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无DMSO、无血清干细胞冻存技术与使用(非程序降温)

含DMSO的冻存液DMSO是最常用的渗透性冷冻保护剂,广泛应用于细胞的冷冻保存。在细胞水平,DMSO除了是一种DNA致畸因子外,还可渗入细胞内,分子中S=O键可能与细胞内蛋白发生化学反应,致使蛋白变性。因此,有些细胞和组织细胞对DMSO敏感,使用含DMSO的细胞冷冻液会降低细胞复苏后活性,进而影响细胞的功能。临床上,使用经DMSO冻存的细胞会引发广泛的身体不适,最常见的是腹泻(约50%),严重的会造成患者神经系统、呼吸系统损伤甚至死亡(0.2%)。在没有可替代DMSO的冷冻保护剂以前,为了降低DMSO的毒性,通常采用两种方法——降低冻存液中DMSO的含量以及复苏后洗涤除去DMSO残留。因此,研究者针对不同细胞开发了2.5~10%DMSO并且添加其它不同冷冻保护剂的复合配方。但这些不同种类改良的DMSO冻存液因成分复杂,浓度各异,难以标准化地推广用于多种细胞类型。临床上,使用DMSO冷冻保存的细胞,细胞复苏后最好应洗涤并离心2次,......阅读全文

无DMSO、无血清干细胞冻存技术与使用(非程序降温)

含DMSO的冻存液DMSO是最常用的渗透性冷冻保护剂,广泛应用于细胞的冷冻保存。在细胞水平,DMSO除了是一种DNA致畸因子外,还可渗入细胞内,分子中S=O键可能与细胞内蛋白发生化学反应,致使蛋白变性。因此,有些细胞和组织细胞对DMSO敏感,使用含DMSO的细胞冷冻液会降低细胞复苏后活性,进而影响细

无DMSO、化学成分明确的无血清细胞冻存液的开发

低温保护剂诸如二甲基亚砜(DMSO)、甘油和丙二醇等已经被广泛用于冷冻保存细胞和组织。DMSO是细胞保存中最常用的渗透型冷冻剂,但它对细胞也存在一定的毒性,常温下能使胞内蛋白变性。DMSO导致的不良反应在动物实验中已被证实。在一些临床治疗案例中,注射了含有DMSO的造血干细胞的病人表现出恶心、头痛、

无血清细胞冻存液与传统细胞冻存液的对比

无血清细胞冻存液:采用专利的冻存配方,用包括重组人血白蛋白等多种蛋白组分替代了血清的用途。用包括DMSO在内的复合冻存保护剂替代了单一的DMSO的保护作用。复合保护剂的内部保护剂,易于穿透细胞膜,避免在细胞冻存过程中细胞内部的水分子形成冰晶损伤细胞;外部保护剂,可在溶液形成冰晶之前,在细胞膜外部竞争

无血清快速细胞冻存液操作说明

无血清快速细胞冻存液,通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。产品特色高安全性,完全使用医药品等级原料进行生产,不含动物成分,

细胞治疗之无血清细胞冻存

在细胞培养中,细胞冻存是最关键环节之一,尤其在细胞治疗、细胞存储中对细胞冻存更有特殊要求,下面就根据降温速度以及冻存液组分对细胞冻存做详细介绍。根据降温速度区分,细胞冻存可以分为程序降温冻存与非程序降温冻存。根据冻存方式不同可以分为慢速冻存(程序降温法)与快速冻存(非程序降温法)。程序降温冻存技术要

细胞治疗之无血清细胞冻存

在细胞培养中,细胞冻存是最关键环节之一,尤其在细胞治疗、细胞存储中对细胞冻存更有特殊要求,下面就根据降温速度以及冻存液组分对细胞冻存做详细介绍。根据降温速度区分,细胞冻存可以分为程序降温冻存与非程序降温冻存。根据冻存方式不同可以分为慢速冻存(程序降温法)与快速冻存(非程序降温法)。程序降温冻存技术要

冻存细胞时,还在坚持缓冻原则吗?

一、我们先来说说何为缓冻:缓冻即为冻存细胞时,要程序降温——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 过夜,次日投入液氮内。二、那为什么要进行缓冻呢?其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分,在

LiveCyte即用型细胞冻存液常见问题汇总

1.1601、1602、1603、1604分别对应什么细胞和用途?答:常用细胞系&肿瘤细胞系干细胞&原代细胞无血清含DMSO16011602无血清无DMSO160316042.细胞冻存密度为多少合适?答:对于大多数细胞类型,1~3×106/毫升即可;对于血液细胞,需要更高的密度,推荐5×106/毫升

BI教你如何做好细胞冻存与复苏

选 好 细 胞 冻 存 液 是 基 础使用动物血清常常会遇到很多问题,例如:病毒感染、其他动物源的污染。使用无血清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血清冻存液可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定慢 慢 做 冷 冻若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下

多能干细胞(ES/iPS)冻存和复苏方法

多能干细胞(ES/iPS)冻存是干细胞扩增传代过程中重要的一环,但是多能干细胞不同于普通细胞系,其增殖扩增过程中需要聚团生长,为保持其细胞活性,不建议单细胞传代。而且使用血清+DMSO冻存方法,不能很好的保持细胞活性,且复苏细胞成活率较低。本文就重点介绍多能干细胞进行冻存以及解冻的标准化步骤。介绍使