TRAP法端粒酶活性检测实验操作方法及疑难解答

Kim应当不会预测到,他在1994年发明的TRAP会那么受欢迎,被一代又一代的研究者奉为端粒酶 活性检测首选方法。不过,TRAP法虽然灵敏度高,却同样存在瑕疵。下面为大家介绍的是根据TRAP法适当改良的研究专用试剂盒具体情况和使用方法以及常见问题解答。本品与通常的端粒 酶活性测定法相比较,具有以下特征·内标与端粒酶提取液在同一管里进行PCR 扩增,提高了检测的准确性。·提供了阳性对照,可以更加准确地判定阳性实验结果。·优化了引物设计,使PCR 效果进一步提高。使用须知本试剂盒为研究用试剂,不能将其作为诊断或临床检测试剂使用。背景知识端粒酶是合成染色体末端的端粒的酶。端粒(telomere)是真核细胞染色体的天然末端,由上千个6 碱基重复序列(TTAGGG)组成,是细胞必需的遗传组分,它的作用是维持端粒有足够的长度,保证基因信息在复制过程中的准确性,以防止染色体末端遗传信息的丢失。在正常情况下,每个细胞分裂周期都会使端粒......阅读全文

Science:端粒酶的调控

  对于所有多次分裂的细胞来说,维持染色体两端端粒(telomere)的长度是至关重要的。一种称作端粒酶(telomerase)的酶可使两端得以延长,以抵消每次染色体拷贝所发生染色体缩短。端粒酶是细胞生存的必要条件,端粒酶功能丧失可导致干细胞自我更新障碍,从而引起诸如先天性角化不良、再生障碍性贫血和

肿瘤检测端粒酶介绍

端粒酶介绍:  端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的特殊反转录酶,与真核生物细胞DNA末端的端粒(一段特定的核苷酸序列及结构)的合成有关。正常体细胞的端粒长度是随着细胞的分裂逐渐缩短的,端粒酶活性增强,可维持端粒的长度不缩短,使细胞永久增殖而癌变。故端粒酶检测及其抑制剂可用于肿瘤诊断和治疗。端粒酶正常

什么是端粒酶RNA?

端粒酶RNA(TR),是端粒酶的一个组成部分,由端粒酶RNA基因(TERC)编码。端粒酶RNA在脊椎动物中,纤毛虫和酵母菌的序列和结构之间有很大的不同,但它们共享一个5'假结结构的模板序列。脊椎动物端粒酶RNA的3'H / ACA snoRNA的域。

端粒酶的基本特性

端粒(Telomere)是真核细胞染色体末端的特殊结构。人端粒是由6个碱基重复序列(TTAGGG)和结合蛋白组成。端粒有重要的生物学功能,可稳定染色体的功能,防止染色体DNA降解、末端融合,保护染色体结构基因DNA,调节正常细胞生长。由于正常细胞线性DNA复制时5'末端消失,随着体细胞不断增

端粒酶的合成办法

端粒的存在是为了维持染色体的稳定。没有端粒,则末端暴露,易被外切酶水解。而报道说端粒与生命长短有关,这只是个说法,还没成定论。端粒不是用DNA聚合酶来合成的,是用端粒酶来合成的。端粒酶中含有RNA模板,用来合成端粒。

肿瘤检测端粒酶介绍

端粒酶介绍:  端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的特殊反转录酶,与真核生物细胞DNA末端的端粒(一段特定的核苷酸序列及结构)的合成有关。正常体细胞的端粒长度是随着细胞的分裂逐渐缩短的,端粒酶活性增强,可维持端粒的长度不缩短,使细胞永久增殖而癌变。故端粒酶检测及其抑制剂可用于肿瘤诊断和治疗。端粒酶正常

