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昆虫病毒的培养实验

实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜纹夜蛾多角体的形状有三角形、四角形、五角形、六角形和圆形,直径大小在 1.2~3.4 μm,用普通显微镜即可观察到。多角体蛋白可被碱性溶液溶解,而释放出病毒粒子。因此,多角体通过污染食物经口感染后,被昆虫的碱性胃液所溶解,释放的病毒粒子通过中肠上皮组织而进入血腔,在脂肪组织及其他组织(包括血细胞)中增殖。斜纹夜蛾感染病毒后明显的特征是体色变化, 30℃ 下感染后 3 d 左右幼虫腹面体色由正常的绿色变为粉红色。发病后期,食欲减退,行动迟缓,死亡前半天到一天,停止摄食,排稀粪,幼虫常向上爬行,在自然界常倒悬或附着于枝叶......阅读全文

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

杆状病毒-昆虫细胞表达系统2

五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒

智能恒温摇床的选购

恒温摇床大致可分为水浴恒温摇床和气浴恒温摇床。水浴恒温摇床可分为常温水浴恒温摇床(室温~100℃)和冷冻水浴恒温摇床(常用为0~100℃,也可定制更低温度的如:-10℃~100℃)。在运行方式上可分为往复式、回旋式和双功能水浴恒温摇床。气浴恒温摇床也可分为常温恒温摇床和冷冻恒温摇床。常温气浴恒温摇床

细胞培养该选怎样的生长环境及摇床

细胞培养需要适宜的生长环境和生长温度,这需要选择合适的摇床或振荡器进行辅助。那么下面就分析一下细胞培养需要的环境生长温度,使用者可以根据细胞生长的环境温度,选择适合的摇床。    大肠杆菌培养、 哺乳动物细胞培养、 植物细胞培养、 酵母细胞培养、 真菌培养、 病毒培养(

重组杆状病毒的纯化实验——编码β-半乳糖苷酶

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,可用于(1)作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率(2)作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白(3)研究杆状病毒基因组的结构与功能(4)研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13

杆状病毒-昆虫细胞表达系统3

七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中

生物摇床是什么?

生物摇床是一种常见的实验室仪器设备,主要是用于细菌培养、发酵、杂交和生物化学反映以及酶、细胞组织培养研究,在医学、生物学、分子学、制药、食品、环境等行业应用广泛。其详细应用如下:大肠杆菌培养:生长迅速,高转速条件下不易被破坏,生长期后需降温,停止细菌生长,保持活性。培养条件:30-35℃、6-8小时

摇床的百科知识

摇床是一种常见的仪器设备,它的主要用途是用于细菌培养、发酵、杂交和生物化学反映以及酶、细胞组织培养研究,当然摇床的意义也很广泛,它分为工业用摇床跟生物用摇床,以下是对摇床做出的详细介绍。  原理历史  6-S摇床(又称6S摇床,选矿摇床,玻璃钢摇床)属于重力选矿设备,由平面溜槽发展而来,以后以其不对

摇床百科知识

 原理历史  6-S摇床(又称6S摇床,选矿摇床,玻璃钢摇床)属于重力选矿设备,由平面溜槽发展而来,以后以其不对称往复运动为特征而自成体系。6-S摇床由床面、机架和传动机构三大部分组成,床面呈梯形或菱形,横向有1°~5°倾斜,在倾斜边上 方配置给矿槽和给水槽,床面上沿纵向布置床条,其高度自传动端向对

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

重组蛋白表达系统

选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我

干货:国内外疫苗行业“现状分析“及”发展预测”

  一、 疫苗的概念及分类  疫苗,是指一切通过注射或黏膜途径接种,可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性抗体或细胞免疫,从而使机体获得保护或消灭该致病原的生物制品,包括蛋白质、多糖、核酸活载体,感染因子等。在我国,疫苗分为一类疫苗和二类疫苗。  一类疫苗,是指政府免费向公民提供,公民应当依照政府的

选择重组蛋白表达的合适方法

重组蛋白是研究生物学过程的重要工具。需要使用表达系统来对其进行制备。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」实验步骤一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及

选择重组蛋白表达的合适方法

实验步骤 一、引言 选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或

杆状病毒储液制备实验

实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细

植物组织培养技术知识汇总(二)

三、生根 生根是获得完整植株的一个关键。通过侧芽和不定芽途径产生的芽长成嫩枝后(此时的嫩枝叫试管苗),必须诱导生根才能移植。促使试管苗生根的方法通常有两种。一种是在固体培养基上诱导生根。当试管苗长到2~3厘米高时,将它从基部切下,转移到只含0.2~0.5毫克/升的萘乙酸或吲哚丁酸的固体培养基

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜

选择重组蛋白表达的合适方法(二)

三、毕赤酵母酵 母 作 为 另 一 种 表 达 重 组 蛋 白 的 强 有 力 的 传 统 工 具 ,已 被 成 功 应 用 于 大 量 蛋 白 质 的表 达 。酵 母 既 具 有 大 肠 杆 菌 的 许 多 优 点 ,如 增 殖 时 间 短 、基 因 组 易 于 操 作 ,又 具 有 真

杆状病毒储液制备实验

基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度             实验方法原理

植物组织培养苗之污染与检测

一、在组织培养中污染来源1. 植物本身具有:(1)植物病原菌 有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。(2)和植物有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。 2. 植物所带入的污染:内在污染源许多植物表面

刘昌孝:认识SARS-CoV-2,抗病新药研发策略该从“何”说起

  过去100年发生的多起事件让世人密切关注未来发生传染病大流行的风险。2018年是1918年流感流行的100周年,估计有数千万人死于100年前那次流感。现在拥有比一个世纪前更好的干预措施,季节性流感疫苗,但不一定完全有效预防。每年需要接种或选择接种的人所占比例较小。世界上还有抗生素可以帮助治疗细菌

组织培养中污染及防止

一、污染的来源1、 植物本身具有:(1)植物病原菌  有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。(2)和植物有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。2、 植物所带入的污染:内在污染源 许多植物表面或大气中

植物组织培养和植物快速繁殖

组织培养是一种利用人工培养基(液)使细胞在体外发育和繁殖的技术。除了能够为许多实验提供大量的动植物细胞材料之外,它也是一项克隆植物细胞和个体的实用技术。实际上,在日常生活中必不可少的蔬菜、花卉及粮食作物中,许多种类都是克隆植物,例如,脱病毒马铃薯和红薯、百合和兰花、水稻等等。病毒是威胁园艺和蔬菜种植

植物组织培养苗之污染来源与污染鉴定

一、在组织培养中污染来源 1. 植物  本身具有: (1)植物  病原菌 有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。 (2)和植物  有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物

植物组织培养与新品种复制

组织培养是克隆细胞和组织的过程。迄今,植物组织培养已取得了许多卓越的成果,并被广泛推广和利用。通过植物组织培养,我们可以从植物体的一部分体细胞快速培育出大量和母体植物相同的植株。另一方面,植物组织培养技术也为我们快速开发和培育新品种创造了条件。一、组织培养与植物快速繁殖组织培养是一种利用人工培养基(

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

Cell头条:奇妙的基因组“手风琴”

  单个基因的复制就能对抗宿主抗病毒防御,这听起来好像不太真实,但是痘病毒(poxviruses)在病毒演化过程中,通过一个基因的快速多拷贝扩增,就能适应并对抗宿主的抗病毒防御,这被称为“基因组手风琴”(Genomic Accordions),利用这个机制,痘病毒实现了突变率虽然低,但能快速进化

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子