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核酸电泳实验

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB(德元国际Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆操作。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。一、材料 DNA样品、琼脂糖、缓冲液等二、设备 水平式电......阅读全文

核酸电泳实验

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB(德元国际Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外

琼脂糖核酸电泳实验

琼脂糖核酸电泳实验1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架 好梳子;2.根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确 称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加

琼脂糖核酸电泳标准实验步骤

琼脂糖核酸电泳1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染

核酸电泳(RNA电泳与DNA电泳)

(一)DNA的凝胶电泳:凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段; 效果好、分辨率极高,相差1bp的DNA片断就能分开,能容纳相对大量的DNA ,用于核苷酸多态性的分析。

核酸电泳仪类型

 核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分:实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分:核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分:微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分:核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分:微量核酸电泳仪和痕量核

核酸电泳仪类型

核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分:实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分:核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分:微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分:核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分:微量核酸电泳仪和痕量核酸

核酸凝胶电泳-4

5、室温下聚合至少30min,若聚合完全,梳齿下可见二条折光线,小心拔出梳子,用水冲洗样品孔。6、在电泳槽中加入1×TBE缓冲液,使缓冲液覆盖样品孔,并用缓冲液稍淋洗样品孔。7、加上1/6体积6×上样缓冲液与DNA样品及DNA分子量标准液中混合,用微量进样器吸取,小心快速地加入加样孔中(一般加样量3

核酸凝胶电泳-3

3、电泳:电压<10V/cm,电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时,关闭电源。4、取出凝胶块,置紫外透射反射分析仪上观察,即可见桔红的DNA区带。【注意事项】1、加样时枪头不要碰坏孔壁,否则DNA带型不整齐。大多情况下,加样时不必更换枪头,可在阴极槽中反复吸打电泳缓冲液清洗,但对Southe

核酸凝胶电泳-1

核酸是带均匀负电荷的分子,在电场中向正极移动,不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同,在自由泳动时,各核酸分子的迁移率区别很小,难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质,具有分子筛效应,使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异,达到分离的目的。此为分离、鉴定、纯化核酸片段的标准方

核酸的电泳与检测

【实验目的】(1)了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理,学会其具体的操作程序。(2)对提取的DNA进行检测,掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳,核酸分子是两性解离分子,在pH8.0时,DNA