Science聚焦:癌症与端粒酶

  在癌症领域,许多科学家将他们的整个研究生涯都投入到去寻找一些细胞相似点,希望有可能促成针对许多癌症的单一疗法——然而一个多层面的问题很少有机会获得单一的答案。  1997年,科学家们发现了一个他们认为是细胞不死关键原因的基因。端粒酶逆转录酶(TERT)是端粒酶的催化亚单位。尽管细胞永生听起来不错

概述端粒酶的功能特性

  端粒(Telomere)是真核细胞染色体末端的特殊结构。人端粒是由6个碱基重复序列(TTAGGG)和结合蛋白组成。端粒有重要的生物学功能,可稳定染色体的功能,防止染色体DNA降解、末端融合,保护染色体结构基因DNA,调节正常细胞生长。  由于正常细胞线性DNA复制时5'末端消失,随着体细

关于端粒酶的功效介绍

  长生不老  美国德克萨斯大学西南医学中心的细胞生物学及神经系统科学教授杰里·谢伊和伍德林·赖特做了这样一项试验:在采集的包皮细胞(包皮环切术的附带产物)中导入某种基因,该基因可使细胞产生一种酶——端粒酶(Telomerase)。  一般来说,包皮细胞在变老之前可分裂60次左右。但在上述试验中,细

关于端粒酶的基本介绍

  端粒酶(Telomerase),在细胞中负责端粒的延长的一种酶,是基本的核蛋白逆转录酶,可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端,把DNA复制损失的端粒填补起来,使端粒修复延长,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使得细胞分裂的次数增加。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用,

端粒酶的基本信息

端粒酶(Telomerase),在细胞中负责端粒的延长的一种酶,是基本的核蛋白逆转录酶,可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端,把DNA复制损失的端粒填补起来,使端粒修复延长,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使得细胞分裂的次数增加。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用,端粒

端粒酶的合成方法

端粒的存在是为了维持染色体的稳定。没有端粒,则末端暴露,易被外切酶水解。而报道说端粒与生命长短有关,这只是个说法,还没成定论。端粒不是用DNA聚合酶来合成的,是用端粒酶来合成的。端粒酶中含有RNA模板,用来合成端粒。

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。  由于DNA聚合酶不

PCRELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

关于端粒酶的特殊结构介绍

  端粒是染色体末端的一种特殊结构,它是由许多简单短重复序列和端粒结合蛋白(Telomere end-binding protein, TEBP)组成。在正常人体细胞中,可随着细胞分裂而逐渐缩短。  端粒是细胞必需的遗传组分,因为它能够保护和补偿染色体末端遗传信息的丢失,保护它不会被核酸酶识别而免遭

端粒酶研究领域的重要成果!

  本文中,小编整理了多篇研究报告,共同聚焦科学家们在端粒酶研究领域取得的重要成果,分享给大家!图片来源:Vimeo  【1】PNAS:促进癌症的端粒酶也能保护健康细胞  doi:10.1073/pnas.1907199116  马里兰大学和美国国立卫生研究院的新研究揭示了端粒酶的新作用。端粒酶在正

临床化学检查方法介绍端粒酶

端粒酶介绍:  端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的特殊反转录酶,与真核生物细胞DNA末端的端粒(一段特定的核苷酸序列及结构)的合成有关。正常体细胞的端粒长度是随着细胞的分裂逐渐缩短的,端粒酶活性增强,可维持端粒的长度不缩短,使细胞永久增殖而癌变。故端粒酶检测及其抑制剂可用于肿瘤诊断和治疗。端粒酶正常

皮肤干细胞端粒酶的调控

端粒酶的调控正常动物体细胞中端粒酶处于静止状态;而在干细胞中,端粒酶RNA表达较高,端粒酶处于活化状态,随着干细胞的分化,端粒酶活性逐渐降低,至终末分化细胞已检测不出端粒酶活性。缺乏端粒酶的小鼠到第六代时出现了脱毛、伤口上皮再生障碍、造血干细胞再生受阻等异常,表明端粒酶水平的高低直接影响上皮干细胞的

