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植物同工酶技术

一、实验原理 同工酶(isozymes)是指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子形式,即催化同一种反应而结构不同的一族酶。它们是受遗传体系决定的酶的不同分子形式。利用凝胶电泳技术可以将它们分开,用专一的作用底物和特殊染料,把需要分析的酶染色,在胶柱上呈现同工酶谱。 二、实验目的 1.通过实验掌握植物同工酶实验技术,了解植物同工酶分析在遗传学研究中的意义。 2.着重掌握过氧化物酶的提取,电泳与染色技术和分析方法。 三、实验材料 以下内容任选一组或二组即可 1.二种不同品种蚕豆。 2.蚕豆的新种子和储藏2—3年陈种子。 3.蚕豆与豌豆。 4.甘蓝和甘蓝型油菜的幼苗嫩叶。 5.不同品种的柑桔嫩叶。 四、实验器具和药品 1.用具:电泳仪,电泳槽,注射筒及针......阅读全文

植物同工酶实验

一、实验原理 同工酶(isozymes)是指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子   形式,即催化同一种反应而结构不同的一族酶。它们是受遗传体系决定的酶的不同分子  形式。利用凝胶电泳   技术可以将它们分开,用专一的作用底物和特殊染料,把需要分析的酶染色,在胶柱上呈现同工酶谱。

植物同工酶技术

一、实验原理 同工酶(isozymes)是指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子形式,即催化同一种反应而结构不同的一族酶。它们是受遗传体系决定的酶的不同分子形式。利用凝胶电泳技术可以将它们分开,用专一的作用底物和特殊染料,把需要分析的酶染色,在胶柱上呈现同工酶谱。 二、

植物酯酶同工酶基因的染色体定位

一、原理酶和蛋白质是基因表达的产物,基因位于染色体上。当某一对同源染色体缺失时,位于这对染色体上的基因和它们所编码的酶或蛋白质也就随之丢失。以正常小麦及其缺体系为材料,通过蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳和同工酶分析,即可确定编码这些酶或蛋白质的基因在基因组中的定位(位于哪对染色体上)。酯酶是催化酯类化合物

植物过氧化物酶同工酶测定

凡能催化同一种化学反应,但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶(isoenzyme)。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的,所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时,常常要分析同工酶谱的差异。因此,同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。一、原理聚丙烯

什么是同工酶?同工酶的作用

同工酶(isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶。 同工酶的基因先转录成同工酶的信使核糖核酸,后者再

同工酶简介

用电泳方法将LDH同工酶分离,分析其酶谱,发现脊椎动物各组织中有五条酶带。每条酶带的酶蛋白都是由四条肽链组成的四聚体,LDH有两类肽链,A(M)或B(H),各有不同的免疫性质,按排列组合可形成符合于电泳酶带数的五种同工酶。LDH1及LDH5分别由纯粹的4条B链(B4)和4条A链(A4)形成,称为纯聚

同工酶分析

收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20 min 后,冲洗凝胶,

同工酶分析

实验方法原理收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20 m

同工酶分析

            实验方法原理 收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中

同工酶分析

实验方法原理 收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20