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使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(一)

引言 PEG 400等药物赋形剂通常被加入到制剂中以促进其在介质中溶解。然而,这些化合物却可引发显著的基质效应,尤其是在LC/MS/MS分析中产生的离子抑制效应。常规药物研发流程中使用的快速LC梯度方法,容易导致此类化合物和目标分析物的共流出。由于这种共流出物已被证实是导致离子抑制效应的主要原因,因此在早期药代动力学(PK)研究中,赋形剂浓度偏高可能会带来棘手的问题1-3。为尽量减少这一问题引发的不良影响,目前已研究出的方法包括:LC梯度调节2,3,分析色谱柱的选择1,样品制备策略的方法开发1-3,样品稀释5,甚至是全新制剂药的开发4。即便其中部分方法已取得成效,他们也存在各自的局限性。很显然,分析员通常无法自己选择制剂药赋形剂。无论是改变梯度或流动相,还是色谱柱的选择,LC条件的优化都能够针对部分分析物解决这一问题,但它既无法应用到全部分析物,也需要更多的方法开发作为辅助支持。同时,对LC运行条件的过多优化并不利于高通量分......阅读全文

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(一)

引言 PEG 400等药物赋形剂通常被加入到制剂中以促进其在介质中溶解。然而,这些化合物却可引发显著的基质效应,尤其是在LC/MS/MS分析中产生的离子抑制效应。常规药物研发流程中使用的快速LC梯度方法,容易导致此类化合物和目标分析物的共流出。由于这种共流出物已被证实是导致离子抑制效应的主要原因

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(三)

将PEG 400从血浆中去除的主要目的就是为了清除可能引发的离子抑制效应。图5为由下面方程式得出的基质效应数据一览,据最新AAPS论文报道6。基质效应 =(含PEG的峰响应值/不含PEG的峰响应值) 图表A所示数据来源于经Oasis MCX萃取去除PEG的血浆样品。图表B所示数据来源于经萃取后又

使用复合模式SPE技术去除血浆样品中的聚乙二醇400(二)

数据管理 色谱系统: MassLynx®V4.1 SCN714和MS软件结果与讨论 PEG 400及其他四种测试化合物的色谱图如图1所示。图中宽峰是PEG400丰度较大的分子离子峰的综合TIC,包括以下分子量的PEG单峰:370、414、458、502、546、590和634。标准品(醋丁洛尔、美托

人血浆中缓激肽的SPE LC-MS/MS定量检测方法(一)

关键词 生物分析,Oasis,样品制备,肽定量,缓激肽,UPLC,CORTECS,血浆简介 缓激肽是一种含有9种氨基酸的生理和药理活性肽,由蛋白质的激肽基团衍生而来(图1)。激肽是可以促使血管舒张、血管通透性增强、一氧化氮释放和花生四烯酸流动的效应因子。它是血压、肾功能和心脏功能的重要调节因子,还参

血浆去除术的基本特点

中文名称血浆去除术英文名称plasmapheresis定  义一种适用于某些自身免疫病的治疗方法。通过取患者全血,分离其有形成分(各种血细胞),然后与同型新鲜冻血浆或白蛋白混合,再回输给该患者。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),自身免疫病(三级学科)

博纳艾杰尔科技推出固相萃取中的MAS方法

     MAS的全称是:Multi-function Impurity Adsorption SPE,就是"多重机制杂质吸附萃取净化法",该方法主要通过多官能化的复合吸附材料,将生物样品中的主要干扰杂质吸附;同时将强水溶性的被测物质留在样品溶液中,而达到净化和富集的目的。在药物代谢分析领域,开阔了

使用Ostro样品制备产品从血浆中提取磷脂(一)

简介:多数“组学”研究的共同目标是鉴定疾病分子标记物、理解疾病作用机理,进而发现潜在的药物靶点。通常情况下,用于研究的体液因为与活体器官和组织密切接触所以其对身体病理状态特定反应非常灵敏。在脂质组学分析中,通常采用液液提取的方式对血浆的磷脂进行研究。过去也曾有固相萃取的应用。氨丙基硅胶柱也可用于分析

Porvair P3使用SPE和蛋白质沉淀技术在96孔板中制备生物样品

问题以几种方式解决了从离体样品(例如血液,精液,血清,尿液和脊髓液)中去除不需要的大生物分子,以便对这些样品中的小分子进行定量分析的问题。需要去除的主要干扰成分是蛋白质。这些大分子变得非常粘,并可能损坏分析仪器,尤其是色谱仪。较大的蛋白质堵塞色谱柱中的小孔。色谱是生命科学研究中要求定量分析的标准分离

人血浆中缓激肽的SPE LC-MS/MS定量检测方法(四)