TERT端粒酶的定义和作用

端粒酶是一种核糖核蛋白聚合酶,通过添加端粒重复序列TTagg来维持端粒末端。这种酶由一种具有逆转录酶活性的蛋白质成分(由该基因编码)和一种作为端粒重复模板的RNA成分组成。端粒酶的表达在细胞衰老中起作用,因为它通常在出生后的体细胞中被抑制,导致端粒逐渐缩短。体细胞端粒酶表达的放松调控可能与肿瘤发生有

端粒酶的结构和功能特点

端粒酶(Telomerase),在细胞中负责端粒的延长的一种酶,是基本的核蛋白逆转录酶,可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端,把DNA复制损失的端粒填补起来,使端粒修复延长,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使得细胞分裂的次数增加。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用,端粒

端粒酶活性检测操作必知

近几年来端粒酶由于与长寿、癌症等的研究相关联而备受关注,而端粒酶活性检测具体方法又有那些呢?小编整理了端粒酶活性检测的原理、基本操作技巧 、结果判断、扩增片段检测等方面内容,以飨读者。端粒酶 (Telomerase)是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶。人端粒酶RNA组分(hTR)于1995年被

Science发布端粒酶重大发现

  端粒酶在衰老和大多数癌症中都起着重要的作用,但直到现在都无法清楚地看到端粒酶结构的许多方面。  现在,来自加州大学洛杉矶分校和伯克利分校的科学家,以比以往更高的分辨率生成了端粒酶的图像,提供了有关该酶的一些重要新认识。他们的研究结果发表在10月15日的《科学》(Science)杂志上,有可能最终

奇特的端粒酶与表观遗传关联

  在每次DNA复制完成后,染色体末端都会有轻微的缩短,这个末端重复序列也就是我们熟悉的端粒保护编码DNA区域。在干细胞中,端粒酶能延长端粒结构,因此细胞分裂能不断进行,而在体细胞中,由于编码端粒酶基因的催化亚基:端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TE

人端粒酶(Telomerase)ELISA试剂盒

人端粒酶(Telomerase)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 Telomerase 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Telomerase与单抗结合,加入生物素化的抗人Telomerase,形成

小鼠端粒酶(Telomerase)ELISA试剂盒

小鼠端粒酶(Telomerase)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 Telomerase 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Telomerase与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Telomerase

合成端粒酶主要蛋白结构被揭开

  加利福尼亚大学洛杉矶分校的生化学家近日绘制出合成端粒酶(核糖体蛋白酶)的主要蛋白质及RNA(核糖核酸)的结构,从而揭示了这种对于医治癌症与衰老具有十分重要意义的酶的合成机理。研究成果刊登在7月13日出版的《分子细胞》杂志上。   长期以来,由于端粒酶与癌症及衰老有很大关系,所以一直吸引着科学家

临床化学检查方法介绍端粒酶活性

端粒酶活性介绍:  端粒是真核生物染色体末端的一种特殊结构,由一富含鸟嘌呤的重复DNA序列及其相关蛋白组成。端粒是保护染色体末端稳定必不可少的结构。端粒长度的维持需要端粒酶活性的存在。永生细胞和肿瘤细胞能够长期生存,端粒酶起到了重要的作用。端粒酶是由RNA和蛋白体组成的复合体,属一种专一的依赖RNA

关于端粒酶的注意事项介绍

  值得注意的是,恶性肿瘤细胞具有高活性的端粒酶(它能维持癌细胞端粒的长度,使其无限制扩增。关于癌细胞如何获得永生,1991年Harley提出端粒-端粒酶假说,认为正常细胞衰亡要经过第一致死期M1期(MortalityStage1)和第二期M2期(MortalityStage2)两个阶段。即在细胞有

人端粒酶(TE)酶联免疫说明

本试剂盒仅供研究使用。检测范围:                                                          96T1 IU/L -40 IU/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中