总RNA的非变性电泳(nativePAGE)检测
总RNA 的电泳检测,原来我使用 Lambda DNA/EcoR I (或者 Hind III)酶切 Marker,现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰,胶浓度 1-1.2%。加样后,开始电泳 (电压的选择的唯一依据是,我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3cm 后终止电泳,紫外观察。首先能吸引我的一定是非常亮的位置(是否上样过量),然后观察溴酚蓝到二甲苯氰之间的条带情况 (降解情况),再就是加样孔 (杂质残留情况),最后是 23kb 处是否有条带 (基因组 DNA 残留情况)。如果同时抽提的样品是多个,而且类似,在具体分析某一个问题样品前,要先综合一下该批次抽提的总的成败。如果全部有某现象,可能与试剂有关,也可能与样品有关,还可能与操作有关;如果只有部分有该现象,更可能与操作有关,少部分与样品有关 (先做的和后做的可能也有区别)。只有在宏观上有了一个概念,微观分析才有价值,才......阅读全文
总RNA 的非变性电泳(native-PAGE)检测
总RNA 的电泳检测,原来我使用 Lambda DNA/EcoR I (或者 Hind III)酶切 Marker,现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰,胶浓度 1-1.2%。加样后,开始电泳 (电压的选择的唯一依据是,我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3c
总RNA 的非变性电泳检测
总 RNA 的电泳检测,原来我使用 Lambda DNA/EcoR I (或者 Hind III)酶切 Marker,现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰,胶浓度 1-1.2%。加样后,开始电泳 (电压的选择的唯一依据是,我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3cm 后
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)的分类
EcoScan pH 5/6系列酸度计操作说明书 (东南科仪代理产品) 一、基本操作 1. 按ON/OFF键打开仪器,仪器进行自检后进入pH模式。 2. 按MODE键选择您需要的测量模式,在温度模式中,如果没有温度探头将显示25°C时或上次所校正温度时的读数,若有温度探头
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)的分类
有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法:blue native(BN-PAGE),clear native(CN-PAGE),quantitative preparative native continuous(QPNC-PAGE)。 在一个典型的native PAGE方法中,复合物被C
甲醛变性电泳检测RNA完整性
一、材料、试剂和仪器1、材料:植物总RNA 5-10μg2、试剂:1)加样运载缓冲液(Loading buffer)50% 甘油1mmol/L EDTA (pH 8.0)0.25%溴酚蓝25%二甲苯氰FF2)10×TAE Buffer3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:0.1mol/L MOPs (pH7.
非变性胶蛋白电泳
Section 2.1Nondenaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis of ProteinsJohn M. Walker1. IntroductionSDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commo
RNA的甲醛变性电泳实验
RNA的甲醛变性电泳 实验方法原理 用溴化乙锭等荧光染料示踪的核酸电泳结果可用于判定核酸的纯度。由于DNA分子较RNA分子大许多,电泳迁移率低;而RNA中以
RNA的甲醛变性电泳实验
实验方法原理 用溴化乙锭等荧光染料示踪的核酸电泳结果可用于判定核酸的纯度。由于DNA分子较RNA分子大许多,电泳迁移率低;而RNA中以rRNA最多,占到80%~85%,tRNA及核内小分子RNA占15%~20%,mRNA占1%~5%。故总RNA电泳后可呈现特征性的三条带。在原核生物为明显可见的23S
RNA的甲醛变性电泳实验
RNA的甲醛变性电泳可以用于:(1)提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量;(2)由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。实验方法原理用溴化乙锭等荧光染料示踪的核酸电泳结果可用于判定核酸的纯度。由于DNA分子
RNA甲醛变性胶电泳
提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。一、试剂:DEPC(Sigma公司产品),MOPs(Bocherigmer公司产品),甲酰胺(Formamide,Sigma公司