腺病毒系统使用指南(三)

腺相关病毒感染目的细胞预实验以2型AAV病毒为例,维真生物为您推荐的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T细胞得出的数据,不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前,进行预实验摸索最佳MOI值,推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒,推荐使用96孔板进行预实验。2. 将目的细胞接种于96孔板中,细胞融合率为50%为最佳。为保证细胞生长良好,请保证细胞贴壁过夜。3. 取10ul AAV病毒原液加入90 ul培养基中做1:100稀释(10-2),以此为起点做梯度稀释直至稀释10-7。可根据实际情况降低或提高稀释倍数。4. 取出提前准备好的96孔板,先确定细胞生长状况是否良好。用准备好的病毒稀释液替代旧培养基,注意保留未加入病毒的细胞孔作为对照组。5. 在加入病毒稀释液后,请在12-24h后观察细胞状态来确认加入的病毒量是否合适,是否因为加入的病毒量影响细胞状态。如果细胞没有变......阅读全文

腺病毒系统使用指南(一)

产品说明书本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。本产品仅供购买方内部研究使用,未经维真生物公司书面许可,严禁转售。产品有限责任担保维真生物保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物更换产品的责任。维真生物不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证。维真生物不对任何由于使用或不正

腺病毒系统使用指南(二)

2.2 rAAV shRNA克隆服务 维真生物为您提供了多种表达shRNA的rAAV,包括U6或H1启动子和作为哺乳动物表达标记的GFP或RFP。同时,也可根据您感兴趣的基因提供shRNA设计服务。2.3 rAAV载体容量腺相关病毒载体能够感染分裂和非分裂细胞。毒性和免疫原性低,适合以相对较高的转染

腺病毒系统使用指南(三)

腺相关病毒感染目的细胞预实验以2型AAV病毒为例,维真生物为您推荐的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T细胞得出的数据,不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前,进行预实验摸索最佳MOI值,推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒,推荐使用

腺病毒系统常见问题解答

1.什么是Adeno-associated virus (AAV) &重组AAV(rAAV) & helper free rAAV?腺相关病毒(AAV)属于微小病毒科,是一类小的、二十面体、无包膜病毒。AAV是一种复制缺陷病毒,复制依赖于其他辅助病毒,如腺病毒和疱疹病毒。AAV不编码自己的聚合酶,因

知识分享:维真腺病毒系统产品手册

  产品说明书  本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。  本产品仅供购买方内部研究使用,未经维真生物公司书面许可,严禁转售。  产品有限责任担保  维真生物公司保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物公司更换产品的责任。维真生物公司不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证

腺病毒简介

腺病毒载体的优点:1. 宿主范围广, 对人致病性低腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已

腺病毒载体综述

腺病毒的一般特性    腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D

什么是腺病毒

腺病毒是一种无外壳的双链dna病毒,基因组长约36kb,衣壳(capsid)呈规则的20面体结构,直径约80-110nm。衣壳含有240个六联体(hexon)、12个五联体(penton)及12根纤毛(fiber),除此之外还有其他一些小蛋白,如vi、viii、ix、iiia和iva2等。六联体是形

腺病毒载体综述2

其他疗法    随着高龄人口的增加,对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒,因其可以感染有丝分裂后的细胞,同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区(immunologically privileged site)中的低病原性,因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。

腺病毒载体的分类

第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所

概述腺病毒的构成

  腺病毒呈无囊膜的球形结构,其病毒粒子在感染的细胞核内常呈晶格状排列,每个病毒颗粒包含一个36 kb的线性双链DNA,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-peat, ITR),ITR的内侧为病毒包装信号,是病毒包装所需要的顺式作用元件。基因

腺病毒的鉴定方法

对难于培养的肠道腺病毒,从粪便标本中粗提后,经电子显微镜或免疫电镜观察。病毒分离与鉴定1.分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝

腺病毒的生活周期

腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞,将基因组释放到宿主细胞核中,以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段,细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒,即第二阶段,作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内完成

简述腺病毒的防治原则

  腺病毒的甲醛灭活疫苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜炎爆发的危险性降至最小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控

