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细胞污染的一些总结和心得

小生刚开始做细胞培养不久,对于一个细胞培养的新手来说,最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子,结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得,整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助,也希望各位达人作出补充,大家共同进步。概述凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染,细胞污染不能完全被消除,但能减少其发生的频率和后果的严重性。细胞污染根据污染源主要可以分为物理性,化学性和生物性污染。一、物理性污染的来源、危害及预防物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染。物理性污染通过影响细胞培养体系中的生化成分,从而影响细胞的代谢。培养环境中的物理因素,如温 度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响 。细胞、培养液或其它培养试剂暴露于放射线、辐射或过冷过热的温度中,可以引起细胞代谢发生改变,如细胞同步化......阅读全文

细胞污染的一些总结和心得

小生刚开始做细胞培养不久,对于一个细胞培养的新手来说,最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子,结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得,整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助,也希望各位达人作出补充,大家共

RT-PCR一些心得

从RNA到电泳鉴定一、RT-PCR原理:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA 作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA 为模板,用VI 型胶原蛋白的α1 链的编码序列的特异性引物进行PCR 扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR 使RNA

色谱柱一些使用心得分享

   高效液相色谱仪是进行定量分析,杂质检查等分析工作中主要的精密仪器,色谱柱是液相色谱仪的zui核心部件。在这里,介绍一下使用中的注意事项及使用心得。  一、柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配  捷诺特色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接

对一些DNA提取方法的总结

有时候提DNA不是很顺,所以提出来大家讨论一下,因为我是做微生物的,我首先提供一下关于微生物的DNA 提取方法,大家觉的有可以改进的地方,欢迎讨论!!细菌DNA的提取:(一)试剂:1. 抽提缓冲液2% CTAB (W/V)2% PVP K25 (w/v) (去色素)100mM Tris-HCl (p

对鼻腔肿瘤的诊治的一些总结

鼻腔内出现许多不同的恶性肿瘤,其中最常见的是鳞状细胞癌和腺癌变异,其次是神经内分泌肿瘤和粘膜黑色素瘤。危险因素包括烟草烟雾,是鳞状细胞癌的主要危险因素。吸入性木屑,胶水和粘合剂的职业性和慢性暴露与鼻腔鼻窦腺癌有关。与普通人群相比,职业性接触木屑的人患鼻窦腺癌的风险会增加。组织学鳞状细胞癌是鼻腔肿瘤最

关于实验室数据可靠性的一些心得

关于实验室数据可靠性的一些心得    

Real-time PCR实验心得和RNA提取心得

并不是所有的实验都可以做real-time的,技术路线要选好当你的基因表达量少或有些不表达具体就是做普通pcr跑胶条带比较弱,不是很亮的情况下个人觉得最好不要选择real,不容易做好,特别是融解曲线用sbgr green染料做的话,引物设计时扩增片断最好小于250bp,太长了不好扩预实验先rt-pc

RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)

一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后

文韧对细胞老化这一问题做出了一些总结

细胞老化开始的现象通常为细胞内部会出现空泡(可能是凋亡小体),也可能会出现黑点,大多沿细胞周边排布,内部中间也可能会显现一些,但相对周边较少;老化的细胞会出现细胞体积缩小,胞质浓缩,胞膜起泡,皱缩等现象;老化以后的细胞会出现立体感慢慢消失,开始成扁平状,细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起,细胞不再是

细胞增殖检测:MTT法心得

MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。一、MTT的原理活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。二、MTT法检测细胞增殖实验的注意事项1、培养好细胞点板养细胞没