预分析收集和处理的重要性对血浆中的缓激肽进行准确定量十分困难,因为缓激肽可以在采血和样品制备中经蛋白水解过程而生成1,6,7。本研究特别注重血液收集方案,通过添加蛋白酶抑制剂以防止体外缓激肽的形成。在图6中,A图和B图显示出,如果采用同一供体和相同的收集方案,将血液收集到分别添加和未添加蛋白酶抑制剂

人血浆中缓激肽的SPE LC-MS/MS定量检测方法(二)

使用Oasis WCX提取样品 根据图2所示方案提取预处理的血浆样品。所有溶液按体积计。对μElution板上放置样品的孔实施全部提取步骤。 结果与讨论 质谱分析 在m/z 531和m/z 354观察到缓激肽的2+和3+母离子。缓激肽(图A)和IS(图B)的3+母离子的典型MS/MS谱图如图3所示

人血浆中缓激肽的SPE LC-MS/MS定量检测方法(三)

样品制备将人血浆收集到含有EDTA和蛋白酶抑制剂的试管中,以防止体外形成缓激肽。使用Oasis WCX(一种混合型吸附剂)进行SPE提取,提高提取的选择性。此吸附剂依靠反相和离子交换保留机制将复杂血浆样品中的缓激肽与其它高丰度多肽选择性地分离开来。Oasis μElution96孔提取板

哪些样品需要去除高丰度蛋白?怎么去除?

(1)一般情况下,血清、血浆样品中都会存在高丰度蛋白(白蛋白等免疫蛋白),如果客户是此类样品,需提前跟客户沟通好,一定需要去除高丰度蛋白;目前有成熟的试剂盒可以去除血清中的高丰度蛋白。 (2)体液样品,细胞培养液等样品,出现高丰度蛋白的情况也比较高,这类样品,如果出现高丰度蛋白,需要先通过质谱鉴定是

ionKey/MS优化血浆中缓激肽SPE LC-MS/MS定量检测方法

对多肽类物质进行稳定、灵敏分析的需求是色谱分离和质谱测定的共同挑战。常见的肽通常难以通过LC-MS/MS进行分析,这是因为其不易离子化以及不易产生理想的碎片离子而导致MS灵敏度较低,从而使得LC和样品制备方法开发非常困难。之前的应用纪要(720004833ZH)详细说明了如何开发一种快速、灵活的SP

SPE技术的利与弊——固相萃取技术的利弊评价(一)

固相萃取技术作为一种样品前处理方式,有机溶剂消耗量少,可批量处理样品,既可富集,又能除杂质。但目前该技术在国内市场的应用仍有限,这与使用方式和期望有关,也与技术本身的局限性有关。固相萃取可以作为前处理手段的一个很好补充,但是在使用时,一定要了解其优点和缺点,扬长避短。 固相萃取(Solid

透析去除蛋白样品中的表面活性剂

在蛋白质生物化学中,表面活性剂广泛用于样品溶解,如膜蛋白或包括脂质在内的杂质。此外,在蛋白组学样品制备中,表面活性剂也变得越来越重要。但不管怎样,下游分析会由于表面活性剂的存在而被干扰。质谱、层析分离以及光谱读数可能分别会由于信号抑制、复合物形成以及较高的空白值而被妨碍。 因此,要么选择可与所用分析

简述SPE技术的进展

  SPE技术固有的优势使其在生物样本分析中有着越来越广泛的应用,关于其新型固定相萃取剂和自动化操作设备的研究与应用方面的新进展。  1.新型固相萃取剂  扩大萃取剂的适用范围,即提高固相萃取的通用性。因此,将极性、非极性基团、离子(阴、阳)交换基团或高分。  固相萃取的填料更具有选择性。苯基硼酸(

浅谈SPE技术的利与弊

固相萃取技术作为一种样品前处理方式,有机溶剂消耗量少,可批量处理样品,既可富集,又能除杂质。但目前该技术在国内市场的应用仍有限,这与使用方式和期望有关,也与技术本身的局限性有关。固相萃取可以作为前处理手段的一个很好补充,但是在使用时,一定要了解其优点和缺点,扬长避短。 固相萃取(Solid

Southern blot检测技术在模式动物制备中的应用‍(一)

哈喽,小伙伴们!走过不要错过,又到了科普知识的时间了,喜欢做分子实验的小伙伴一定听说过Southern blot这门检测技术,但大家知道为什么叫Southern吗?今天小编就为大家科普一下这门实验技术。Southern Blot是最早出现的blot(印迹)技术,它是检测DNA的一种方法。这项

分析血浆样品中白消安的临床研究方法

  应用优势:   ■ 利用色谱和高选择性的质谱检测提高 分析选择性   ■ 宽的动态范围(范围拓宽200倍)   ■ 样品制备过程简单、经济,仅使用极少 量的样品   ■ 分析速度快   白消安是一种双功能烷基化试剂,其生物利用度受个体年龄、疾病状态和药 物相互作用等因素的影响,在不

