腺病毒载体综述2
其他疗法 随着高龄人口的增加，对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒，因其可以感染有丝分裂后的细胞，同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区（immunologically privileged site）中的低病原性，因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。已试验了两种传递治疗基因的主要策略。一个涉及到载体的脑内直接注射，另一个则是采用取出体内细胞在体外经由载体感染修饰后回输脑内相关区域的基因疗法（ex vivo基因疗法）（Barkats et al., 1998）。神经母细胞（neuroprogenitor）（Fisher, 1997）和人星型胶质细胞（Ridet et al., 1999）明显可以作为自体同源的细胞载体用于ex vivo修饰和扩张（expansion）。使用四环素调节的腺病毒载体来表达酪氨酸羟基化酶（多巴胺合成途径中的限速酶）在若干动物模......阅读全文
腺病毒载体综述2
其他疗法 随着高龄人口的增加，对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒，因其可以感染有丝分裂后的细胞，同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区（immunologically privileged site）中的低病原性，因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。
腺病毒载体综述
腺病毒的一般特性 腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体（Stewart et al., 1993）。其病毒壳体含有三种主要的蛋白：六邻体（II），五邻体基底（III）和纤突（IV），还有多种其他的辅助蛋白VI，VIII，IX，IIIa和Iva2（Fig. 1）。腺病毒基因组是一个线性的双链D
腺病毒载体的分类
第一代腺病毒载体：一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体：E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所
腺病毒载体有什么缺陷
它的优点体现在转基因效率高，通过体外实验检测结果显示，它能达到将近100%的转导效率，能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在：第一，基因组不能整合到宿主基因组上。第二，感染范围较广，缺乏明显的靶向性，有可能会让人的正常组织细胞被感染，产生一定不良反应。第三，它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原
腺病毒载体的分类介绍
第一代腺病毒载体：一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。 第二代腺病毒载体：E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性
腺病毒载体有什么缺陷
它的优点体现在转基因效率高，通过体外实验检测结果显示，它能达到将近100%的转导效率，能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在：第一，基因组不能整合到宿主基因组上。第二，感染范围较广，缺乏明显的靶向性，有可能会让人的正常组织细胞被感染，产生一定不良反应。第三，它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原
腺病毒载体的应用优势介绍
腺病毒载体转基因效率高，体外实验通常接近100%的转导效率；可转导不同类型的人组织细胞，不受靶细胞是否为分裂细胞所限；容易制得高滴度病毒载体，在细胞培养物中重组病毒滴度可达（10E+11）/ml；进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组，仅瞬间表达，安全性高。因而，腺病毒载体在基因治疗临床试验方面有了
概述腺病毒载体的作用机制
典型的腺病毒载体系统如：穿梭质粒pCA13/腺病毒基因组质粒pBHG11/包装细胞293细胞。pCA13/的HCMV IE启动子－多克隆位点－SV40 AN（poly A）构成外源基因的表达盒，该表达盒的插入使腺病毒E1基因缺失，但是保留其两端侧翼序列（左侧的1~3bp的ITR，右侧从3.5kb
腺病毒载体疫苗的制备与分离
通常来说，开发一种新型疫苗需要经过数年的艰苦过程，包括完整的生产工艺确定。这样的模式没办法对一些爆发性的传染疾病做出快速响应，而且面对一些商业潜力比较小的区域性疾病或者是某些定制化疫苗也是力有不逮。 在病毒载体家族里面，腺病毒的应用非常广泛，它具有诱导抗体和T细胞组合反应的潜能。虽然人群中广泛存在的
腺病毒载体的基本信息介绍
腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛，至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb，两端各有一个反向末端重复区（ITR），ITR内侧为病毒包装信号。基因组上分布着4个早期转录元（E1、E2、E3、E4）承担调节功能，以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期基因E2产物是晚
病毒包装技术——腺病毒载体的制备
1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄
重组新冠疫苗（腺病毒载体）的介绍
重组新冠疫苗（腺病毒载体）是一种表达SARS-CoV-2刺突糖蛋白（S蛋白）的复制缺陷Ad5载体疫苗。疫苗使用一种减毒的普通感冒病毒（腺病毒，易感染人类细胞，但不致病）将编码SARS-CoV-2刺突（S）蛋白的遗传物质传递给细胞。随后这些细胞会产生S蛋白，并到达淋巴结，免疫系统产生抗体，识别S蛋
灭活疫苗与腺病毒载体疫苗的区别
一、制备方法不同1、灭活疫苗：将培养扩增的活病毒通过理化方法，灭活以后经过系列纯化技术制备的疫苗。2、腺病毒载体疫苗：采取5型腺病毒作为载体，导入新冠病毒抗原基因，通过生物反应器制成活载体疫苗。二、特点不同1、灭活疫苗：主要特点是疫苗的成份和天然的病毒结构是比较相似的，是最接近。通常免疫应答也比较强
