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蛋白质生产高峰期的确定实验

蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清仪器、耗材培养瓶离心机实验步骤1. 分别接种3×106 Sf9细胞于15个盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培养液60 mm血组织培养皿中。27℃溫育2 h,使细胞贴壁,然后每次均以感染复数(MOI)为10的量,用野生型病毒感染7个培养皿,用重组病毒感染7个培养皿,剩余的一个培养皿为非感染对照。 2. 在感染后的不同时间(从感染后约15~72 h)收获细胞,感染后15 h 收获非感染细胞。将细胞和培养物上清转移至离心管,4℃1 000 g 离心10 min,收获细胞。 3. 处理并分析细胞和上清(分泌型重组蛋白)。展开 ......阅读全文

蛋白质生产高峰期的确定实验

蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒 胎牛血清 仪器、耗材 培养瓶离心机 实验步骤 1.  分别接种3×106 Sf9细胞于1

蛋白质生产高峰期的确定实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

蛋白质生产高峰期的确定实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清仪器、耗材 培养瓶离心机实验步骤 1.  分别接种3×106 Sf9细胞于15个盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培养液60 mm血组织培养皿中。27℃溫育2 h,使细胞贴壁,然后每次均以感染复数(MOI)为10的量,用野生型病毒感染7个培养皿,用重组

杆状病毒系统蛋白质表达实验——蛋白质生产高峰期的确定

实验方法原理因为重组蛋白的表达受多角体启动子的调节,而多角体启动子在病毒裂解循环的晚期才被激活,所以重组蛋白在感染后期才表达。重组蛋白通常在感染后 15~24 h之间即可检测到,并可积累至感染后 40 h 左右,然后积累水平下降。由于不同的蛋白质在昆虫细胞中有不同的稳定性,推荐用这个系统测定蛋白质积

重组蛋白质的大规模生产实验

基本方案 碱处理法             实验材料 重组蛋白质 仪器、耗材

重组蛋白质的大规模生产实验——基本方案

蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。实验材料重组蛋白质仪器、耗材培养瓶过滤器实验步骤1.  在悬浮培养液中培养Sf9细胞,并使之适应无血清培养液。 2.  准备旋转培养瓶,用于按比例扩增Sf9细胞,将合适大小的两

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合,

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

            实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋

硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验

利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合。在本实验来源「RNA 实验指

如何通过chip确定与基因结合的蛋白质

染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