腺病毒肺炎的症状简介

  腺病毒除引起上呼吸道感染外,还可引致小儿肺炎,多见于6个月至2岁的婴幼儿腺病毒肺炎最为危重,尤以北方各省多见,病情严重者也较南方为多。  腺病毒一般通过呼吸道传染。在集体儿童机构中往往同时发生腺病毒上呼吸道感染及肺炎。人群血清学研究说明,生后最初数月常存留从母体传递的腺病毒特异抗体,此后一直到2

预防腺病毒的方法介绍

  腺病毒感染主要在冬春季流行,容易在幼儿园、学校和军营新兵中暴发流行。一般来说,腺病毒主要通过呼吸道飞沫、眼分泌物,经呼吸道或接触传播;肠道感染主要通过消化道传播。其预防措施和其他呼吸道、消化道传染病预防相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫。平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身

怎样预防腺病毒55型?

  腺病毒感染主要在冬春季流行,通过呼吸道和接触传播,其预防措施和预防其他呼吸道传染病相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫;平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身体;室内多通风,保持清洁;冬春流行季节尽量少去人员密集的公共场所,外出时戴口罩,以防感染。   一旦发生急性发热、咽喉

概述腺病毒的生活周期

  腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞,将基因组释放到宿主细胞核中,以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段,细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒,即第二阶段,作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内

小儿腺病毒肺炎的简介

  小儿腺病毒肺炎是病毒性肺炎中较常见的一种,多见于6个月~2岁的婴幼儿。冬、春两季发病率较高,多通过呼吸道传染。起病特点为急骤发热,往往自发病第1、2日体温达39℃,一般可持续1周以上,抗生素治疗无效。  腺病毒肺炎是我国发病率较高的病毒性肺炎,流行地区广,以冬春季发病率最高,以三型、七型及十一型

概述腺病毒的研究简史

  人体腺病毒已知有52种,分别命名为adl~ad52,研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA,已知的转录单位至少有5个:EⅠ区位于病毒基因组左侧,可再分成EⅠA和EⅠB,与细胞转化有关;EⅡ区编码DNA结合蛋白,参与病毒的复制;EⅢ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白;EⅣ区位于ad2

关于腺病毒肺炎的简介

  本病的临床特点:病情重,恢复慢,病死率较高,但近年来,该病发病有下降趋势。易发生在冬春季节,特别是冬季,常见于6个月-2岁的婴幼儿。 多数起病急,1-2日内体温升至39-40℃稽留不退,热程较长,轻症7-11日,重者10-20天才退至正常,少数可持续3-4周。发烧3-4天即出现 神经系统症状:精

简述腺病毒的防治方法

  腺病毒感染主要在冬春季流行,容易在幼儿园、学校和军营新兵中暴发流行。一般来说,腺病毒主要通过呼吸道飞沫、眼分泌物,经呼吸道或接触传播;肠道感染主要通过消化道传播。其预防措施和其他呼吸道、消化道传染病预防相似,主要是勤洗手,勤消毒,避免接触患者及其呼吸道飞沫。平常多饮水,多吃蔬菜和水果,注意锻炼身

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

腺病毒包装技术的简介

  腺病毒(Adenovirus)是最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点:   1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。   2. 因

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

腺病毒载体的分类介绍

  第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。  第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性

关于腺病毒的分类介绍

  分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来,已陆续发现了100余个血清型,其中人腺病毒有52种,分为A、B、C、D、E和F六个亚群(subgroup)。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群,在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强,滴度通常可以达到109p

腺病毒的基本信息介绍

  腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈20面体 [2] 排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含4.7kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103D

关于腺病毒的防治原则介绍

  腺病毒的甲醛灭活疫苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜炎爆发的危险性降至最小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控

腺病毒性肠炎的检查

   腺病毒性肠炎--免疫电镜  临床诊断较困难,无法与其他病毒性胃肠炎区别,依赖于实验室检查确诊。采集患儿粪便,用电镜或免疫电镜检查病毒颗粒,用ELISA 法或间接免疫荧光法检查病毒抗原。  实验室检查:  1、常规检查,血常规:白细胞总数多数正常少数略为增多,细胞分类中可有淋巴细胞增加粪便检查: