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小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)

实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入法处死 1~5 只新生小鼠。2.用 70% 的乙醇冲洗四肢,并用锋利的弯手术剪切下来。在立体解剖显微镜下工作,用钳状骨针将肌肉从皮肤和骨头上切下来。如果四肢都成功地切下来,将肌肉组织存放在一个的组织培养板中,滴上灭菌 PBS,确保这些累计的组织的无菌性。3.加足够量的 PBS 保持组织湿润然后用剌刀在培养板中将其切碎成肉泥。然后加胶原蛋白酶/分散酶/氯化钙溶液,按每克 2 ml 的量加人(对于 1~5pups 的量加 0.5 ml), 继续切割几分钟。以上操作和接下来的步骤都在灭菌的组织培养罩上进行。4.将切碎的组织转移到一个灭菌管中......阅读全文

小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)

实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入

原代细胞培养-小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

原代细胞培养-小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

原代细胞培养-小鼠胚胎分离实验

原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,

小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法

原代小知识——小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法海马体主要负责记忆和学习,日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。小鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织,因为海马神经元细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞

原代细胞的取材和分类方法

将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。  原代细胞培养的步骤一般是:取材→分离→培养和维持,今天我们重点介绍原代细胞的取材和分离方法。  一、取材  人和动

原代细胞分离技术

  1. 悬浮细胞的分离方法  1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。  2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。  3) 用培养基重悬,调整适当细胞浓度后分瓶培养。  4) 如选用悬液中某种细胞,

原代细胞分离技术

实验概要本文介绍了原代细胞分离技术,包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法   1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。   2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的P

原代细胞分离技术

取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基

成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验_分离ARVM细胞

实验材料鼠试剂、试剂盒KH 缓冲液混合气体仪器、耗材对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床圈型架蠕动泵台式医用离心机无菌烧杯ColorpHast pH 试纸实验步骤一、ARVM 细胞分离的准备工作1. 准备如下设备及器材:对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床带夹的圈