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接种、分离纯化和培养技术

一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时,需要用到涂布棒.(图3-3)图3-3 接种和分离工具1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 常用的接种方法有以下几种:1)划线接种 这是最常用的接种方法.即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用.常用的接种工具有接种环,接种针等.在斜面接种和平板划线中就常用此法.2)三点接种 在研究霉菌形态时常用此法.此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它......阅读全文

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用

所有形式的亲和层析法都需要两个组分间形成特异性相互作用,通过这种作用可以纯化其中一种组分。免疫亲和层析即利用抗原和抗体的特异性相互作用,是遵循亲和层析原理的一个分类 [综述见 Subramanian(2002)]。事实上,免疫亲和层析是免疫沉淀程序规模放大的拓展应用,不同的部分在于, 层析后需要回收

多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用——免疫亲和层析

实验步骤 一、多羟基反应单克隆抗体 我们最先使用了一类特殊的单克隆抗体, 并将其用于免疫亲和层析。这些抗体可以用于温和的免疫亲和层析, 因为洗脱条件只需要联合使用无离液盐和低分子质量的多羟基化合物 (多元醇),此条件下蛋白质呈非

纯种微生物的分离、转种和培养

实验概要本实验介绍了微生物分离和纯化的基本原理,旨在掌握常用的分离纯化微生物的方法、菌落特征的观察、微生物的几种接种技术、建立无菌操作的概念及无菌操作的基本环节。实验原理从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择

实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。1、用固体培养基分离和纯化 单个微生物在适宜的固体培养基

实验室常用微生物菌种的分离和纯化方法

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。 1、用固体培养基分离和纯化 单个微生物

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

纯种微生物的分离、转种和培养

一、 实验目的 1、了解微生物  分离和纯化的原理;2、掌握常用的分离纯化微生物的方法;3、掌握菌落特征的观察。4、学习掌握微生物的几种接种技术 5、 建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节二、实验原理 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分

几种常见的微生物基础实验

  本文介绍几种常见的微生物基础试验的目的、原理、内容等,以便刚刚接触微生物的同志们对试验有个基本的认识. 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的    1、掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法; 

利用现有技术,如何鉴定一个全新的病毒-2

wuguojun680510网友的观点是:单纯凭分子生物学技术鉴定一个新的病毒是不可能的,只能得知可能是一个新病毒,鉴定一种新病毒还必需从经典途径走起。      1、纯化病毒。      2、大小、

食品微生物检验中无菌操作技术研究

  摘要:食品微生物检验工作中,要对食品的采样、取样和检验等环节进行严格的无菌操作,保证食品检验数据的有效性,真实的反映食品的卫生质量情况。如果在检验中,某个环节出现失误或者漏洞,那么食品检验工作就失去了真正的意义。所以,为了防止在检验中出现不规范操作的现象,对样品造成污染,影响检测结果的可靠性和真

产甲烷菌的分离、培养及鉴定

实验概要1. 掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。2. 观察产甲烷菌的形态特征并了解产甲烷菌的生长特性。实验原理1. 产甲烷菌:厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,其生理作用日益受到人们的重视。产甲烷菌是专性厌氧菌,对氧气非常敏感,因此,产甲烷菌的分离、培养及活菌计数的关键是提供无氧和低氧

原代细胞的培养与建系-3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 &

分子生物学实验基础知识

分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改造或扩增基因和基因产物,使微量的研究对象达到分析水平,是研究基因调控和表达的方法,也

微生物检测基础知识汇总

接种、分离纯化和培养技术一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。接种和分离工具1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种:1)划线

微生物检测基础知识

微生物检测涉及多行业和领域,在实验室检测中有着重要的地位,今天和大家一起对微生物检测中的一些基础操作进行汇总和梳理! 接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。接种和分离工具1.  接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验——酶消化法

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养可用于:(1)血脑屏障的研究;(2)脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究;(3)新药筛选;(4)脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究。实验方法原理以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

用于蛋白质表达和纯化的pET-32α(+)载体的构建

表达载体的构建是生物技术和所需蛋白质产生的基本工具,本文总结了pET-32α(+)载体技术的构建,该技术通常用于研究实验室。该方法包括获得用于构建载体的外源DNA片段,将DNA片段亚克隆到pET-32α(+)表达载体中,在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行蛋白质表达以及在大肠杆菌中在天然条件下进

土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术

 一、目的和内容    目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术.    内容:  1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌.  2.用平板划线方法分离微生物.  3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术.&nbs

土壤的稀释分离、纯化微生物及无菌操作技术

一、目的和内容目的:学习从土壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术.内容:1.用稀释法分离细菌、放线菌和霉菌.2.用平板划线方法分离微生物.3.学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术. 二、材料和用具金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和普通变形菌(Proteus v

国家药监局印发食品安全检验机构技术装备等基本标准

关于印发餐饮服务食品安全检验机构技术装备基本标准和现场快速检测设备配备基本标准的通知 国食药监食[2011]130号 各省、自治区、直辖市及新疆生产建设兵团食品药品监督管理局:   为贯彻落实《食品安全法》、《食品安全法实施条例》以及《餐饮服务食品安全监督管理办法》,逐步建立

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

微生物检测基础知识汇总(一)

接种、分离纯化和培养技术一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。接种和分离工具1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种:1)划线

个别组织细胞的培养

体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别