噬神经元的腺病毒载体的构建
实验概要腺病毒载体，广泛用于外源基因转移到神经胶质细胞，具有细胞毒性。利用腺病毒载体转染神经细胞已经盛行，因为腺病毒载体除了感染细胞后有限的细胞毒性，还利于长期表达转基因。主要试剂人类胚胎肾（HEK）293T细胞腺病毒转移载体质粒腺病毒包装载体PLP1，pLP2（之前），PLP / VSVGDMEM
病毒包装技术5——腺病毒载体的制备介绍
1 菌液的准备 1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。 1.2. 将单
细胞凋亡综述2
在凋亡早期，活化的Caspase-3是主要的功能蛋白酶。凋亡细胞内，32kD的原酶裂解为17kD和12kD的亚单位，两个亚单位组成二聚体，即活化的Caspase-3，活化的Caspase-3进一步水解活化其它Caspase酶及胞浆内目标（如D4-GDI）和核内目标（如PARP）。Bcl-2家族Bcl
综述|mRNA疫苗设计创新和载体开发
前言 疫苗是预防传染性疾病传播的最有效的公共卫生干预措施。成功的疫苗接种根除了许多威胁生命的疾病，如天花和脊髓灰质炎，世界卫生组织估计疫苗每年可防止200-300万人死于破伤风、百日咳、流感和麻疹。然而，尽管常规疫苗取得了明显的成功，但它们并不能有效对付疟原虫、丙型肝炎和HIV等逃避免疫监视的
Science－|－为腺病毒载体疫苗设计提供新策略
Science | 为腺病毒载体疫苗设计提供新策略——黏膜相关恒定T（MAIT）细胞激活显著增强腺病毒载体诱导的T细胞反应 黏膜相关恒定T（MAIT）细胞是一类非常规的T细胞，可以识别微生物衍生的维生素B2生物合成代谢产物，如5-(2-氧代氧亚丙基氨基)-6-(d-核糖胺基) 尿嘧啶（5-OP
基本方案－运用－AdEasy－方法产生重组腺病毒载体
实验材料感兴趣的基因试剂、试剂盒具有卡那霉素抗性的 LB 培养基限制性内切核酸酶穿梭载体 DNA乙酸铵苯酚 氯仿 异戊醇乙醇电促感受态 BJ5183 细胞感受态 DH10B 细胞HBSS 或灭菌的 PBS仪器、耗材铺有卡那霉素抗性的 LB 固体培养基皿琼脂糖凝胶脂质转染 AMINE 试剂Opti-M
scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...2
细胞分布 我们之前比较了iCELLis Nano生物反应器高压缩固定床（4m2）和低压缩固定床（2.67m2）中的细胞分布，发现在低压缩中，细胞分布更加均衡。在高压缩固定床中，细胞分布有较大的差异，取决于计数的细胞来自哪一层（相比顶部，底部的细胞量要高3到4倍）。尽管在低压缩固定床中，差异性较
micro－RNA(miRNA)综述2
miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端，以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制，进而抑制蛋白质合成，阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区
广州生物院在腺病毒载体疫苗领域取得新成果
最近，中科院广州生物医药与健康研究院特聘研究员陈凌博士带领其研究组成员孙彩军博士、冯立强博士等研发了一种可克服体内腺病毒中和抗体的新技术AVIP，并在恒河猴模型中利用腺病毒载体艾滋病疫苗进行了概念验证。相关成果发表于国际病毒学权威期刊《病毒学杂志》（J Virol. 2012,86
腺病毒载体非洲猪瘟疫苗新策略研究获进展
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504755.shtm
广州生物院研究证实腺病毒载体疫苗的安全性
近日，国际著名疫苗学期刊Vaccine杂志发表了中国科学院广州生物医药与健康研究院陈凌博士（客座研究员）指导的课题组的研究成果Epidemiology of adenovirus type 5 neutralizing antibodies in healthy people an
《科学》子刊：腺病毒载体疫苗让免疫治疗“战力爆棚”！
腺病毒（Ad）载体疫苗近些年频繁出现在大众的视野当中，是抗击新冠肺炎的主力军。其实，Ad疫苗的“业务范围”很广，它在肿瘤治疗中同样扮演着举足轻重的角色。 此前已有研究证实，编码肿瘤新生抗原的Ad载体疫苗与PD-1抑制剂联合使用，在小鼠模型中对肿瘤的抑制效果良好[1]。然而，这种联合治疗肿瘤的作
单克隆抗体综述2
1、抗CD20单抗的情况 2、抗CD6单抗情况 目前该单抗是属于抗CD6的IgG1亚型的单克隆抗体。该单抗是针对淋巴瘤细胞，可治疗牛皮癣、类风湿关节炎。古巴分子免疫学中心（CIM）开发的人源化抗CD6单抗正在进行针对类风湿关节炎的I期临床试验。原来CIM开发过鼠源抗CD6单抗，并进行过治疗牛皮癣、类
小分子RNA——microRNA综述(2)
未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现，而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团：miRNA的确切功能是什么？它的目标靶是什么？作用机制是什么？也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选，在果蝇中可以用targeted-disruption缺失miRNA序
基因工程的载体2
2、pUC质粒载体 1987年，J.Messing和J.Vieria采用MCS技术在pBR322基础上构建的。 结构： （1）来自于pBR322的Ori （2）氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生
我国研发可用于5型腺病毒为载体埃博拉病毒疫苗
埃博拉病毒可引发严重的出血热疾病，致死率极高。2014年非洲埃博拉疫情大爆发造成上万人死亡，今年四月以来刚果地区又爆发了埃博拉疫情，并有扩大传播的趋势。疫苗是埃博拉疫情防控的最有效工具。中国科学院广州生物医药与健康研究院冯立强研究员领导的团队探索了一种利用2型腺病毒为载体的埃博拉病毒疫苗，6月6
关于重组新型冠状病毒疫苗（5型腺病毒载体）的简介
重组新型冠状病毒疫苗（5型腺病毒载体）是由康希诺生物和中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生物工程研究所陈薇院士团队合作研发的新型冠状病毒疫苗。 2021年2月25日，疫苗获得国家药品监督管理局批准在国内附条件上市 [1] [7]。5月13日起，上海市各区已陆续开始供应重组新型冠状病毒疫苗（