等电聚焦电泳色谱仪的载体两性电解质

等电聚焦电泳色谱仪是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基多羧酸同系物和异构体组成的混合物,具有很多既不相同又十分接近的相互连接的pH值,pH = 3~10。一、理想的载体两性电解质应具备的特征: 1、分子量要小,易与被分离大分子物质分离。 2、化学性质稳定。 3、各成分的pI彼此接近,并在其pI值附近有良好的缓冲能力。 4、在pI处具有足够的电导,导电性均匀。 5、载体两性电解质的数目要足够多。 6、可溶性好。 7、对280nm的紫外光没有或仅有很低的吸光度,不干扰样品的测定。二、载体两性电解质pH梯度的形成:载体两性电解质是一系列不同分子的两性电解质组成的混合物,通电后,它们将各......阅读全文

等电聚焦电泳色谱仪的载体两性电解质

等电聚焦电泳色谱仪是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基多羧酸同系物和异构体组成的混合物,具有很多既不相同又十分接近的相互连接的pH

载体两性电解质等电聚焦电泳的优点

  载体两性电解质等电聚焦电泳具有很多优点,如分辨率高、能抵消扩散作用而使区带越走越窄、聚焦浓缩稀样品、重复性好、精确度高等。但其也存在不足之处,如对样品的纯度要求较高;要求样品成分在等电点时稳定,不适宜用于在等电点时不溶解或变性的蛋白质。

载体两性电解质等电聚焦电泳色谱仪工作原理

等电聚焦电泳色谱仪载体两性电解质pH梯度的介质是两性分子,在电场中迁移到自己的等电点后自然形成pH梯度。蛋白质的等电点取决于其氨基酸的组成。组成每一种蛋白质或多肽的氨基酸的数目和比例不同,蛋白质的等电点范围很宽。在电泳仪中加入载体两性电解质,通直流电时,载体两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步升高的

载体两性电解质等电聚焦电泳技术介绍

  载体两性电解质等电聚焦电泳技术是蛋白质理化性质研究的核心技术之一,载体两性电解质等电聚焦电泳的基本原理是利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同,在一个稳定、连续的线性的p H梯度中进行蛋白质的分离和分析电泳检测方法。  是1966年由2位瑞典科学家Harry Rilbe和OlovVesterb

等电聚焦电泳色谱仪分析中载体两性电解质的变化

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质具有两性解离和等电点的特征,加入有pH梯度的凝胶介质中,在电场中经过一定时间后,各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上,形成分离的蛋白质区带。等电聚焦电泳具有灵敏度高、分辨率高和重复性好等特点,特别适合大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究

载体两性电解质等电聚焦电泳的基本原理

  载体两性电解质等电聚焦电泳的基本原理是利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同,在一个稳定、连续的线性的pH梯度中进行蛋白质的分离和分析电泳检测方法。

载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪特点

载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定的、连续的、线性或非线性的pH梯度中进行分离,具有以下特点:一、优点:1、分辨率高,区带清晰、窄。2、加样部位自由,重现性好。3、可测定蛋白和多肽的等电点。二、缺点:1、载体两性电解质合成过程复杂,影响蛋白质点

载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪介绍

载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定的、连续的、线性或非线性的pH梯度中进行分离。一、载体两性电解质的概念:载体两性电解质是两性的,使它们在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可以作为载体。两性电解质不能用于等电聚焦,只有载体两性电解质,即

载体两性电解质pH梯度等电聚焦实验—薄层分析等电聚焦

实验方法原理利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性 pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析。所以利用等电聚焦技术分析的对象只限于蛋白质和两性分子。分析的条件是凝胶中有稳定的、连续的和线性的 pH 梯度。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液仪器、耗材注射器水浴实验步骤一

载体两性电解质pH梯度等电聚焦实验

实验方法原理 利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性 pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析。所以利用等电聚焦技术分析的对象只限于蛋白质和两性分子。分析的条件是凝胶中有稳定的、连续的和线性的 pH 梯度。试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液仪器、耗材 注射器水浴实验

等电聚焦载体两性电解质(carrier-ampholyte)的选择

载体两性电解质必备的条件: 1.可溶性要好,为了保证等电聚焦过程中PH梯度的形成和蛋白样品的迁移,载体两性电解质必须具有很好的溶解性能。 2.紫外吸收低,不发荧光。由于制备分离时,检测蛋白质的方法通常是测量280cm的吸光度,因此要求载体两性电解质在280cm的吸光度尽可能低。 3