固相萃取技术及其在生物样本分析中的应用与进展

 固相萃取技术是一种发展较快的样本处理技术。本文综述该技术的基本原理和方法,近年来填料的改进,操作方法的创新,自动化仪器的发展及其在生物样本分析中的应用。   近20年来,仪器分析得到了迅猛发展,尤其是计算机和微处理技术的进步,使分析方法自动化成为可能。就生物样本的分析而言,分析过程包括采样、样本贮

研究发现农林复合模式中种植距离和密度优化

  核桃(Juglans regia L.)作为我国重要的经济树种,不仅产生了可观的经济效益,而且提供了重要的生态服务功能。当前核桃园的传统管理方式,如清理地表、地表裸露,往往造成严重的水土流失、肥力下降和光热水资源的浪费,从而抑制核桃树生长和降低核桃的产量。因此,利用间作技术,可充分利用核桃园的

农药分析中蒸发样品制备技术的比较研究(一)

Felix Massat博士,Benoît Planel*,Antoine Venezia法国 瓦朗斯 Laboratoire départemental d’analyses de la Drôme生物实验室 简介当一个高度可控的环境,如环境分析实验室,需要引进任何新的仪器或设备时,这些新的仪器设

固相萃取技术在样品处理中的应用(一)

在2003版的“食品卫生检测方法”标准系列中,有一个较大的改动就是很多项目,尤其是农药项目的前处理普遍使用了固相萃取技术。现针对这一技术的原理、使用和误区进行探讨。一.固相萃取技术简介固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)技术,发展于上世纪70年代,由于其具有高效、可靠

双三元液相色谱DGLC

样品前处理是HPLC分析中必不可少的一部分,常需手工且需多步操作才能完成,要比HPLC分离和数据处理等花费更多的时间。其作用是去除试样中的干扰物质,使痕量组分得到富集,便于检测和分离,且不损害色谱柱。因此,在分析方法的建立和常规分析中,方法的精密度和准确性很大程度上取决于样品的前处理操作。

MAS:新型快速样品前处理方法

图1.  MAS方法流程示意图,SPE柱管形式。现代前处理技术在要求净化效果的同时,越来越追求方法的快速及易操作性,MAS方法,作为一种多重机制杂质吸附萃取快速净化法也应运而生。 MAS(Multi-function Impurity Adsorption SPE)利用“多重机制

使用Ostro样品制备产品从血浆中提取磷脂

多数“组学”研究的共同目标是鉴定疾病分子标记物、理解疾病作用机理,进而发现潜在的药物靶点。通常情况下,用于研究的体液因为与活体器官和组织密切接触所以其对身体病理状态特定反应非常灵敏。 在脂质组学分析中,通常采用液液提取的方式对血浆的磷脂进行研究。过去也曾有固相萃取的应用。氨丙基硅胶柱也可用于分析脂质

动物源性样品中β-受体激动剂的检测(SPE-LC/MS)

  1) SPE 方法  订货号:C2160107-304  固定相: Thermo HyperSep Retain-CX  柱体积: 3mL  固定相重量:200mg  酶解: 动物源性样品2g (精确到0.01g)于50mL离心管中,加入0.2 mol/L乙酸铵溶液(p

食品中塑化剂样品前处理GPC/SPE全解决方案

食品中塑化剂样品前处理GPC/SPE全解决方案---适用于GC/MS,LC/MS检测方法   邻苯二甲酸酯类,又称酞酸酯,缩写PAE,是邻苯二甲酸形成的酯的统称。当被用作塑料增塑剂时,一般指的是邻苯二甲酸与4~15个碳的醇形成的酯。其中邻苯二甲酸二辛酯是最重要的品种。塑化剂也是邻苯二甲酸酯类物质,

样品浓缩仪FSC400D

样品浓缩仪FSC400D特点:独特的气体室;紧凑设计;气体释放针;完全可调节。Techne样品浓缩器可以在几分钟内加速很多样品的浓缩,而传统的方法要花费数小时,是生命科学研究人员和科学家的理想装置。 它设计用于分析工艺中的样品制备,包括药品筛分、激素测定、 色谱分析和闪烁计数。 独特的气体室应用气体

SPE技术精选案例

图1. 克伦特罗标准品(1.0μg/ml)色谱图。 猪肉样品的净化与分析 盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂,猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成,加速脂肪的转化和分解,提高了猪肉的瘦肉率,因此称为瘦肉精。它用量大、使用的时间长、代谢慢,所以在屠宰前到上市,在猪体内的残留量都很大。该残留