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荧光实验方法的选择

在荧光分析中,可以采用不同的实验方法以进行分析物质浓度的测量。其中最简单的是直接测定的方法。只要分析物质本身法荧光,便可以通过测量其荧光强度以测定其浓度。许多有机芳族化合物和生物物质有内在的荧光性质,通常可以直接进行荧光测定。若有其他干扰物质存在时,则应预先采用掩蔽或分离的办法加以消除。 对于有些物质,它们或者本身不发荧光,或者因荧光量子产率很低而无法进行直接测定,便只能采用间接测定的办法。间接测定的办法有多种,可按分析物质的具体情况加以适当的选择。 第一种方法是荧光衍生化的办法,即通过某种手段使本身不发光的待分析物质转变为另一种发荧光的化合物,再通过测定该化合物的荧光强度,可间接测定待分析物质。例如许多无机金属离子的荧光测定方法,就是通过使它们与某些金属螯合剂反应生成具有荧光的螯合物之后加以测定的。某些不发光的有机化合物,可以通过降解反应、氧化还原反应、偶联反应、缩合反应、酶催化反应或光化学反......阅读全文

免疫荧光实验方法

 免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技

荧光实验方法的选择

在荧光分析中,可以采用不同的实验方法以进行分析物质浓度的测量。其中最简单的是直接测定的方法。只要分析物质本身法荧光,便可以通过测量其荧光强度以测定其浓度。许多有机芳族化合物和生物物质有内在的荧光性质,通常可以直接进行荧光测定。若有其他干扰物质存在时,则应预先采用掩蔽或分离的办法加以消除。   对于有

荧光原位杂交实验方法

荧光原位杂交实验方法,实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色

免疫荧光实验方法-2

(二)固定和通透   除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。固定的目的有三:   ①防止细胞从玻片上脱落;   ②除去防碍抗原-抗体结合的类脂;   ③使标本易于保存。   标本的固定原则是:   ①不能损伤细胞内的抗原;  

免疫荧光实验方法-1

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术

免疫荧光技术的实验方法及其分类

一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好,线性范围宽,具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例,首先将特异性抗

免疫荧光技术的实验方法及其分类

一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好,线性范围宽,具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例,首先将特异性抗

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程-实验准备

  以下试剂都必须在开始分析之前准备好。  ①PBS 吐温溶液。  ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。  ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。  ④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35

荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与 ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣,在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量,并以数字形式予以表示,在1975年首先被应用到食品工业中,在1985年在化妆品制造业中得到应用。荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升

荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与 ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣,在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量,并以数字形式予以表示,在1975年首先被应用到食品工业中,在1985年在化妆品制造业中得到应用。荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升