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BIORAD采用ProfinityeXactTM融合标签表达系统纯化重组蛋白

BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白 亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于，针对不同的蛋白质需要开发特定的配体和方法。采用保护蛋白质结构和功能完整性的温和条件，已成功地通过一步亲和层析从粗提物中纯化出了多种重组蛋白，纯度达 90％以上。（Arnau et al. 2006）。 然而，对于蛋白质的结构研究和治疗或诊断试剂的应用，我们期望获得天然的无标签蛋白，以避免亲和标签所带来的潜在干扰（Arnau et al. 2006, Bucher et al. 2002）。因此需要用蛋白酶剪切纯化的融合蛋白，然后再经亲和层析去除蛋白酶和切除的融合标签从而获得天然纯品。然而针对某些特定的融合蛋白，......阅读全文