，即使在下游的处理过程中加入蛋白酶抑制剂也无法避免。可溶性降解蛋白仍然带有纯化tag，在纯化时会引起纯化蛋白的不纯（由于有不同长度片段的蛋白混入）。这种问题可以通过在蛋白的另一端加入第二种Tag来解决。经过第二种Tag的纯化，即可获得全长的蛋白。 最高纯度的蛋......阅读全文
浅述蛋白质分离纯化的新技术摘 要： 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术，综和近年来国内外的一些研究结果，结合实际应用的例子，分析了各种分离纯化方法的优点，同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。&nbs
1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a（+）转化表达菌E.coli BL21（DE3），TB培养基中，25℃，AMP 200 ug/ml，摇床（250 r／min）培养至OD600约为1.5，更换等体积新鲜TB培养基，加入IPTG至终浓度1 mM，AMP 200 ug/ml，
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题，包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈，关于包涵体的处理一般包括这么几步：菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化，内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌？ 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎
下村修 做出应获诺贝尔奖工作的科学家，几十年默默无闻； 被广泛应用的分子，很少人知其发现者； 原始论文鲜为人知，后继论文倒很热门； 曾失明的人，发现了美丽的发光蛋白； 低调的父亲，出了高调的儿子。 这里简介一项生物化学研究，讲一个科学家的故事，
3.3 小结 本文的研究结果表明： 中空纤维 750k超滤膜成功的用于狂犬病毒收获液的浓缩和洗滤，膜处理量大于 70L/m2，平均处理速度达 61 LMH，处理时间仅 1.2小时，病毒收率近 100%，浓缩后产品外观澄清度好
做完裂解之后加Triton X－100轻摇３０min，蛋白溶解的会多些！ 四、包涵体的复性 1、包涵体如何复性 包涵体的复性主要有两种方式： 1，稀释溶液，但是操作的液体量大，蛋白稀释 2，透析，超滤或电渗透析去除变性剂 其中透析很适合实验
微阵列技术在单个实验中能同时分析数千个参数。捕获分子微点在固体支持物上固定成行列并暴露在含相应结合分子的样品中。基于荧光、化学发光、质谱、放射性或电化学的读出系统能检测每个微点形成的复合物。这些微小化和平行的结合分析高度灵敏，方法的分析能力又能被微阵列基因表达分析所放大。在这些系统中，检测固定的DN
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到
研究者们在分离到某一基因后，要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达——即：有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期，人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后，认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多，除了要有强启动子
层析方法 1. 用去离子水稀释细菌裂解物至电导率为 35-40mS / cm。稀释取决于样品制备过程中添加的 CaCl2 浓度。2. 将稀释的样品用 0.45μm 过滤器进行过滤。3. 将 20CV 的缓冲液 A1 平衡 DEAE 柱。4.
诺华（Novartis）制药 Wang, Karen（王瑛琪）教授 来自诺华（Novartis）制药的Wang, Karen（王瑛琪）教授，做了题为“Application of Mass Spectrometry in Pharmaceutical Drug Discovery Research
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因： •胰蛋白酶消化过度；•支原体污染；•培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；•细胞老化；•接种细胞起始浓
摘 要： 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记葡萄球菌A蛋白(SPA)，将重组 的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上，制成免疫层析检测试条。 血清中IgG
一、什么是CelCradleTM生物反应器CelCradleTM生物反应器根据潮汐涨落原理设计而成，其中波纹管的压缩和解压可使细胞不断接触培养基的营养与空气，提供了一个低细胞撕裂、无泡沫、高氧气饱和度以及高营养浓度的细胞培养环境。CelCradleTM是用于高密度细胞培养的一款易于使用的经济型台式生
一，蛋白质（包括酶）的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。（一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1
二、蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化方法很多，主要有：（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶
1 微流控技术概述 微流控技术是一种在微米尺寸级别下处理或操纵液体的技术手段，将混合器、执行器、反应器、分离器、传感器等集于一体，从而优化检测过程。其涉及到电子、机械、化学、物理和生物等多门学科，具有通量高、灵敏度高、样本分析时间短、样本量少、可控性强等优势，被广泛应用于现代分析化学、药剂
来自纽约8月3日的消息，Thermo Fisher Scientific这一世界领先的科技公司宣布推出SurePrep™ RNA Purification Kits，这一试剂盒可以从生物样品中捕获所有大小的RNA分子，比如经纯化的全长大分子RNAs，或者是在信号途径中调控基因表达，在细胞死亡，器官发
2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨
蛋白质的分离纯化方法很多，主要有：（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子
芯片毛细管电泳具有进样量少，灵敏度高，分析速度快等特点，非常适合法医DNA-STR的快速检验。毛细管电泳芯片由于尺寸小，可施加较大场强，所以在几秒钟内就可完成对样品的分离，微阵列毛细管电泳芯片可实现高通量检测则成为目前学者研究的热点。2002年Emrich CA等[31]报道的将高通量384孔毛
由中国物理学会质谱分会主办，西北核技术研究所承办的2011年第31届中国质谱学会年会，将于2011年8月6日至8月10日在西安未央湖大酒店召开，会期五天。本届年会的主题是：前沿质谱新方法、新技术及其应用的最新进展。本次年会将邀请知名质谱专家，做高水平的学术报告;并组
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
自然界中硼同位素组成δ11B有非常大的变化范围，是良好的地球化学示踪剂，在海洋酸化、水岩相互作用和壳幔物质循环等方面研究均具有重要应用价值。然而，硅酸盐物质的高精度δ11B分析，受制于化学处理过程中的低回收率和高污染风险，以及质谱测量过程中难以有效控制分馏等原因，到目前一直都是个难题，导致硼同位
太阳能作为一种清洁可持续的绿色能源成为近年来能源转化利用的焦点，已经被广泛应用于光伏发电、光催化及光热转化等领域。其中利用光热转化原理进行海水淡化，是一种低成本、低维护的海水淡化技术。目前的光热转化材料主要有碳基材料、等离激元材料以及半导体材料等，上述材料由于其自身的物理化学稳定性，在高盐雾、高
脂肪酸及其衍生物在能源、化工、材料等工业领域具有广泛的应用前景。近日，中科院青岛生物能源与过程研究所生物基化学品团队咸漠研究员等对生物法制备脂肪酸及其衍生物(脂肪醇、羟基脂肪酸等)作了系列研究，相关成果已发表在Microbial Cell Factories、Bioresource Tech
《Cell Stem Cell》杂志是2007年Cell出版社新增两名新成员之一(另外一个杂志是Cell Host & Microbe)，这一杂志内容涵盖了从最基本的细胞和发育机制到医疗软件临床应用等整个干细胞生物学研究内容。这一杂志特别关注胚胎干细胞、组织特异性和癌症干细胞的最新成
分子蒸馏在精油加工中的应用植物及其提取物自古以来就被人们用来消除疼痛，愈合伤口及杀菌，从而达到治疗和保健的效果[2]。在现代医学尚未成形的17世纪时，人们对植物精油的认识和利用就已经相对发达，当时大约就有60种精油用于香料和医疗领域[3]。l8世纪后，由于有机化学的发展，人们在对植物精油的提取、成份