理想的等电聚焦电泳仪载体两性电解质应具备的条件

等电聚焦电泳仪载体两性电解质的介质是两性分子,在电场中迁移到自己的等电点后自然形成pH梯度。理想的载体两性电解质应具备以下条件:一、易溶于水,在pI处应有足够的缓冲能力,形成稳定的pH梯度,不致被蛋白质或其它两性电解质改变pH梯度。二、在pI处应有良好的电导和相同的电导系数,以保持均匀的电场。三、分

等电聚焦电泳色谱仪的特点

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。一、进行等电聚

等电点聚焦电泳

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

等电聚焦电泳色谱仪的检测方法

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离,检测方法有染色法、扫描法和其它检测方法。一、染色法:1、考马斯亮蓝染色法。2、银染色法。3、同工酶染色法。4、专一蛋白染色法。5、荧光标记以及免疫法。二、扫描法:激光光源强度大,单色性好,扫描I

等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的类型

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定的、连续的和线性的pH梯度中进行分离,具有灵敏度高、分辨率高和重复性好等特点,特别适合大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究。pH梯度按形成方式可分为载体两性电解质pH梯度和固相pH梯度等。一、载体两性电

等电聚焦电泳的技术特点

是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中,当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷,向负极移动;若其处在高于其本身等电点的环境中,则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高。

等电聚焦电泳的梯度组成

  pH梯度的组成方式有二种,一种是人工pH梯度,由于其不稳定,重复性差,现已不再使用。另一种是天然pH梯度。天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物,在正极端引入酸液,如硫酸、磷酸或醋酸等,在负极端引入碱液,如氢氧化钠、氨水等。电泳开始前两性电解质的

等电点聚焦电泳的定义

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

制备电泳实验——等电聚焦制备电泳

实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍(一)

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。按pH梯度的形成原理不同可分为载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳和固相pH梯度等电聚焦电泳。一、载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳:1、理想的载体两性电解质应具备的条件:载体两性电解质是两性分子

等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍(二)

8、载体两性电解质pH值梯度不稳定的原因:阴极漂移是指在等电聚焦电泳中pH梯度的碱性端逐渐消失的过程。反之,如果其酸性端逐渐消失则称为阳极漂移。为了阐明等电聚焦电泳中pH值梯度不稳定的机制,提出了各种假说:(1)载体两性电解质向阴、阳极的等速电泳迁移。(2)在阴极因CO2的吸附而引起阴极液组分和浓度

等电聚焦电泳色谱仪pH梯度不稳定的原因

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定的、连续的、线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦电泳技术在不断进步,却一直存在着pH值梯度不稳定的现象,即存在着pH梯度的阴极和阳极漂移现象。阴极漂移是指在等电聚焦电泳中pH梯度的碱性端逐渐消失的过程。反之,如果其酸性端逐渐消失则

影响等电聚焦电泳色谱仪分离容量的因素

等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同,在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。等电聚焦是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中的过程。一、影响等电

等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的形成过程

等电聚焦电泳色谱仪是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,载体两性电解质形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,不同的蛋白质移动到其相当的等电点位置上,聚焦于一个狭窄区带中而达到分离。载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基多羧酸同系物和异构体组成的混合物,具有很多既不相同又十分接近的相互连接的

等电聚焦凝胶电泳原理

等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移

等电聚焦电泳与普通电泳区别

两者的原理上的区别:等电聚焦是根据被分离的蛋白质组分间的等电点的差异被分离,具有不同等电点的蛋白质会停留在相应的pH区带,而普通的SDS-PAGE凝胶电泳是根据蛋白质组分间的分子量大小差异进行分离的,分子量不同的蛋白质会停留在相应孔径的凝胶层。

等电点聚焦电泳的技术介绍

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

等电点聚焦电泳的技术介绍

聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

毛细管区带电泳色谱仪与毛细管等电聚焦电泳色谱仪比较

毛细管区带电泳色谱仪是利用溶质分子在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个个独立的溶质带而达到分离,毛细管等电聚焦电泳色谱仪是利用不同等电点的溶质分子分别聚集在毛细管内不同的位置上不作迁移而达到分离。两者比较如下:一、分离原理:  1、毛细管区带电泳色谱仪:电泳淌度不同  2、毛细管等电