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直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

亲和层析方法几乎可以将麦芽糖结合融合蛋白纯化成单组分。麦芽糖结合蛋自(MBP) 是一个由大肠杆菌 malE 基因编码的周质蛋白,是细菌麦芽糖转运系统的成员之一。MBP 能结合微摩尔水平的麦芽糖和麦芽糊精,因此可用交联了麦芽糖的琼脂糖进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 BMP 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒细胞裂解缓冲液细胞洗涤缓冲液柱洗脱缓冲液柱洗涤缓冲液MgCl2PMSFSDS 凝胶加样缓冲液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材Beckman Ti60 转头或相当的转头Sorvall GSA 转头或相当的转头Sorvall SS-34 转头或相当的转头直链淀粉琼脂糖沸水浴超声仪器—次性 Nalgene 滤器实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录1。贮存液稀释......阅读全文

直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

实验材料 表达 BMP 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液细胞洗涤缓冲液柱洗脱缓冲液柱洗涤缓冲液MgCl2PMSFSDS 凝胶加样缓冲液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Beckman Ti60 转头或相当的转头

直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

亲和层析方法几乎可以将麦芽糖结合融合蛋白纯化成单组分。麦芽糖结合蛋自(MBP) 是一个由大肠杆菌 malE 基因编码的周质蛋白,是细菌麦芽糖转运系统的成员之一。MBP 能结合微摩尔水平的麦芽糖和麦芽糊精,因此可用交联了麦芽糖的琼脂糖进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J

直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白

            实验材料 表达 BMP 融合蛋白的大肠杆菌细胞 试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液 细胞洗涤缓冲液 柱洗

谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验

pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽 S 转移酶融合,因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液Tri

谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验

实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 SorvallSS-34 转头或相当的转头谷胱甘肽-琼脂糖树脂皮下注射针头实验步骤

谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验

            实验材料 表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞 试剂、试剂盒 二硫苏糖醇 谷胱甘肽洗脱缓冲液 磷酸

序列特异性DNA结合蛋白的亲和层析纯化实验

实验方法原理 实验材料 两种带有结合位点的合成寡核苷酸各440μg试剂、试剂盒 TE缓冲液 pH 7.810×T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液20 mmol L ATP (钠盐) pH 7.0150 m Ci mL [γ-32P] ATP (6000 Ci mmol)10 U μL T4噬菌体多

序列特异性DNA结合蛋白的亲和层析纯化实验

DNA亲和介质的制备 DNA偶联于溴化氰活化的琼脂糖上 用制备性凝胶电泳纯化寡核苷酸 DNA亲和层析法             实验方法原理

序列特异性DNA结合蛋白亲和层析纯化实验_DNA亲和层析法

实验材料制备性的DNA亲和层析树脂试剂、试剂盒缓冲液Z或其他柱缓冲液(如缓冲液Ze或TM)配制时含不同的KCl浓度(从缓冲液 Z 0.1 mol L KCl 至缓冲液 Z 1 mol L KCl对缓冲液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分纯化的蛋白质组分非特异性的竞争DNA柱再生缓冲液柱储存缓

金属螯合亲和层析实验——MCAC纯化带组氨酸尾可溶融合蛋白

经遗传工程改造的使其氨基端或羧基端带上6个连续的组氨酸残基的重组蛋白,可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸(NTA)使镍离子固相化的层析介质加以提纯,是为金属螯合亲和层析。实验材料蛋白质试剂、试剂盒IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材层析柱转子实验步骤1.  接种含以